程玉琴
- 作品数：32 被引量：87H指数：6
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学医药卫生更多>>
- 用酵母双杂交筛选与南瓜蚜传黄化病毒MP互作的寄主因子被引量：4
- 2010年
- 植物病毒编码的移动蛋白(movement protein,MP)介导病毒在寄主体内的移动,研究其与寄主间的分子互作有助于揭示病毒侵染过程中的分子机制。将南瓜蚜传黄化病毒Cucurbit aphid-borne yellows virus(CABYV)MP基因定向克隆到含有DNA结合功能域(DNA-binding domain,BD)载体上,并构建与激活功能域(activation domain,AD)融合表达的西瓜茎叶cDNA文库,然后用MP为诱饵筛选文库寻找与其互作的寄主因子。结果表明,诱饵质粒插入的MP基因可读框和氨基酸序列均正确,对酵母菌株AH109和Y187没有自主激活能力;文库滴度为2.94×106CFU/mL,且大多数插入片段在700bp以上,质量符合筛选要求;经过筛选和共转化回转验证,有48个候选阳性克隆与MP在酵母中互作。测序得到这些克隆的cDNA序列,BLAST分析结果表明,这些克隆共编码12种蛋白。
- 陈小慧费菲向海英韩成贵程玉琴
- 关键词：CDNA文库酵母双杂交筛选西瓜
- 接种和检测苹果潜隐病毒被引量：1
- 2003年
- 通过试管微嫁接,分别将苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒接种到小金海棠组培苗上,并用PAS-ELISA法检测其带毒率。结果表明:接穗小金海棠苹果褪绿叶斑病毒的带毒率为60.0％,其苹果茎沟病毒带毒率为73.3％,从而证明用此方法可以对组培苗进行快速病毒接种而得到带毒的实验材料。
- 程玉琴韩振海许雪峰
- 关键词：接种苹果潜隐病毒褪绿叶斑病毒茎沟病毒带毒率
- ^(60)Co-γ射线辐照对菜用枸杞VM_2生长势及品质的影响被引量：2
- 2007年
- 用10～14Gy^(60)Co-γ射线辐照菜用枸杞农枸1号枝条,研究低剂量辐照对无性繁殖二代(VM2)生长与品质的影响。结果表明:10、11Gy辐照促进菜用枸杞VM2的生长,其中经10Gy辐照的促进效果最好,其株高、叶长和叶宽显著高于对照V2,13、14Gy辐照对VM2生长有一定抑制作用;辐照对菜用枸杞VM2嫩茎叶的VC、可溶性糖和氨基酸含量均有较大影响,其中10、11Gy辐照显著增加了VC、可溶性糖和氨基酸含量;经模糊数学隶属函数法综合分析评价,10Gy辐照处理的VM综合品质最优。
- 徐践程玉琴马萱岳瑾冯丽
- 关键词：辐照菜用枸杞生长势
- 葡萄卷叶伴随病毒2号和3号辽宁分离物部分基因组的序列分析被引量：8
- 2009年
- 将采自辽宁兴城地区在生长期间具典型卷叶病症状的金星无核（Venus Seedless）葡萄品种休眠枝条,用RT-PCR检测4种葡萄卷叶伴随病毒（Grapevine leafroll-associated viruses,GLRaVs）,扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒2号（GLRaV-2）和葡萄卷叶伴随病毒3号（GLRaV-3）两种病毒的主要外壳蛋白（major coat protein,CP）基因的完整序列（GenBank登录号分别为FJ786017和FJ786016）。这表明该葡萄植株受到了GLRaV-2和GLRaV-3辽宁分离物（GLRaV-2-LN和GLRaV-3-LN）的复合侵染。根据检测结果,克隆了GLRaV-2-LN基因组3′端CPm（minor capsid protein）、p19（19-kDa protein）和p24（24-kDa protein）基因（GenBank登录号分别为FJ786018、FJ786019和FJ786018）。序列分析表明,GLRaV-3-LN的CP基因全长942 nt,与已报道的国内外其它分离物CP基因全序列相比,核苷酸序列同源性为89.8%~91.8%,由此推导的氨基酸序列同源性为94.9%~97.4%。GLRaV-2-LN的CP、CPm、p19和p24基因全长分别为597 nt、672 nt、486 nt和618 nt。与国外报道的几个分离物的相应蛋白基因全序列相比,核苷酸序列同源性分别为88.3%~100.0%、78.7%~99.9%、75.1%~99.4%和87.5%~99.5%;由此推导的氨基酸序列同源性分别为92.9%~100.0%、89.2%~100.0%、73.9%~99.4%和89.3%~99.0%。
- 王萌费菲周涛程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR克隆
- 小金海棠高效脱毒检测体系的探讨被引量：8
- 2003年
- 以小金海棠组培苗为试材,对其进行苹果潜隐病毒接种、脱毒及检测方法的研究,探讨了一种针对小金海棠的快速高效的脱毒检测体系。结果表明,恒温38℃处理20 d或变温38/22℃处理30 d并结合茎尖培养,对脱除小金海棠苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的效果较好。离体条件下,指示植物‘苏俄苹果’和‘弗琴尼苹果’不适合检测该两种病毒,而用PAS-ELISA法检测结果较灵敏。
- 程玉琴韩振海许雪峰徐践
- 关键词：小金海棠接种苹果砧木
- 葡萄类受体蛋白激酶HERK1的新用途
- 本发明涉及一种葡萄类受体蛋白激酶的新用途。本发明所述的葡萄类受体蛋白激酶HERK1(VvHERK1)、编码该VvHERK1的编码基因、含有前述编码基因的重组表达载体可以抑制葡萄卷叶伴随病毒2号(GLRaV‑2)基因组的复...
