蒋文智
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 供职机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 端粒酶活性检测对良恶性胸腹水的鉴别诊断价值被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨胸腹水端粒酶活性检测对良、恶性胸腹水鉴别诊断的价值。方法 采用TRAP PCR银染法和TRAP PCR ELISA半定量法对 32例胸腹水端粒酶活性进行检测。结果 恶性胸腹水中端粒酶阳性检出率 40 .0 % ,良性胸腹水端粒酶阳性率 5 .9% ,恶性胸腹水端粒酶活性 (平均OD值 :0 .46 8)明显高于良性胸腹水 (平均OD值 :0 .0 86 )。结论 胸腹水中端粒酶活性测定可作为鉴别诊断恶性胸腹水的辅助手段。
- 蒋文智叶锋陈杰张行
- 关键词：端粒酶胸腹水
- 蛋白质指纹图谱在大肠癌的临床应用研究
- 郑树张苏展陈益定余捷凯蒋文智徐文鸿董琦
- 引进国外技术再创新，应用蛋白质质谱分析仪（SELDI-TOF）建立大肠癌血清蛋白质质谱模型，检测早期大肠癌敏感性和特异性均可达80%以上。并进行实验技术标准化研究，研制新的分析软件ZUCI-PDAS，使CV值自25%下降...
- 关键词：
- 关键词：大肠癌蛋白质指纹图谱
- 人A1u重复序列作为脐血造血干细胞异种移植成功指标的实验研究被引量：4
- 2002年
- 目的 探讨将 Alu重复序列作为人脐血造血干细胞异种移植成功植入指标的可行性。方法 经体外扩增后的人脐血细胞移植给 X线照射预处理的 BAL B/ C裸鼠 ,8周后取骨髓及脾脏 DNA,分别检测人特异的 Alu序列和 Cart- 1基因的表达率 ,以 DNA序列分析证实所扩增序列的正确性。结果 受者裸鼠骨髓、脾脏 DNA经 PCR扩增到 Alu序列 2 2 4 bp特异性条带的 ,分别为 11/ 14只 (78.6 % )和 10 / 14只 (71.4 % ) ,检测到 Cart- 1基因 15 6 bp片段的分别为 8/ 14只 (5 7.1% )和 4 / 14只 (2 8.6 % ) ,两种方法间差异无显著性。结论 A 1u- PCR法用于人脐血异种移植成功植入检测指标是可行的 。
- 吴东赵小英徐荣臻蒋文智
- 关键词：基因胎血异种移植小鼠
- pcDNA3.1(+)-Hsp70^(144-517)As重组质粒构建及其转染Bcap-37细胞后细胞凋亡的研究
- 2005年
- 目的构建人反义Hsp70重组质粒[pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As]并观察其对乳腺癌Bcap-37细胞凋亡特性的影响。方法依照人hsp70mRNA全长序列,通过计算机分析,设计一对引物,在上游引物中带有1个BamHⅠ位点,经RT-PCR扩增、电泳、回收和纯化hsp70144-517片段,通过T-A克隆到pGEM-TEasy原核表达质粒中,经DNA测序和EcoRⅠ酶切图谱鉴定;EcoRⅠ酶切产物回收后亚克隆到pcDNA3.1(+)质粒中EcoRⅠ位点之间,利用BamHⅠ酶切图谱筛选反向插入重组质粒,经DNA测序得到pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As重组质粒。以脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As转染到乳腺癌Bcap-37细胞中并克隆培养建株得到AsHsp-Bcap细胞。以DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞周期分析观察转染细胞的凋亡特性。结果本研究成功构建人反义hsp70重组质粒[pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As];转染到乳腺癌Bcap-37细胞后在DNA琼脂糖凝胶电泳上观察到细胞凋亡特征性DNALadder及流式细胞周期分析发现G1峰前有1个特征性Ap峰(亚二倍体峰)。结论构建人反义重组质粒pcDNA3.1(+)-Hsp70144-517As对乳腺癌Bcap-37细胞有促进细胞凋亡的作用。
- 王晓稼郑树吴金民郁琳琳耿礼义方永明蒋文智
- 关键词：HSP70蛋白反义核酸基因重组转染
- CK19 mRNA检测在鉴别诊断良恶性胸腹水的价值
- 2002年
- 陈杰贾国葆蒋文智徐峰
- 关键词：腹水CK19MRNA良恶性鉴别诊断RT-PCR法
- 人Maspin cDNA克隆在真核细胞中表达及意义被引量：1
- 2005年
- [目的]构建表达人Maspin的基因工程细胞。[方法]提取健康人乳腺组织的总RNA,扩增出编码Maspin的全长cDNA,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Maspin,然后转染到正常的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中,应用RT-PCR和Westernblot方法分别验证Maspin基因在CHOI/pcDNA3.1(+)/Maspin细胞中RNA水平和蛋白水平的表达,同时检测细胞培养上清中Maspin的蛋白分泌。[结果]经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Maspin。Westernblot分析证明Maspin成功转染到CHO中并表达,且分泌到细胞外。[结论]人Maspin基因可在靶细胞表达,并能分泌到细胞外,为进一步了解Maspin的功能和转Maspin基因细胞成为治疗恶性肿瘤的效应细胞奠定了一定的基础。
- 潘月龙郑树方永明蒋文智
- 关键词：MASPIN基因克隆基因工程细胞
- 人Maspin cDNA克隆与真核表达质粒的构建
- 导致绝大部分恶性肿瘤病人不良预后的主要因素是复发和广泛远处转移,尤其是主要器官的转移.因此,要提高恶性肿瘤的治疗效果,就必须控制远处转移,这也是目前研究的重点之一.Maspin是Zhou等于1994年通过正常乳腺上皮与乳...
