赵娜
- 作品数：13 被引量：60H指数：4
- 供职机构：吉林大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省高等教育教学改革立项课题国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的原核表达曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子(IL-4-inducing principle of schistosoma eggs,IPSE),并制备小鼠多克隆抗体。方法人工合成IPSE基因,采用PCR技术克隆其成熟体开放阅读框,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IPSE。转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后,应用组氨酸标签蛋白纯化柱纯化包涵体蛋白,免疫BALB/c鼠,制备多克隆抗体。结果克隆的IPSE基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%;重组表达质粒pET-28a-IPSE经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为16 000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,可与鼠抗His单抗特异性结合;用纯化的包涵体蛋白免疫BALB/c小鼠后,获得的特异性抗血清效价为2×10-4,该血清可与IPSE蛋白发生特异性反应。结论已原核表达、纯化了曼氏血吸虫IPSE蛋白,并制备了高滴度的特异鼠抗血清,为进一步从日本血吸虫中筛选相似蛋白及研究其功能奠定了基础。
- 赵娜李世杰徐晓芳吴威范大为宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词：原核细胞包涵体多克隆抗体
- 中国蜱传病主要流行趋势及防控科技对策被引量：34
- 2011年
- 蜱是一种寄生在动物体表常见的吸血寄生虫,具有从宿主获得多种病原体的能力,是多种人畜共患传染病的重要传播媒介。随着近几年蜱传病的发生具有增加的趋势,蜱及蜱传病再次成为公众关注的焦点。综述了中国蜱传病的主要类型、发生流行因素和病原体危害特点、防控的主要技术手段以及目前防治蜱传病存在的主要科技问题和今后防控蜱传病的科技对策,以期使人们更深入地了解蜱传病,制定相应的防控措施以降低其危害性。
- 马广鹏孙传范赵娜张西臣
- 多媒体技术在《动物寄生虫病学》教学中的应用被引量：8
- 2010年
- 《动物寄生虫病学》是动物医学专业的重要专业课。由于动物寄生虫的种类多、形态各异,而且生活史复杂、为一动态过程,因此利用传统的教学方法 ,学生在学习过程中常感到难以理解和记忆。多媒体教学作为一种现代教学方式,是计算机技术与教学实践相结合的产物。利用多媒体教学手段可将动物寄生虫形态特征和生活史动态过程生动展示出来,从而提高学生学习兴趣和教学质量。
- 宫鹏涛李建华赵娜杨举张西臣
- 关键词：多媒体技术动物寄生虫病学教学
- TIMP1基因重组真核表达质粒的构建及其在MCF-7细胞中的表达
- 2011年
- 目的构建3种TIMP1基因重组真核表达质粒,并在人乳腺癌MCF-7细胞中表达。方法将TIMP1基因分别插入3种真核表达载体pcDNA3.1(+)、pVAXⅠ和pEGFP-C1,构建3种重组表达质粒pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAXⅠ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1,转染MCF-7细胞,采用Real-time PCR和Western blot法检测TIMP1基因在MCF-7细胞中的表达。结果 3种重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;重组表达质粒pEGFP-C1-TIMP1转染MCF-7细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,而pcDNA3.1(+)-TIMP1和pVAXⅠ-TIMP1转染的细胞则观察不到绿色荧光;在转染的MCF-7细胞中,TIMP1基因mRNA转录水平和蛋白表达水平从高到低依次为pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAXⅠ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1。结论已成功构建了3种TIMP1基因重组真核表达质粒,其在MCF-7细胞中的表达量有差异。
- 李鹏马艳娇赵娜袁婷宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
- 关键词：基质金属蛋白酶抑制剂1真核细胞基因表达乳腺肿瘤
- 宠物重要人兽共患寄生虫病
- 宠物饲养的盛行,与宠物相关的人兽共患寄生虫病愈加得到高度重视.为了避免和减少人兽共患寄生虫病的流行,本文就几种重要的宠物人兽共患寄生虫病的流行情况、诊断及防治等作一介绍,以期提高认识,防患未然.
