薛书江
- 作品数：149 被引量：223H指数：7
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项吉林省科技厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 牛瑟氏泰勒虫与牛卵形巴贝斯虫多重PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫内转录间隔子基因(ITS基因)和牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列,设计合成了2对特异性引物。通过对反应条件进行优化,建立了同时检测牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的多重PCR方法。结果显示,用该多重PCR方法可同时扩增出2条与试验设计相符的1 020bp(牛瑟氏泰勒虫)和537bp(牛卵形巴贝斯虫)的特异性条带,对牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的最低检出限分别为10pg/μL和1pg/μL。用该方法对采自吉林省珲春市的23份临床样本进行检测,结果牛瑟氏泰勒虫的阳性率为69%,牛卵形巴贝斯虫的阳性率为52%,混合感染率为52%。表明,建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
- 王轶男钱年超黄国明胡诗悦薛书江贾立军张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫多重PCR
- 猪附红细胞体小鼠感染模型的建立和鉴定
- 薛书江吴金桐王禹许应天于龙政张守发
- 猪附红细胞体不同靶基因PCR检测方法的比较
- 为筛选出检测猪附红细胞体更为特异、敏感的PCR检测方法,本试验分别以16S rRNA、50SrRNA和膜蛋白OxaA为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以膜蛋白OxaA...
- 刘明明贾立军薛书江梁晚枫张守发
- 文献传递
- 基于Prime-Boost免疫策略的猪附红细胞体eno基因免疫效果评价
- 2022年
- 为了评估猪附红细胞体eno基因核酸疫苗与重组腺病毒疫苗采用Prime-Boost免疫策略对小鼠的免疫效果,本研究应用pVAX1-eno核酸疫苗和Ad5-M/eno重组腺病毒疫苗免疫接种小鼠,将20只BALB/c小鼠随机分为4组:Prime-Boost策略组、Ad5-M/eno重组腺病毒疫苗组、pVAX1-eno核酸疫苗组及PBS对照组。通过ELISA检测方法分别测定血清中抗猪附红细胞体特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)抗体水平及IFN-γ、IL-4细胞因子水平,三免后测定小鼠脾脏细胞中CD4^(+)、CD8^(+)的含量,对试验数据进行统计分析。结果显示,Prime-Boost策略组接种的小鼠血清中抗猪附红细胞体特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)抗体水平均显著高于Ad5-M/eno重组腺病毒疫苗组(P<0.05),极显著高于pVAX1-eno核酸疫苗组(P<0.01);Prime-Boost策略组的IL-4与IFN-γ细胞因子水平、CD4^(+)与CD8^(+)水平显著高于Ad5-M/eno疫苗组和pVAX1-eno核酸疫苗组(P<0.05)。试验结果表明,与猪附红细胞体Ad5-M/eno,PVAX1-eno单疫苗相比,采用Prime-Boost免疫策略更能显著提高小鼠体液免疫水平与细胞免疫水平。
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- 关键词：猪附红细胞体免疫水平
- 猪附红细胞体SYBR Green荧光定量PCR检测方法建立
- 根据猪附红细胞体α-烯醇化酶基因序列,设计了1对特异性引物.利用SYBR Green Ⅰ染料进行Real-time PCR反应,经过对标准质粒的纯化和引物浓度的优化建立标准曲线.将质粒标准品用灭菌去离子水作107～100...
- 薛书江许应天于龙政贾立军张守发
- 猪附红细胞体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：7
- 2013年
- 为建立一种能定性与定量检测猪附红细胞体的方法,根据GenBank中猪附红细胞体的16SrRNA基因高度保守区设计了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了一种快速检测猪附红细胞体核酸载量的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法在107～101 copies/μL具有良好的线性关系(RSq=0.999)。能检测到模板的下限为30copies,灵敏度是普通PCR检测方法的100倍。该检测方法与其他猪常见病病原体无交叉反应,具有良好的重复性。对临诊疑似猪附红细胞体感染猪血液进行了检测,其检出率比常规PCR方法高10%。表明该方法可用于临床上猪附红细胞体的检测及定量分析。
- 高旭张守发许应天贾立军于龙政薛书江
- 关键词：猪附红细胞体实时荧光定量PCR
- 吉林株犬新孢子虫SAG1基因片段的克隆及蛋白抗原性预测
- 2009年
- [目的]对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆与序列分析。[方法]从细胞培养的吉林株虫体中提取犬新孢子虫DNA,根据已发表的犬新孢子虫SAG1基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物,采用PCR技术,扩增犬新孢子虫SAG1基因片段,并成功克隆到pMD18-Tsimple载体上,对经PCR、酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列分析。[结果]对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆后,获得阳性重组质粒。克隆的SAG1基因片段长780 bp,编码260个氨基酸,与已发表的美国株犬新孢子虫SAG1基因核苷酸序列(AF132217)的同源性为99.0%,氨基酸序列同源性为98.8%。通过分子生物学软件对翻译水平进行预测,发现吉林株核苷酸序列并不影响氨基酸翻译与蛋白质的表达。[结论]该试验成功克隆重组质粒,为建立犬新孢子虫的高效表达系统奠定了基础。
- 栾杨张守发薛书江贾立军其木格
- 关键词：犬新孢子虫克隆抗原性
- 高校创新创业教育与专业教育融合模式的研究被引量：1
- 2018年
- 21世纪是创新创业的时代，随着知识经济的推动，国家与国家之间的竞争越来越体现在国民的创新素质与创业能力上。《国家中长期科学和技术发展规划纲要（2006-2020年）》明确指出，到2020年要显著提高国家的自主创新能力，形成较为完善的创新体系，进入全球创新型国家行列。大学生作为建设创新型国家的生力军，其本身创新素质的高低发挥关键性作用。高等教育担负着培养高素质创新创业型人才的重任。
- 薛书江伍生军
- 关键词：创新创业教育专业教育创新型国家创新创业型人才高校
- 吉林延边地区猪附红细胞体A1基因的克隆与原核表达
- 采用PCR方法扩增吉林延边地区猪附红细胞体A1基因片段,将扩增产物与pMD18-T-Simple载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序;分别构建A1重组pGEX-4T-1和PET-28-a表达质粒,经IPTG诱导表达...
- 于龙政薛书江贾立军张守发
- 文献传递
- 牛卵形巴贝斯虫不同靶基因PCR检测方法的比较被引量：3
- 2018年
- 旨在筛选出检测牛卵形巴贝斯虫特异、敏感的PCR方法。本试验以牛卵形巴贝斯虫18S rRNA、AMA-1和CCTη基因为靶基因进行PCR检测,从敏感性、特异性和临床检出率方面进行比较。结果显示,以18S rRNA基因的PCR方法敏感性最高,最小检出率为16 fg/μL;以CCTη为靶基因的PCR方法敏感性最低,检测量为1.6 pg/μL;而以顶膜抗原(AMA-1)为靶基因的PCR方法的最低检测量为160 fg/μL。三种靶基因均扩增不出牛瑟氏泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫基因片段。通过60份临床血液样本的检测结果表明,以18S rRNA基因设计引物的检出率最高,为30%(18/60),明显高于以AMA-1基因25%(15/60)和CCTη基因21.67%(13/60)。本试验为卵形巴贝斯虫病的诊断提供了更为敏感、特异的检测技术。
- 田万年李荣权薛书江贾立军张守发
- 关键词：卵形巴贝斯虫RRNA基因PCR方法
