肖銮娟 作品数:38 被引量:87 H指数:6 供职机构: 暨南大学生命科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 化学工程 更多>>
CTRP3蛋白的应用 本发明公开一种CTRP3蛋白的应用,属于生物技术及医药领域。本发明提供了CTRP3蛋白可以增强发育中卵泡对卵泡刺激素的敏感度。并通过鉴定CTRP3蛋白在人和小鼠卵巢中的表达表明其为卵巢自体就拥有的一种蛋白,可作为一种药物... 禹艳红 卢小圣 毛周飞 杨柳红 齐绪峰 蔡冬青 冯珊珊 肖銮娟文献传递 猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达 被引量:3 2004年 目的 :构建猪卵透明带ZP3α真核表达载体 ,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法 :采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段 ,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达 ,然后采用RT -PCR和间接免疫荧光技术 (IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果 :真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功 ,用RT -PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa细胞中的转录与表达。结论 :真核表达载体pVAX1-pZP3α的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。 孙彩军 潘善培 谢琪璇 肖銮娟 唐键关键词:猪卵透明带 DNA疫苗 免疫避孕 一种水循环自净繁殖和养殖蛙的装置 本实用新型公开了一种水循环自净繁殖和养殖蛙的装置。该装置包括蛙养殖缸、蛙-蝌蚪两用养殖缸和过滤缸;蛙养殖缸和蛙-蝌蚪两用养殖缸分别与过滤缸连接。本实用新型提供的装置,可在同一水体上,在不同的缸,同时和分别繁殖和养殖蝌蚪、... 蔡冬青 杨吉锋 齐绪峰 李瑞怀 陈夷林 李慧敏 沈晓涛 郑馨 李艳梅 肖銮娟文献传递 重组人卵透明带蛋白及其多克隆抗体对精子-透明带结合的影响 被引量:1 2006年 为了探讨毕赤酵母表达的重组人卵透明带ZP3蛋白(recombinant human zona pellucida-3 protein,rhZP3)及其多克隆抗体对小鼠和人精卵结合的影响,采用不同浓度的rhZP3以及空白培养液分别处理小鼠精子,然后再与小鼠卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附及体外受精率的影响;用rhZP3以及空白培养液分别处理人精子,然后再与人卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附的影响;用抗rhZP3抗体与阴性血清分别处理小鼠和人卵子,再与精子进行结合实验,观察多克隆抗体对精子粘附以及小鼠体外受精率的影响。实验结果表明,rhZP3和抗rhZP3多克隆抗体既能抑制人的体外精卵结合,也能抑制小鼠体外精卵结合,提示rhZP3具有天然透明带的特性,有发展成避孕疫苗和作为检测透明带抗体检测试剂的可能。 谢琪璇 马丽 潘善培 张韫 张春雪 肖銮娟 史卫卫 李文星关键词:卵透明带 多克隆抗体 避孕疫苗 大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化及生物特性的初步鉴定 目的:比较两种大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外分离纯化方法,并初步鉴定MSCs的生物特性,为进一步研究其分化调控机制和应用打下基础。方法:本研究分别利用人淋巴细胞分离液... 肖銮娟关键词:骨髓间充质干细胞 CD抗原 细胞周期 染色体核型 文献传递 人精子顶体反应3种检测方法的比较与评价 被引量:11 2005年 目的:寻找简便和准确的精子顶体反应检测方法。方法:正常人精液标本液化后混合,分成6组,分别用金霉素染色法、考马斯亮蓝染色法和酸性磷酸酶检测法对孕酮诱导顶体反应前后的人精子进行形态学观察并且对顶体反应率进行数据统计。结果:经考马斯亮蓝和金霉素染色后,发生顶体反应的精子和没有发生顶体反应的精子均有明显的形态差异;经考马斯亮蓝染色、金霉素荧光染色和酸性磷酸酶测试法检验,孕酮诱导组与阴性对照组的精子顶体反应率均有明显差异(P<0.05)。结论:3种方法均可作为顶体反应的检测手段,但考马斯亮蓝染色更为简便和稳定。 张韫 谢琪璇 潘善培 张春雪 肖銮娟 彭雅林关键词:精子 顶体反应 酸性磷酸酶 CTRP3蛋白的应用 本发明公开一种CTRP3蛋白的应用,属于生物技术及医药领域。本发明提供了CTRP3蛋白可以增强发育中卵泡对卵泡刺激素的敏感度。并通过鉴定CTRP3蛋白在人和小鼠卵巢中的表达表明其为卵巢自体就拥有的一种蛋白,可作为一种药物... 禹艳红 卢小圣 毛周飞 杨柳红 齐绪峰 蔡冬青 冯珊珊 肖銮娟人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建 被引量:3 2002年 目的 用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法 根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列 ,设计出 2对引物。利用PCR的方法 ,以病毒培养液上清为模板 ,进行二轮PCR扩增 ,把两个目的基因串联在一起 ,将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接 ,然后导入大肠杆菌DH5α ,筛选出阳性转化子 ,并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果 从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因 ,PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。 郑育声 谢琪璇 潘善培 芦春斌 肖銮娟关键词:基因表达 人巨细胞病毒 重组PCR 人卵透明带蛋白3差异表达菌的鉴定及比较 2009年 目的:研究重组人卵透明带ZP3蛋白的差异表达情况。方法:构建8个重组rhZP3的差异表达质粒在毕赤酵母中进行诱导表达,研究跨膜区保留与否、潜在酶切位点突变与否及多聚组氨酸纯化标签设计的位置是否影响rhZP3的表达情况。结果:保留跨膜区会影响重组蛋白泌出胞外而使表达量降低,潜在酶切位点存在会导致重组蛋白被不完全降解,而多聚组氨酸纯化标签设计位置对表达也有一定影响。结论:从表达量和产物完整性综合考虑,以突变型成熟肽为佳,含跨膜区的蛋白则应选用pPICZaA质粒,以便富集得到完整的表达蛋白。 周文燊 熊波 李文星 谢琪璇 肖銮娟 张春雪 潘善培关键词:跨膜区 重组猪卵透明带-3α抗原及其抗体的制备 2006年 目的:制备重组猪卵透明带-3α(rpZP3α)抗原及其抗体供发展避孕疫苗研究。方法:在2L发酵罐中接种毕赤酵母GS115-pZP3α工程菌,高密度发酵表达rpZP3α蛋白,表达的蛋白经螯合镍离子的亲和柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,以Quantity One软件对rpZP3α进行定量分析。rpZP3α免疫家兔,间接免疫荧光法检测抗血清对rpZP3α和猪卵透明带的抗体反应。IVF试验体外检测抗rpZP3α抗体对猪、小鼠精卵结合的影响作用。结果:工程菌高密度发酵产物经分离纯化后获得能与抗pZP3抗体反应的46kD成分,平均产量为8mg/L,用其免疫家兔获得抗rpZP3α抗血清,间接免疫荧光法分析显示此抗血清能与猪卵透明带反应,产生亮绿荧光。体外精卵结合试验中,随着兔抗rpZP3α抗血清浓度的加大,其对猪、鼠精卵结合的抑制作用也增强。ELISA结果显示抗rpZP3α抗体与rpZP3α蛋白以及天然pZP3蛋白两种抗原反应的强度和趋势基本一致。结论:通过酵母体系制备的rpZP3α及其抗体具有免疫学活性。 高彦茹 潘善培 谢琪璇 肖銮娟 柯琼关键词:毕赤酵母 抗体