甘星
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AlphaLISA技术的发展及应用被引量：2
- 2011年
- AlphaLISA技术是一种基于微珠的化学发光的新型均相检测技术,与传统的ELISA技术相比具有更高的敏感性、精确性、均一性、背景低、广泛的动态检测范围,而且无需洗涤及样本需求量极少等特点.该技术可用于多种组织、细胞来源的生物分子的检测,如细胞因子、抗原抗体的检测、蛋白相互作用及蛋白质与核酸相互作用的检测以及药物分析等研究.随着AlphaLISA技术的发展,该技术已在医学及分子生物学领域得到了广泛的应用.
- 王颖宋娟崔雨甘星孙鹏王克霞韩俊董小平
- 关键词：分子检测
- PrP106-126多肽诱导凋亡细胞中14-3-3β的降解被引量：2
- 2012年
- 本研究将PrP106-126多肽和HeLa细胞共孵育4h和8h,采用Hoechst染色分析发现PrP106-126诱导凋亡细胞细胞核出现不同程度的染色质浓集,固缩及碎裂的细胞凋亡征象。Western blotting检测发现PrP106-126诱导细胞中的多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)降解,提示PrP106-126通过caspase3途径引起细胞凋亡现象。PrP106-126诱导的细胞中14-3-3β在不同孵育时间也出现降解,而Real-time PCR检测14-3-3βmRNA未发生变化。本研究证明PrP106-126通过caspase3诱导HeLa细胞凋亡,并可导致抗凋亡蛋白14-3-3β的降解而加速凋亡的形成。
- 孙鹏宋娟张瑾宋芹芹甘星崔雨高晨博晓真韩俊
- 关键词：凋亡
- 甲型肝炎病毒IgM AlphaLISA检测方法的初步建立被引量：2
- 2012年
- 目的建立甲型肝炎病毒抗体IgM的AlphaLISA检测。方法浓缩甲型肝炎病毒抗原并生物素化，通过dot—Blot法摸索出生物素化的甲型肝炎病毒的最适量为6×10-8ng。优化供体珠、受体微珠、血清等实验反应条件，建立了甲型肝炎病毒的AlphaLISA的IgM检测方法。并对23份感染甲型肝炎病毒的IgM阳性患者和70份健康人的血清进行检测。结果AlphaLISA甲型肝炎病毒的IgM方法检测：灵敏度（真阳性率）为78％；特异度（真阴性率）为98．5％；假阳性率为1％；假阴性率为22％；阳性预测值为95％；阴性预测值为93％；准确度为94％。结论建立了均相、快速检测AlphaLISA甲型肝炎病毒IgM检测方法并得到初步应用。
- 甘星王颖宋娟崔雨孙鹏高晨李朝品韩俊
- 关键词：免疫球蛋白M
- 肠道病毒71型抵抗I型干扰素诱导的抗病毒作用被引量：6
- 2012年
- 目的研究肠道病毒71型（EV71）抵抗I型干扰素（interferon，IFN）诱导的抗病毒作用。方法将1000U／ml的I型干扰素（α，β）加入HeLa细胞后，去除上清中的干扰素，感染带有GFP的重组单纯疱疹病毒（HSV-1）和EV71，观察GFP的表达和PCR检测HSV-1核酸，判断I型干扰素对HSV，1的作用。通过RT—PCR方法检测EV712A基因的表达从而判断EV71病毒的复制能力。结果I型干扰素（α，β）诱导HeLa细胞产生抗病毒蛋白而有效地抑制重组HSV-1GFP的表达和核酸扩增。而EV712A的RT—PCR结果证实EV71可在I型干扰素（α，β）作用后的HeLa细胞中有效增殖。结论I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白；EV71可在I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白的HeLa细胞中有效增殖。
- 崔雨宋娟宋芹芹孙鹏甘星李公启王克霞韩俊
- 关键词：肠道病毒属干扰素I型
- EV71通过2A蛋白酶切割Nup62而抑制核转运被引量：6
- 2013年
- 为了解EV71病毒对细胞核转运机制的影响,本研究构建了具有核定位信号的绿色荧光蛋白表达载体(pG-FP-NLS)。将此表达载体转染细胞后,使用EV71病毒感染转染细胞,结果发现EV71病毒可以有效阻止绿色荧光蛋白的核转移。将EV71病毒的2A蛋白酶真核表达载体与pGFP-NLS共转染RD细胞,可以发现2A蛋白酶可阻止具有核定位信号的绿色荧光蛋白的核转移而使绿色荧光蛋白表达于细胞浆。为了进一步研究病毒阻止核转移的机制,病毒感染细胞或通过转染2A蛋白酶真核表达载体进行Nup62的Western blotting检测,结果显示病毒以及2A蛋白酶均可引起Nup62表达下降。证明EV71可通过2A蛋白酶切割Nup62从而抑制核转运。
- 张亚洲甘星宋娟孙鹏宋芹芹李公启盛琳君王宝栋卢明枝李灵敏韩俊
- 关键词：肠道病毒71型核转运
