苏畅
- 作品数：3 被引量：28H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用短串联重复序列诊断唐氏综合征被引量：15
- 2004年
- 目的 建立一种准确、快速、简便的唐氏综合征 (Down's syndrome,DS)基因诊断技术。方法选择 10个位于 2 1号染色体上唐氏综合征关键区域内 (2 1q2 2 .1～ 2 1q2 2 .2 )或附近的短串联重复序列 (shrottandem repeats,STR)位点 ,应用 PCR与聚丙烯酰胺凝胶电泳或荧光 PCR(ABI 310 )进行 STR分型 ,根据STR位点出现 3条带图谱诊断 DS,荧光半定量的 2∶ 1带型可辅助诊断 ,并用细胞遗传学染色体核型分析进行证实。结果 在 2 0例可疑患者外周血中有 5例 DS阳性结果 ,其中 1～ 6个 STR位点呈 3条带图谱 ,其余为强度 2∶ 1的两条带型。 2 6例 DS的高危孕妇羊水细胞均未检出 3条带图谱和 2∶ 1图谱。基因诊断结果与细胞染色体核型分析一致。结论 联合进行 2 1号染色体上 10个 STR位点的基因分型 ,可准确、快速、简便地作出 DS的基因诊断 ,促进 DS产前诊断的开展 ,降低发病率。
- 陈振斌雷箴阎梅朱金玲肖白梁燕丁洁苏畅刘敬忠
- 关键词：唐氏综合征基因诊断短串联重复序列引物设计
- 人工合成苯丙氨酸脱氨酶基因在乳酸乳球菌中的食品级表达被引量：5
- 2006年
- 目的将人工合成具有乳酸菌偏好密码子的苯丙氨酸脱氨酶基因(PALart),在乳酸乳球菌中克隆并进行食品级表达,以期进一步用于治疗苯丙酮尿症的研究。方法以欧芹苯丙氨酸脱氨酶氨基酸序列为准,人工合成以乳酸菌偏爱密码子编码相同氨基酸序列的基因PALart,将该基因克隆到食品级乳酸乳球菌高效表达系统pNZ8149/NZ3900中而获得基因工程菌,用HPLC法测定诱导表达出的苯丙氨酸脱氨酶活性。结果获得了能表达苯丙氨酸脱氨酶活性的阳性克隆pNZ8149-PALart/NZ3900。该酶的表达量与诱导物乳链菌肽的浓度有关。反应液pH值能明显影响工程菌转化苯丙氨酸为肉桂酸的转化率;以10mmol/L的苯丙氨酸作为底物,在pH8.0的磷酸盐缓冲液中,于37℃反应18h,其转化率可达64%。结论获得具有活性PALart食品级表达的乳酸乳球菌株,为进一步将其制成口服制剂用于治疗经典型苯丙酮尿症模型动物的实验研究打下基础。
- 贾兴元陈星苏畅吕月平高斌肖白刘敬忠
- 关键词：苯丙氨酸乳酸乳球菌基因表达
- 使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的表达被引量：8
- 2006年
- 为获得苯丙氨酸脱氨酶(PAL)在食品级乳酸乳球菌中的高效表达,将欧芹palcDNA(palnat)及根据乳酸乳球菌偏爱密码子设计人工合成的pal基因(palart)重组并转化到两种乳酸乳球菌NICE诱导表达系统中,测定基因工程菌表达PAL酶的量及活性,对比分析密码子偏爱性对乳酸乳球菌表达外源蛋白的影响。结果表明在两种乳酸乳球菌NICE表达系统中,使用偏爱密码子均可显著提高PAL酶的表达效率,使NZ9000/pNZ8048表达系统表达量提高22.23倍,NZ3900/pNZ8149系统提高35.90倍。此研究获得了安全高效表达PAL,可用于治疗苯丙酮尿症的基因工程菌。
- 陈星高斌贾兴元苏畅吕月平王战勇范新萍肖白刘敬忠
- 关键词：乳酸乳球菌密码子
