赵宇
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立被引量：2
- 2008年
- 根据GenBank已发表的鸡干扰素α1(IFNα1)基因序列,设计1对特异性引物,采用PCR方法,从鸡基因组中扩增出鸡IFNα1基因。根据胸腺肽α1(THYα1)氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,设计基因序列,同时在IFNα1-THYα1之间设计1个5肽Linker。在IFNα1基因结构基础上,设计4条寡核苷酸单链作为下游引物,以搭桥的方式延伸和扩增,最终获得IFNα1-THYα1融合基因;将该基因克隆至pGEX4T-1载体后,转化至BL21(DE3)受体菌中,37℃培养至菌液D600为0.6～1.0时,IPTG(1.0mmol/L)诱导培养4h;经western blot鉴定证实,成功构建了鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统,表达产物以包涵体形式存在,获得高纯度的IFNα1-THYα1蛋白。以细胞病变抑制试验及E玫瑰花结形成试验对目的蛋白进行体外活性检测,结果显示该蛋白具有生物活性。
- 王佳孙铭泽赵宇刘宇鹏刘慧玉张英李莉刘松财
- 关键词：胸腺肽Α1融合蛋白纯化
