程小款
- 作品数:14 被引量:16H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国医学科学院基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
- 1999年
- 淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGGTTTGA-143NIRS)。本组曾通过紫外交联实验发现Jurkat细胞有一种蛋白质与NIRS和NRE特异结合。本文利用肝素-亲和柱层析及序列特异DNA亲和层析认1010Jurkat细胞中获得了分子量约为75kD的NRE特异结合蛋白。EMSA实验表明,纯化后的蛋白与NRE所形成的结合物能被NIRS及HIVLTR的负调控元件所竞争,提示该NRE结合蛋白不仅可能参与IL-2Ra基因的转录调控,而且可能在HIV基因表达过程中起某种作用。
- 张玉健邢光新莽锐程小款衡凤燕吴宁华沈琲
- 关键词:结合蛋白DNA
- 用于人体细胞高效表达外源基因的人源性启动子
- 本发明涉及一种用于人体细胞高效表达外源基因的人源启动子。具体地,本发明的启动子来自人类热休克蛋白基因hsp90β。
- 沈珝琲刘巨洪王晓哲程小款
- 文献传递
- 蛋白质乙酰化参与分子伴侣hsp90β基因的反式调控
- 热休克蛋白HSP90在细胞中具有高水平的组成性表达.HSP90作为一种特异的分子伴侣,与细胞内多种重要的生理过程相关,如信号转导,细胞周期调控和激素应答等.在人类细胞中;HSP90家族有两个拷贝即HSP90α和HSP90...
- 沈珝琲刘秉胜张业陈丽玲李宏帆程小款吴宁华
- 文献传递
- 用于人体细胞高效表达外源基因的人源性启动子
- 本发明涉及一种用于人体细胞高效表达外源基因的人源启动子。具体地,本发明的启动子来自人类热休克蛋白基因hsp90β。
- 沈珝琲刘巨洪王晓哲程小款
- 文献传递
- 竞争RT-PCR定量检测氯霉素乙酰基转移酶mRNA水平方法的建立及初步应用
- 将特定基因转录调控序列克隆到氯霉素乙酰基转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因的上游并转染哺乳动物细胞是研究基因调控的主要策略之一.目前,检测CAT报告基因的方法主要...
- 莫志成李晓燕李宏帆程小款吴宁华沈珝琲
- 文献传递
- 白细胞介素2受体α亚基参与Jurkat细胞凋亡的调节被引量:4
- 2001年
- T淋巴细胞表面的高亲和力白细胞介素 2受体 (IL 2R)由α ,β及γ三种亚基组成 ,其中只有IL 2Rα亚基具有特异结合IL 2的活性 ,目前对IL 2Rα亚基的确切的功能尚不清楚。我们将IL 2RαcDNA反意表达质粒转染Jurkat细胞后 ,经Western印迹 ECL分析发现 ,细胞内出现了细胞凋亡早期特异的多聚二磷酸腺核糖聚合酶 [Poly(ADP ribose)polymerase ,PARP]的 89kD断裂片段 ,此结果提示 ,IL
- 胡晶晶李宏帆程小款衡凤燕吴宁华沈珝琲
- 关键词:细胞凋亡T淋巴细胞
- 恶性疟原虫红内期cDNA库的组建及克隆的筛选被引量:4
- 1989年
- 从体外培养的恶性疟原虫中分离纯化总mRNA,将其逆转录为cDNA,组入表达型载体λgt11,建立了恶性疟原虫中国海南岛分离株FCC1/HN红内期cDNA库。经大肠杆菌表达后用抑制性单克隆抗体M26-32、F6-C2、F6-D3筛选。杭有27个克隆与M26-32作用、34个克隆与M26-32和F6-C2都反应。对筛选结果进行了分析。这些阳性克隆的表达产物有可能作为疟疾疫苗的组成部分。
- 程勤沈珝琲强伯勤余曙华吴宁华陈菊凤樊汝恭程小款李文渌毛映红刘尔翔
- 关键词:疟原虫单克隆抗体
- 染色质免疫沉淀技术及其在基因表达调控研究中的初步应用被引量:1
- 2004年
- 目的验证抑癌基因表达产物p53蛋白在体内是否结合于p21WAF1/CIP1基因的启动子区,并检测p53蛋白对热休克蛋白hsp90β基因启动子区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀(ChIP)及PCR技术检测特异基因调节序列,Western印迹分析p53蛋白。结果在p53抗体免疫沉淀的DNA片段中含有p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区p53蛋白结合序列,免疫沉淀样品中含有p53蛋白。结论p53蛋白在体内结合于p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区,参与两基因的表达调控。
- 张勇程小款吴宁华沈珝琲
- 关键词:染色质免疫沉淀P53P21^WAF1/CIP1
- 应用白细胞介素2受体酶联免疫吸附试验定量检测白细胞介素2生物活性被引量:3
- 1999年
- 程小款杜洪震高军萍
- 关键词:白细胞介素2生物活性IL-2RELISA
- 新的人类和哺乳动物细胞高效表达载体
- 本发明涉及一种新的人类和哺乳动物细胞表达载体,称为pBMP6.1,其具有人源性的启动子及多聚腺苷酸信号。本发明还涉及所述表达载体在基因治疗中的应用。
- 沈珝琲程小款王晓蓉王晓哲刘巨洪
- 文献传递