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应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定阳性血培养标本被引量：12: 2016年; 目的评估应用MALDI Sepsityper^(TM)Kit与MicroflexTMLT型基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MSK试剂盒-质谱法)直接鉴定阳性血培养标本中微生物的可行性与临床价值。方法 2014年3—8月,应用MSK试剂盒-质谱法和传统血培养鉴定法对上海交通大学医学院附属新华医院临床阳性血培养标本中微生物进行鉴定。若两者鉴定结果不符,则用基因测序法予以确认。结果 491例阳性血培养标本中,462例为单种菌,29例为复数菌,共包括30个属和64个种。应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定血培养标本中单种菌的种、属水平符合率分别为72.5%(335/462)、76.0%(351/462)。其中革兰阴性菌的种、属水平符合率分别为75.4%(132/175)、77.7%(136/175);革兰阳性菌的种、属水平符合率分别为70.9%(178/251)、74.9%(188/251);念珠菌的种、属水平符合率均为75.0%(27/36)。复数菌血培养标本中鉴定出1种、2种细菌的种水平符合率分别为55.2%(16/29)、20.7%(6/29)。应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定血流感染中临床常见菌的属水平符合率达74.2%~96.9%,鉴定时间仅需40 min/样本。结论应用MSK试剂盒-质谱法能准确和快速地鉴定血流感染常见菌,从而缩短血流感染诊断时间,为临床上快速、合理选用抗生素提供依据。; 李媛睿俞静刘婧娴陈峰皇甫昱婵陶晓勤刘瑛; 关键词：MALDI 血培养

源自皮肤分泌物的金黄色葡萄球菌毒力因子研究被引量：1: 2013年; 目的:对分离自皮肤分泌物标本的金黄色葡萄球菌进行毒力基因检测,初步探讨并分析这些毒力因子的分布与相应的皮肤病种类及患者年龄间的关系。方法:收集新华医院临床微生物实验室2010年12月至2012年4月从皮肤科患者的皮肤分泌物标本分离得到的100株不重复的金黄色葡萄球菌。采用聚合酶链反应(PCR)检测这100株细菌的eta、etb、sea、seb、sec、seh、pvl和tst这8种毒力基因,并对其进行基因测序。结果:sec、seb、seh、sea、eta、tst、pvl、etb基因检出率依次为16%、15%、14%、12%、3%、2%、2%、1%。其中分离自特应性皮炎患者的金黄色葡萄球菌检出毒力基因eta、sea、seb、sec、seh和pvl,分离自银屑病患者的菌株检出毒力基因seb、sec和tst,分离自葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征患者的菌株检出毒力基因eta、etb、sea、seb、sec和pvl,分离自湿疹患者的菌株检出毒力基因sea、seb、sec和seh,而分离自天疱疮及类天疱疮患者的菌株仅检出毒力基因sec。结论:分离自皮肤病分泌物标本的金黄色葡萄球菌中各毒力基因的分布与相应的皮肤病种类及患者年龄间有一定相关性。; 王娟娟皇甫昱婵陶晓勤俞静刘瑛; 关键词：金黄色葡萄球菌毒力因子皮肤病

鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力的研究被引量：3: 2019年; 目的:研究鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力的影响因素,为临床防治鲍曼不动杆菌医院感染和控制其生物被膜形成提供依据。方法:收集2017年10月至12月上海交通大学医学院附属新华医院感染患者分离到的101株鲍曼不动杆菌,利用结晶紫染色法检测其生物被膜在不同温度条件下的形成能力;采用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪联合纸片扩散法对菌株进行药物敏感性(药敏)试验;用PCR技术检测菌株生物被膜形成相关基因(bap、abaI、bfmS、csuAB、csuA、csuC、csuD、csuE、cpaA、ompA)的携带情况。结果:在25℃条件下,101株鲍曼不动杆菌的生物被膜形成阳性率(93.1%)比35℃时(60.4%)高(P<0.05);临床分离株对氨苄西林/舒巴坦和氨基糖苷类药物的耐药率与生物被膜形成能力间存在一定关系(P<0.05),生物被膜形成能力为强阳性(++)的菌株对上述抗菌药物的耐药率显著低于生物被膜形成能力为阳性(+)或阴性(-)的菌株的耐药率,但是耐药率并不是随着生物被膜形成能力的增强而降低的,生物被膜形成能力为阳性(+)的菌株的耐药率反而高于形成能力为阴性(-)的菌株。鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力的强弱与其是否携带以上10种相关基因间并无统计学相关性(P>0.05)。结论:鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与培养温度有关,与培养温度35℃相比,25℃条件时生物被膜形成能力高,亦与氨苄西林/舒巴坦及氨基糖苷类药物的耐药率间存在某种关联,但其与是否携带生物被膜形成相关基因(bap、abaI等)无关。; 皇甫昱婵刁文晶俞静刘瑛沈立松; 关键词：鲍曼不动杆菌生物被膜