- 张西臣赵娜
- 关键词：宠物人兽共患寄生虫病
- 犬贾第鞭毛虫α-12贾第素基因的原核表达及纯化
- 2014年
- 为了原核表达、纯化犬贾第鞭毛虫α-12贾第素蛋白,试验经RT-PCR获得α-12贾第素基因片段,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组原核表达质粒p ET-28a-α-12,再转化入E.coli Rosetta(DE3)后,用IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot分析验证,并用Ni琼脂糖凝胶纯化融合的α-12贾第素蛋白。结果表明:重组原核表达质粒p ET-28a-α-12经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为40 ku,且主要以包涵体形式存在;表达量约占菌体总蛋白的15.7%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上。
- 宋百军赵娜赵源宫鹏涛李建华杨举李赫张西臣
- 关键词：原核表达包涵体蛋白纯化
- 微小隐孢子虫端粒序列及端粒酶活性的研究
- 2012年
- 为了探讨我国微小隐孢子虫(C.parvum)的端粒序列,试验根据国外已报道的端粒重复序列5'-CCTAAA-3'设计寡聚核苷酸探针(CCTAAA)5,并用地高辛标记,C.parvum基因组DNA经Bal31-HindⅢ酶切后进行Southern印迹杂交鉴定;并在此基础上,采用改进的端粒重复序列扩增(TRAP)法首次对子孢子和卵囊时期C.parvum的端粒酶活性进行检测。结果表明:C.parvum基因组DNA与探针(CCTAAA)5杂交,获得了较好的杂交条带,随着Bal31-HindⅢ酶切时间的延长,杂交信号逐渐减弱,说明C.parvum端粒序列定位在染色体的末端,与国外报道的C.parvum端粒序列一致,为5'-CCTAAA-3';检测C.parvum端粒酶活性时发现,子孢子时期端粒酶具有活性,卵囊中未检测到端粒酶活性。
- 赵娜刘慧李建华宫鹏涛杨举李赫张西臣
- 关键词：微小隐孢子虫端粒端粒酶
- RNA干扰IDH2基因对HCT-8细胞增殖能力的影响
- 2012年
- 目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HCT-8细胞空白对照组。构建靶向基因IDH2的siRNA真核绿色荧光载体重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2,利用FuGENE HD转染剂转染HCT-8细胞,通过荧光定量PCR检测IDH2mRNA的表达情况及MTT法检测结肠癌HCT-8细胞增殖变化。结果:在荧光显微镜下进行细胞计数,细胞转染率为74%。实时荧光定量PCR检测,siRNA重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2对IDH2基因表达的抑制率为85.02%,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT检测,干扰质粒转染组细胞的增殖能力明显低于空白对照组(P<0.05)。结论:抑制IDH2基因的表达可影响结肠癌细胞的增殖能力,提示IDH2基因在结肠癌的发生发展中起重要作用,抑制IDH2基因的表达可能成为一种治疗结肠癌的方法。
- 徐晓芳宋晗星邢沈阳吕强高江明赵娜常乐高峰宫鹏涛李建华张国才张西臣
- 关键词：RNA干扰
- 宠物重要人兽共患寄生虫病被引量：11
- 2010年
- 随着宠物饲养的盛行,与宠物相关的人兽共患寄生虫病愈加得到高度重视。为了避免和减少人兽共患寄生虫病的流行,本文就几种重要的宠物人兽共患寄生虫病的流行情况、诊断及防治等作一介绍,以期提高认识,防患未然。
- 张西臣赵娜
- 关键词：人兽共患寄生虫病
- 牛布鲁菌L7/L12蛋白的原核表达及纯化被引量：1
- 2009年
- 目的原核表达并纯化牛布鲁菌L7/L12蛋白。方法提取牛布鲁菌S19基因组DNA,PCR法扩增L7/L12基因,经测序正确后,克隆至pET-28a(+)载体,构建重组原核表达质粒pET-L7/L12,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量,经亲和层析纯化后,Western blot鉴定纯化产物。结果所构建的重组原核表达质粒pET-L7/L12经酶切鉴定表明构建正确。重组蛋白以包涵体形式表达,表达量占全菌总蛋白的33%;纯化的重组蛋白纯度可达94%,可与布鲁菌小鼠免疫血清发生特异反应。结论已成功表达并纯化了牛布鲁菌L7/L12蛋白,为建立高特异性的新型布鲁菌检测方法奠定了基础。
- 梁晓英赵娜王贤平郑经成吴威闫广谋
- 关键词：原核表达纯化
