程海
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中国综合性艾滋病研究项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- Real-time PCR检测核酸疫苗中宿主基因组残留DNA被引量：8
- 2007年
- 目的建立Real-time PCR方法,用于定量检测核酸疫苗中宿主基因组的残留DNA。方法以Lightcycler平台为基础,选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶标基因设计扩增引物,建立基于SYBR GreenⅠ荧光染料的Real-time PCR检测方法,并用于核酸疫苗纯化过程中间产物的检测。结果整个检测过程可在30min内完成,特异性强,检测灵敏度可达10fg/μl,其标准曲线的相关系数为-0.99。结论该方法可用于核酸疫苗中宿主基因组残留DNA的检测。
- 李亮助刘勇王贻杰程海孙茂盛邵一鸣
- 关键词：REAL-TIMEPCR核酸疫苗
- 提高内毒素去除效果的质粒DNA层析纯化工艺的优化被引量：4
- 2009年
- 目的优化质粒DNA分子筛或离子交换层析工艺,提高内毒素去除效果。方法在经精胺沉淀初步纯化的质粒DNA溶液中,加入不同浓度的EDTA(5、10和20mmol/L)或SDS(0.1%、0.2%和0.5%),分别进行Sephacryl S-1000分子筛层析及Source30Q离子交换层析,收集质粒峰,测定内毒素含量。结果用含0.5%SDS的质粒溶液进行分子筛层析,用含10～20mmol/L EDTA或0.1%～0.5%SDS的质粒溶液进行离子交换层析,质粒DNA的内毒素含量均<5EU/mg。结论添加一定浓度的EDTA或SDS可提高质粒DNA分子筛层析或离子交换层析去除内毒素的效果。综合考虑安全性因素,推荐用含10mmol/L EDTA的质粒溶液进行Source30Q离子交换层析。
- 王贻杰刘勇程海范文玲韩建霍烛郝彦玲邵一鸣
- 关键词：质粒DNA内毒素层析EDTASDS
- HIV-1 DNA疫苗中试生产工艺研究及PTD-P24重组蛋白的构建、表达和纯化
- DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程蛋白亚单位疫苗之后的新一代疫苗,质粒DNA大规模制备技术对DNA疫苗的产业化具有重要意义。论文第一部分从我国重大科研课题的需求以及生物制药行业发展的前景出发确立了HIV-1 DNA疫苗中试...
- 程海
- 关键词：DNA疫苗
- 文献传递
- 临床用DNA疫苗生产工艺研究进展被引量：6
- 2006年
- DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程蛋白亚单位疫苗之后的新一代疫苗,具有很好的市场潜力。DNA疫苗生产工艺的质粒DNA大规模制备技术对DNA疫苗的产业化具有重要意义。本文介绍了DNA疫苗生产工艺的研究进展包括提高质粒DNA产量的策略、发酵后处理工艺、有效去除杂质和分离超螺旋构象质粒DNA的纯化工艺以及DNA疫苗生产相关的质量控制体系等。
- 程海唐欣昀刘勇
- 关键词：DNA疫苗生产工艺
