贾人初
- 作品数：8 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了利用RACE技术从日本血吸虫19天童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因，序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp，编码436个氨基酸，理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明，该基因的氨基酸序列具有典型W...
- 林矫矫陶丽红苑纯秀姚利晓傅志强冯新港刘金明石耀军王欣之贾人初
- 文献传递
- 日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的筛选及阳性克隆分析被引量：2
- 2008年
- 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行序列测定,获得了19条有效EST序列。其中13个条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,6个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。将19个EST序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中4号(GenBank Accession No.:EW968294)、13号(GenBank Accession No.:EW968303)、14号(GenBank Accession No.:EW968304)、15号(GenBank Accession No.:EW968305)、18号(GenBank Accession No.:EW968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果。综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果,编码CASP8和FADD类似性细胞程序性死亡调节蛋白、α-2-HS-糖蛋白、M4蛋白、具有R3H结构域的一种mRNA结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因。为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础。
- 贾人初孙毅刘金明傅志强苑纯秀石耀军陆珂孙焕李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠肝脏抗性基因
- 东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关靶基因筛选被引量：14
- 2008年
- 目的寻找东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关靶基因。方法利用东方田鼠血清以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库,将所得阳性克隆进行测序及生物信息学分析,确定目的基因。结果经3轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(857倍),随机挑取58个克隆进行序列测定,获得了10条表达序列标签(EST)序列,其中7条与GenBank中登陆的日本血吸虫基因序列具有99%～100%同源性,1条与类人猿锌指蛋白基因有82%同源性。功能预测结果表明,大部分EST编码蛋白或多肽的功能主要是参与血吸虫基因表达调控。结论发现了多个可能与东方田鼠抗血吸虫抗性相关的靶基因,为进一步阐述东方田鼠抗血吸虫病的分子机理奠定了基础。
- 孙毅孙焕贾人初刘金明苑纯秀石耀军陆珂李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠靶基因
- 家畜日本血吸虫基因工程苗研究
- 林矫矫冯新港蔡幼民刘金明苑纯秀傅志强石耀军程国峰沈纬朱传刚李浩陆珂沈阳黄劭鹏姚利晓孙安国夏艳勋赵晓宇杨柳章登吉施福恢钱承贵陈兆国杨健美张雪娣邵东华陶丽红彭运潮孙毅贾人初
- 该成果为国家863计划血吸虫病防治研究专项课题（2004AA2Z3510，2004.7～2005.12）。研究针对某些血吸虫期别和性别差异表达的分子可能与日本血吸虫的生长、发育、性成熟、产卵、致病等相关，应用抑制性消减杂...
- 关键词：
- 关键词：疫苗日本血吸虫基因工程
- 日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建被引量：11
- 2007年
- 目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA,分离纯化mRNA,经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化,使其成为两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。收集300bp以上的双链cDNA片段,与T7Select 10-3b载体连接,经体外包装后,以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。通过滴度测定及PCR技术鉴定文库质量,用7种特异性引物以PCR法从文库中钓取目的基因以检测文库的代表性。结果原始文库的库容量为4.98×106pfu,扩增后文库滴度为3.85×1011pfu/ml。对随机挑取的96个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为93.8%,其中95.6%的插入片段大于300bp。7种特异性引物均能从文库中钓取到日本血吸虫成虫相关基因。结论构建了日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。
- 孙毅贾人初刘金明苑纯秀石耀军陆珂傅志强孙焕蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫成虫
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt－4基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了利用RACE技术从日本血吸虫19天童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因，序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp，编码436个氨基酸，理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明，该基因的氨基酸序列具有典型W...
- 林矫矫陶丽红苑纯秀姚利晓傅志强冯新港刘金明石耀军王欣之贾人初
- 文献传递
- 东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建被引量：4
- 2007年
- 目的构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础。方法用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头并用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ消化,使其两端分别带EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ黏性末端。用Mini Column纯化,收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoR和Hind末端的T7 Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。结果经测定,库容量为1.5×106pfu,扩增后文库滴度为1.1×1012pfu/ml。对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91%,阳性克隆片段长度分布在200-1500bp,其中有90%的插入片段〉300bp。结论成功构建了东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库。
- 贾人初孙毅刘金明苑纯秀傅志强石耀军陆珂孙焕李浩蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠肺脏
- 东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建被引量：1
- 2008年
- 本项研究的目的是构建东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因奠定基础。用TRIzol试剂提取东方田鼠肝脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并用EcoRⅠ和HindⅢ酶切,使其两端分别带EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端。用Mini Column纯化、收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。经测定,库容量为1.3×107PFU/mL,扩增后文库滴度为1.8×1011PFU/mL。对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91.7%,阳性克隆片段大小分布在200bp～1000bp,其中有95.5%的插入片段大于300bp。用日本血吸虫童虫可溶性抗原对文库进行了初筛,得到了21个ESTs,将这些阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中大部分克隆诱导的童虫死亡率比阴性噬菌体对照高出2%～13%。
- 贾人初孙毅刘金明傅志强苑纯秀石耀军陆珂孙焕李浩林矫矫
- 关键词：东方田鼠肝脏CDNA文库
