许华
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖
- 目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体...
- 王齐王迟鹃李元叶许华李庆华庞天翔
- 沉默SIRT2基因抑制AML耐药HL60A细胞株的增殖
- 目的:探讨靶向干扰SIRT2 基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A 细胞增殖的影响.方法:针对SIRT2 基因构建shRNA 真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A 细胞.沉默SIRT2 基因之...
- 许华王齐李元叶李庆华庞天翔
- 沉默SIRT2基因对急性粒细胞白血病细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 SIRT2是组蛋白去乙酰化酶家族成员之一,其参与多种肿瘤的发生和发展。本研究旨在探讨SIRT2基因在人急性粒细胞白血病细胞NB4和耐药细胞HL60/A增殖中的作用,分析SIRT2对于细胞周期的影响,寻找治疗急性粒细胞白血病的新靶点。方法 蛋白质印迹法检测SIRT2在急性粒细胞白血病细胞HL60/A和NB4中的表达,针对SIRT2mRNA不同的靶序列设计并合成shRNA,构建真核表达干扰载体,制备慢病毒并感染HL60/A和NB4细胞,用嘌呤霉素筛选出稳定表达shRNA的细胞,应用蛋白质印迹法验证干扰效率;采用改良MTT法检测沉默SIRT2基因前后HL60/A和NB4细胞增殖的改变;用流式细胞术检测沉默SIRT2基因前后细胞周期的变化。结果 在HL60/A和NB4细胞中SIRT2蛋白表达水平均增高,F=43.22,P=0.002。用慢病毒感染HL60/A（F=184.9,P〈0.001）和NB4（F=354.7,P〈0.001）后,SIRT2基因的蛋白表达水平显著降低。MTT结果显示,与对照组细胞比较,48h沉默SIRT2基因的HL60/A（F=208.4,P〈0.001）和NB4（F=27.58,P〈0.001）细胞的生长速度变慢;于72h这种抑制作用更加明显,其中HL60/A的增殖速度明显变慢,F=555.9,P〈0.001。流式细胞术检测细胞周期结果显示,G0～G1期百分比,与对照组HL60/A/con（27.62±1.01）%相比,干扰组HL60/A/sh1（37.14±0.03）%（F=7.61,P〈0.001）和HL60/sh2（37.51±3.63）%（F=3.89,P=0.009）比例显著增加;与对照组NB4/con（27.49±0.50）%相比,干扰组NB4/sh1（38.26±1.93）%（F=8.02,P=0.007）和NB4/sh2（35.23±1.11）%（F=3.50,P〈0.001）比例显著增加;S期细胞百分比,与对照组HL60/A/con（51.94±1.15）%相比,干扰组HL60/A/sh1（40.24±0.66）%（F=3.34,P〈0.001）和HL60/sh2（42.73±2.76）%（F=10.33,P=0.004）比例显著降低;与对照组NB4/con（50.65±0.23）%相比,干扰组NB4/sh1（39.58±1.11）%（F=3.02,P〈0.001）和NB4/sh2（43.82±1.33）%（F=10.42,P=0.011）比例显著降低;G2～M期细胞比例无明显变化。结论 干扰S
- 陈龙许华李元叶王齐程晶莹李庆华庞天翔
- 关键词：SHRNA干扰急性粒细胞白血病NB4细胞增殖
- NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究
- 目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC ...
- 许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔
- 含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA/1小鼠模型的治疗作用。方法将40只6周龄雄性DBA/1小鼠随机分为4组:未处理的空白对照组(Nor组)、诱导发病并注射甲氨蝶呤药物的甲氨蝶呤治疗组(MTX组)、诱导发病并注射含笑内酯的实验组(MCL组)和诱导发病并注射DMSO的模型对照组(Con组),用牛Ⅱ型胶原法诱导MTX、Con和MCL组小鼠发病建立类风湿关节炎模型;在二次免疫注射24 h后开始隔天腹腔注射给药并对小鼠体重和关节炎发病情况进行隔天观察,给药28次后停止用药,眼球取血、蛋白芯片测血清中细胞因子,处死小鼠取爪子及膝盖做组织病理学检查。结果成功构建了DBA/1小鼠类风湿关节炎模型;各组小鼠之间体重差异无统计学意义(P>0.05);关节炎评价显示MCL组低于Con组(P<0.01),高于MTX组(P<0.01);病理结果显示Nor组小鼠组织正常,Con组受累关节出现炎症细胞浸润、滑膜增生、炎性肉芽组织形成、坏死组织等症状,MCL组与MTX组受累关节仅出现轻于Con组的炎症细胞侵润、滑膜增生等症状;小鼠血清细胞因子检测结果共显示出6种细胞因子:C5/C5a、TIMP-1、M-CSF、sICAM-1、IFN-γ和BLC;Con组的类风湿关节炎小鼠中C5/C5a、TIMP-1和M-CSF表达量降低,经含笑内酯治疗的MCL组中这些因子均有不同程度的恢复(P<0.01),仅仅在MCL组中检测到BLC表达。结论含笑内酯对小鼠DBA/1类风湿关节炎具有治疗作用,C5/C5a、TIMP-1、M-CSF和BLC等因子在这一过程发挥不同的作用。
- 许华王建王迟鹃张丽媛常国强蔺亚妮张洪菊张玉娟张海瑞李庆华庞天翔
- 关键词：DBA
- 急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性
- 目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响.方法:分离AML 患者及对照MSC 与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检...
- 许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔
- NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响
- 目的:研究lipocalin 家族成员NGAL 对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制.方法:构建针对NGAL 的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL 的细胞系.MTT 法检测细胞活力.Ho...
- 李元叶张海瑞王齐许华李庆华庞天翔
- shRNA干扰CIAPIN1基因表达促进K562细胞粒系分化
- 2013年
- 目的探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562粒系分化的影响。方法针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,转染K562细胞并作为干扰组,以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time PCR及Western blot技术鉴定干扰效率;采用瑞氏染色和电镜分别观测K562细胞形态学和超微结构的改变;采用Real-time PCR方法检测粒系分化标志基因中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)、血清黏蛋白1(ORM1)以及粒系分化转录因子CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPα)、低氧诱导因子1α(HIF1α)mRNA水平的改变;流式细胞术检测K562细胞表面分化抗原CD11b表达的改变;Western blot技术检测ERK1/2、JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果与对照组相比,干扰组的CIAPIN1基因表达被有效抑制(P<0.05);K562细胞的形态和超微结构趋向成熟粒细胞阶段;NCF1、ORM1、C/EBPα及HIF1αmRNA表达水平升高(P<0.05);CD11b表达升高(P<0.01);ERK1/2磷酸化水平升高(P<0.05),而JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平未见明显改变。结论抑制CIAPIN1基因表达能促进K562细胞向成熟的粒细胞阶段分化,ERK1/2磷酸化水平的升高可能参与了该分化过程。
- 王建王迟鹃许华张丽媛蔺亚妮常国强梁昊岳茹永新李庆华张洪菊张海瑞庞天翔
- 关键词：K562细胞SHRNA干扰