比较 Bruker Microflex MALDI-TOF MS和 Vitek 2 Compact 全自动分析系统对酵母菌的鉴定能力被引量：2: 2015年; 目的：比较Bruker Microflex MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对酵母菌的鉴定能力。方法回顾性研究。利用 Bruker Microflex MALDI-TOF MS 和 Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统同时对2013年3月至2014年3月上海交通大学医学院附属新华医院临床标本分离得到的742株酵母菌进行鉴定，结果不符菌株用基因测序予以确证。结果 Bruker Microflex MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对699株念珠菌的种鉴定符合率分别为100％（699／699）和99.6％（696／699），对43株酵母样菌的种鉴定符合率分别为90.7％（39／43）和79.1％（34／43）。这2种仪器均未鉴定出马尔尼菲青霉菌，但本研究利用MALDI-TOF MS技术建立了马尔尼菲青霉菌的蛋白质图谱。结论 Bruker Microflex MALDI-TOF MS对酵母菌的鉴定率高于Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统，且操作快速简便，成本低廉，准确率高，可用于临床微生物实验室常见酵母菌的常规鉴定。（中华检验医学杂志，2015，38：382-386）; 刘瑛俞静陈峰刘婧娴皇甫昱婵沈立松; 关键词：酵母菌念珠菌属

基于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪快速鉴定结果的阳性血培养中常见细菌直接药物敏感性试验的评估被引量：6: 2016年; 目的 :为有效缩短阳性血培养中常见细菌药物敏感性(药敏)试验的报告周转时间,探讨在基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定结果的基础上,对阳性血培养中的常见细菌直接进行药敏试验的可行性。方法:应用MALDI-TOF MS直接鉴定阳性血培养中的细菌,对其中能够准确鉴定的常见细菌直接进行纸片扩散法(Kirby-Bauer法,K-B法)和自动微量稀释测最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)法药敏试验(直接药敏试验)。同时,将血培养阳性细菌按常规操作流程转种至合适的培养基,培养过夜后获得的纯菌落再进行K-B法和MIC法常规药敏试验。将直接药敏试验结果与常规药敏试验结果进行比对。结果:以常规药敏试验结果为标准,革兰阳性球菌的K-B法和MIC法直接药敏试验结果与之符合率分别为98.5%和98.4%,小误差率均为0.9%,大误差率分别为0.6%和0.7%;革兰阴性杆菌的K-B法和MIC法直接药敏试验结果的符合率分别为97.8%和98.1%,小误差率分别为1.4%和1.1%,大误差率分别为0.8%和0.9%。以血培养阳性报警为起始时间,阳性血培养中细菌直接药敏试验的报告周转时间约为24 h,而常规药敏试验的报告周转时间约需48 h。结论:阳性血培养中常见细菌的直接药敏试验结果与常规药敏试验结果高度相符,且直接药敏试验的报告周转时间可提前至24 h。因此,结合MALDI-TOF MS快速鉴定的结果,对阳性血培养中的常见细菌直接进行药敏试验可在临床微生物室中推广应用,为临床及时、合理和有效的抗生素治疗提供可靠依据。; 李媛睿陈峰皇甫昱婵俞静刘瑛; 关键词：血培养细菌最小抑菌浓度

