董晓寅
- 作品数:4 被引量:6H指数:1
- 供职机构:河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 硫氰酸生成酶样基因在家蝇高温和重金属镉应激中的作用被引量:1
- 2012年
- 硫氰酸生成酶同源结构域普遍存在于古细菌、真细菌以及真核生物的多种蛋白分子内,这些蛋白构成一个功能多样的硫氰酸生成酶超家族。本研究根据家蝇转录组序列信息,分拣到一条硫氰酸生成酶样基因的EST序列,经分析发现其编码蛋白C末端含有典型的硫氰酸生成酶同源结构域,属于硫氰酸生成酶超家族,将其命名为家蝇硫氰酸生成酶样基因(Md-Rhodlike)。应用实时定量RT-PCR技术,分析了Md-Rhodlike在热激、镉胁迫条件下的表达量变化。Md-Rhodlike的mRNA水平在高温和镉处理后上调,提示该基因可能参与家蝇对高温及镉金属等环境胁迫因子的耐受,是一种新的家蝇应激相关蛋白。
- 柳峰松李娟唐婷张迪董晓寅
- 关键词:家蝇热激重金属镉应激反应
- 家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI的克隆、表达及活性检测
- 2010年
- 半胱氨酸蛋白酶抑制剂是具有抑制半胱氨酸蛋白酶活性的一类蛋白超家族。本研究根据EST序列信息,通过RACE技术克隆得到1条家蝇Musca domestica半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI,该基因含有1个357bp开放阅读框,编码118个氨基酸残基,推导的多肽N端17个氨基酸残基为信号肽序列。同源分析表明,MdCPI氨基酸序列与红尾肉蝇Sarcophaga crassipalpis的CPI相似性最高(identity=51%)。以邻接法(NJ)构建的系统树表明,家蝇与其他双翅目昆虫CPI起源于共同的祖先,属于I25A型蛋白家族。为了解家蝇CPI对半胱氨酸蛋白酶的抑制活性,构建pET-17b-MdCPI表达载体,并转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)进行重组表达。研究发现1μg重组家蝇CPI能够抑制约14μg木瓜蛋白酶的水解活性。结果表明MdCPI确属CPI家族,可能同其他家族成员具有相似的功能,参与免疫及生理调控。这些结果为研究MdCPI在家蝇体内作用机制奠定了基础。
- 柳峰松董晓寅张瑞英唐婷
- 关键词:家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂克隆抑制活性
- 家蝇金属硫蛋白基因的克隆、原核表达及活性检测被引量:4
- 2010年
- 金属硫蛋白是一类普遍存在于生物体内、富含半胱氨酸的小分子蛋白,能螯合多种金属离子。本研究根据EST序列信息,利用RACE技术克隆到1条家蝇Musca domestica金属硫蛋白基因MdMtn(GenBank登录号为GU289398)。序列分析表明,MdMtncDNA全长408bp,包含1个123bp的开放阅读框,编码40个氨基酸残基,其中半胱氨酸残基10个,呈-C-X-C-方式排列。此蛋白理论分子量为3.8kD,等电点为8.78。为了解家蝇金属硫蛋白对重金属的结合活性,构建了pET-DsbA-MT表达载体,并转化Escherichia coliBL21(DE3)宿主菌进行融合表达。研究发现MT重组菌对重金属镉的耐受性得到了明显加强,提示MdMtn基因可能在家蝇适应重金属环境中起到积极作用。
- 张迪任国栋唐婷董晓寅柳峰松
- 关键词:家蝇金属硫蛋白基因克隆原核表达蛋白活性
- 家蝇3种半胱氨酸蛋白酶抑制剂的鉴定与功能分析
- 半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)是一类广泛存在于各种生物体内的蛋白酶抑制因子,参与多种生物学及病理学进程。家蝇Musca domestica 常常生活在在病原菌滋生的恶劣环境中,具有很强的适应能力,了解其独特的免...
- 董晓寅
- 关键词:家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂发育先天免疫