- 程玉琴王金英谢印帅刘灿
- 葡萄卷叶伴随病毒1号河北和辽宁分离物CP基因序列分析被引量：4
- 2012年
- 为获得葡萄卷叶伴随病毒1号(Grapevine leafroll-associated virus 1,GLRaV-1)中国分离物的分子信息,提高其检测可靠性,本研究从河北怀来和辽宁兴城地区带有明显卷叶症状的葡萄样品中提取的叶柄韧皮部总RNA,采用RT-PCR克隆了GLRaV-1的河北(GLRaV-1-HB)和辽宁分离物(GLRaV-1-LN)的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因,并进行了序列分析。结果表明:GLRaV-1-HB和GLRaV-1-LN的CP基因核苷酸同源性为90.7%,由此推导的氨基酸同源性为93.8%;与已报道的国外3个GLRaV-1分离物的CP基因全序列相比,其核苷酸与氨基酸序列同源性分别为90.0%～96.0%和92.9%～97.5%。以CP基因序列构建的进化树表明,现有的5个分离物可分为3组,其中本研究得到的GLRaV-1-HB和GLRaV-1-LN,分别与巴西分离物(GLRaV-1-PS,GenBank登录号为GQ332536.1)和伊朗分离物(GLRaV-1-IR-S7,FJ952151.2)为一组;澳大利亚分离物(GLRaV-1-AUS,AF195822.1)单独为一组。
- 刘命华王克双齐洪华吕睦頔李捷程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶病RT-PCR进化树
- 中国北京、河北地区葡萄卷叶伴随病毒种类调查及其分子变异研究
- 由葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associa ted virus,GLRaV)引起的葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease,GLD)是葡萄上发生最为普遍、为害最为严重...
- 刘命华王克双费菲程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR分子变异
- 2种不同树龄磨盘柿树光合作用日变化的初步研究被引量：10
- 2010年
- 对2种不同树龄、不同挂果量的磨盘树进行了光合作用日变化的初步比较研究,旨在为磨盘柿无公害标准化栽培管理提供相关科学依据。结果表明不同树龄的磨盘柿,其净光合速率日变化曲线均为双峰型,一天中最高值出现在10:00前后,次高峰出现在16:00左右;而光合午休持续的时间不同,15年生柿树光合速率在13:00左右到达谷值后上升,而8年生柿树的光合午休提前和延长了1h,即从12:00持续到14:00。不同树龄的磨盘柿树蒸腾速率日变化曲线基本上为单峰型,峰值均出现在14:00左右;同时通过方差分析显示,在大多数测定时刻中,15年生柿树的净光合速率明显高于8年生柿树。结果还表明,地面覆盖生草有利于减轻磨盘柿树光合午休发生程度。
- 王仲张文程玉琴徐践
- 关键词：磨盘柿树龄
- 白草花叶病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：15
- 2005年
- 将白草花叶病毒(Penn isetum mosaic virus,PenMV)的外壳蛋白(CP)基因连接到表达载体pET22b(+)上,获得重组子pET-PCP。SDS-PAGE和W estern b lotting分析表明,经IPTG诱导后,含pET-PCP的大肠杆菌BL21(DE3)pLys产生分子量为36 kDa的融合蛋白。以N i2+亲和层析柱纯化该蛋白,并以其为抗原免疫德国大白兔制备了特异性较强的抗血清。微量免疫沉淀法测其效价为1∶1 024,酶联法(enzym e-linked immunosorbant assay,ELISA)测定的效价为1∶8 192。该血清可替代常规病毒粒子所制备的抗血清,用于检测PenMV。
- 邓丛良韩丽娟燕照玲程玉琴周涛李怀方
- 关键词：外壳蛋白原核表达抗血清ELISA