源自皮肤分泌物的金黄色葡萄球菌毒力因子研究: 目的：对分离自皮肤科患者分泌物标本的金黄色葡萄球菌进行毒力基因检测,初步探讨并分析皮肤病种类与毒力基因之间的关系.方法：收集新华医院临床微生物实验室2010年12月至2012年4月从皮肤科病人分泌物标本分离的100株不重...; 王娟娟皇甫昱婵俞静刘瑛

分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS直接检测血培养阳性细菌被引量：30: 2015年; 目的建立用分离胶促凝管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）直接检测血培养阳性待测菌的方法并评估其鉴定符合率。方法共收集阳性血培养491例,利用分离胶促凝管直接从血培养瓶中富集并提纯菌体,采用MALDI-TOF MS对待测菌进行菌种鉴定,同时对报阳性血培养瓶进行转种培养,纯菌落用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统（简称Vitek 2 Compact）进行鉴定。若两者鉴定结果不一致,则以基因测序结果予以确证。结果 491例阳性血培养瓶鉴定出的待测菌包括30个属和64个种。在462例单菌株感染血培养瓶中,菌株的种、属鉴定符合率分别为73.6%和3.7%。其中175例革兰阴性菌的种、属鉴定率分别为84.0%（147例）和2.9%（5例）;251例革兰阳性菌的种、属鉴定率分别为75.3%（189例）和4.4%（11例）;36例念珠菌的种、属鉴定率分别为19.4%（7例）和2.8%（1例）。在29例复数菌感染血瓶中,鉴定出其中一种细菌的种、属鉴定率分别为79.3%（23例）和10.3%（3例）。血流感染中常见病原菌的菌种鉴定符合率达83.3%～96.9%。结论本研究建立了分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS直接检测血培养阳性待测菌的方法,与传统的培养鉴定方法相比,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且方法快速、简便,成本低廉,适合在临床微生物实验室中推广应用。; 陈峰李媛睿皇甫昱婵陶晓勤刘瑛; 关键词：血培养

Microflex^(TM) MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对肠杆菌科细菌鉴定能力的比较被引量：13: 2015年; 目的比较MicroflexTM基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统(简称Vitek 2 Compact)对肠杆菌科细菌的鉴定能力。方法采用MicroflexTMMALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact同时对545株肠杆菌科质控菌株和临床分离菌株进行鉴定,鉴定结果不一致者采用沙门菌血清凝集试验或细菌16S r DNA基因测序予以确证。结果 MicroflexTMMALDI-TOF MS对545株细菌的种和属的鉴定率分别为97.1%、2.9%。Vitek 2 Compact对545株细菌的种、群、属的鉴定率分别为83.3%、13.9%和2.2%,鉴定错误率为0.2%,未鉴定率为0.4%。结论 MicroflexTMMALDI-TOF MS对肠杆菌科细菌的鉴定符合率高于Vitek 2 Compact,且操作快速、简便,成本低,可用于临床肠杆菌科细菌的常规快速鉴定。; 刘瑛俞静陈峰刘婧娴李媛睿皇甫昱婵沈立松; 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱肠杆菌科细菌

线性和非线性定量在同位素稀释质谱法中应用的比较: 2022年; 目的比较同位素稀释质谱法时,采用线性和非线性响应函数制作校准和(或)标准曲线对结果的影响。方法实验室建立的同位素稀释质谱法检测伊立替康及其3种主要代谢产物,使用C18反相柱梯度洗脱,以ABSciex API 3200检测。按《液相色谱-质谱临床应用建议》完成方法学验证。结果伊立替康(CPT-11)、SN-38G和APC在4.6~4.7 min出现洗脱峰,SN-38约在5.2 min出现洗脱峰。检测4种分析物的3种浓度质量控制(QC)样本,分别以线性函数、二次函数、三次函数和新的线性最小二乘法Padé[1,1]近似拟合分析,比较4种拟合方法计算得出的结果偏差。结论结果适合线性标准曲线时,优先应用线性;非线性校准曲线时,三参数有理函数一定程度上可以消除同位素稀释分析中不必要的误差源。; 马妍慧皇甫昱婵周韵斓沈立松; 关键词：同位素稀释质谱法校准曲线线性函数非线性函数

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皇甫昱婵

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