- 潘月龙郑树方永明孝作祥蒋文智丁凌赵怀
- 关键词：肿瘤复发肿瘤转移CDNA克隆真核表达
- 文献传递
- 定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血中CK19mRNA表达的意义被引量：7
- 2004年
- 目的:建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测乳腺癌患者外周血细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达的状况,并探讨其临床意义。方法:70例经病理诊断的乳腺癌患者和30名健康对照者,以实时荧光定量RT-PCR检测其外周血CK19mRNA的表达。结果:70例乳癌患者外周血CK19mRNA表达的阳性率为32.9%(23/70),30例对照者的阳性率为3.3%(1/30),经统计学分析,两者差异具有显著性差异(P=0.002)。在不同分期的乳腺癌患者中均存在不同程度CK19mRNA的表达,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者外周血CK19mRNA阳性率随分期增加而增高。结论:实时荧光定量RT-PCR方法可检测出各期乳腺癌患者外周血中CK19mRNA的表达,具有较高的敏感性和特异性,提示循环肿瘤细胞可能存在于乳腺癌发展的各个阶段。
- 姜铁军李旭芬蒋文智曹江郑树
- 关键词：乳腺癌细胞角蛋白19聚合酶链反应循环肿瘤细胞
- 构建血清蛋白质质谱模型判别家族性腺瘤性息肉病与散发性肠腺瘤被引量：4
- 2009年
- 目的筛选家族性腺瘤性息肉病（FAP）的特异表达蛋白，构建判别FAP与散发性肠腺瘤的血清蛋白指纹图谱诊断模型。方法采集19例FAP和16例散发性肠腺瘤患者的血清，以表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪（SELDI-MS-TOF）和阴离子CM01蛋白质芯片检测并筛选两组对象间的血清差异表达蛋白质峰，以支持向量机方法构建判别模型。结果FAP与散发性肠腺瘤相比，P〈0．01的蛋白质峰有6个，其中质荷比为5640、3160、4180和4290的蛋白质峰在FAP中高表达，质荷比为3940和3400的蛋门质峰在散发性肠腺瘤患者巾高表达。以质荷比分别为5640、3160和4290的蛋白质峰为基础，联合质荷比为3940、13750和4300的蛋白质峰所建立的模型判别效果最佳，对FAP与散发性肠腺瘤的判别准确率分别为94．7％和93．7％。结论SELDI-TOF-MS能有效筛选FAP与散发性肠腺瘤的差异表达蛋白，支持向量机方法所建市的质潜模型判别效果较好，为进一步研究FAP的分子发病机制提供了切入点。
- 蔡善荣余捷凯蒋文智张苏展郑树
- 关键词：表面增强激光解吸电离飞行时间质谱蛋白质组学
- 定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 ) m RNA的表达水平 ,并探讨其临床价值。方法 :采用实时荧光定量 RT- PCR法检测 5 1例经病理学确诊的结直肠癌患者和 30例健康对照者外周血 CK2 0 m RNA的表达水平。结果 :结直肠癌患者中 CK2 0 m RNA阳性率为 2 7.4 5 % ,而健康对照组阳性率为 6 .6 7% ,两者相比差异有统计学意义 (P<0 .0 2 5 )。随着临床分期的提高 ,患者外周血中 CK2 0 m RNA的表达率随之提高 ,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义 (P>0 .0 5 )。Dukes'C期与 D期患者中 >10拷贝 / ml者高于 A期与 B期患者。结论 :检测结直肠癌患者外周血 CK2 0 m RNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞 。
- 徐栋李旭芬蒋文智曹江郑树
- 关键词：结直肠肿瘤细胞角蛋白20
