赵浩勤 作品数:7 被引量:23 H指数:3 供职机构: 江苏科技大学 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
家蚕精子介导转基因技术体系的优化 被引量:8 2007年 为了构建高效的家蚕转基因技术,对采用piggyBac转座载体的家蚕精子介导转基因的主要技术参数进行优化,结果表明外源DNA的稀释剂和注射方式对导入效率影响较大,G0代未整合的外源DNA在5龄期前基本被降解破坏。推荐的家蚕精子介导基因转移技术方案为:处女蛾交尾囊注射6~8μL以0.1×TE稀释的2 g/Lpig-gyBac转座子载体DNA后正常交配产卵,根据G0代5龄期及蛾期PCR检测标记基因为阳性的蛾区自交,G1代阳性个体自交以获得纯合后代。 张业顺 夏定国 张国政 唐顺明 沈兴家 赵浩勤 郭锡杰关键词:家蚕 PCR检测 电穿孔技术及其在精子介导转基因中的应用 被引量:5 2006年 介绍了电穿孔技术和精子介导转基因技术,同时总结了近年来电穿孔技术在精子介导转基因中的应用进展。 张业顺 张国政 夏定国 赵浩勤关键词:电穿孔 精子介导 转基因 家蚕第二白卵近等基因系差异表达基因的研究 被引量:2 2008年 为探索家蚕第二白卵性状相关的功能基因,建立了家蚕正常型黑卵品种菁松A的第二白卵近等基因系,利用抑制消减杂交技术构建了黑卵品系与白卵品系的抑制消减杂交文库,对文库中的高频次检出序列H46利用cDNA末端快速扩增技术明确了其3′末端序列,经半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR证明H46序列代表的基因在黑卵和白卵系统中表达水平相差达1833倍,为正常型黑卵上调表达基因。 李翠玲 张国政 夏定国 赵浩勤 张业顺关键词:家蚕 抑制消减杂交 实时定量RT-PCR 家蚕转录因子AP-4基因cDNA的分子克隆与生物信息学分析 被引量:3 2008年 AP-4(activator protein 4)是一种转录因子,在生物的生长发育中有重要作用。根据家蚕表达序列标签(EST)并利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了家蚕AP-4(Bombyx mori activator protein4)基因,结合生物信息学方法对所获的序列进行开放阅读框、序列同源性分析,预测了AP-4蛋白的理化性质。获得的家蚕AP-4基因cDNA的全长为1621bp,其开放阅读框为996bp,编码331个氨基酸,基因由3个外显子和2个内含子组成。同源性比对表明该基因推导的氨基酸序列与棉铃虫AP-4和谷蛀虫AP-4推测的蛋白同源性分别为76%和54%,第45-99位氨基酸序列是一个典型的保守结构域。实时定量RT-PCR显示该基因在所检测家蚕的各发育时期中,除幼虫1龄和蛹期第4天无表达外,其它时期均有表达,其中幼虫3龄和4龄期的表达量较高。 李佳梅 赵浩勤 张国政 夏定国 张业顺 唐顺明 沈兴家关键词:家蚕 CDNA末端快速扩增 生物信息学 SAGE技术及其应用 被引量:4 2008年 综述了基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE)技术的基本原理和最近SAGE技术的应用情况以及在家蚕功能基因研究中的应用前景。 赵浩勤 张国政 李佳梅 夏定国 张业顺关键词:基因表达 基因表达系列分析 标签 家蚕 家蚕Bmtim-2等基因的克隆与分析 家蚕是重要的经济昆虫,在我国,蚕丝业已有5000 多年的悠久历史,从古至今在经济文化生活中占有重要地位。家蚕作为鳞翅目昆虫的模式,具备了大量的遗传、生理、和分子生物学积累,2004年家蚕基因组框架图的完成,为家蚕功能基因... 赵浩勤关键词:蚕丝业 鳞翅目昆虫 分子生物学 序列标签 生物信息学 文献传递 家蚕生物钟基因Bmtim2的克隆与序列分析 被引量:1 2008年 [目的]为进一步研究家蚕生物钟基因的功能提供依据。[方法]从家蚕品种p50未受精卵提取总RNA,利用快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆家蚕生物钟基因Bmtim2cDNA序列。最后运用实时定量RT-PCR对该基因在家蚕不同发育时期的表达情况进行初步分析。[结果]利用RACE扩增,获得长度为1867bp、包括完整3'非翻译区的家蚕生物钟基因timeless2(Bmtim2)cDNA序列。经推导,获得该基因序列编码的584个氨基酸残基的蛋白质序列。该蛋白序列具有TIM蛋白的C末端保守区,与黑腹果蝇、尖音库蚊的TIM2基因具有近缘进化关系。Bmtim2基因在家蚕生活周期各时点均有表达。[结论]该结果对研究Bmtim2基因在家蚕发育过程的时空表达差异及其与日周节律的关系具有参考价值。 赵浩勤 李佳梅 夏定国 张业顺 张国政关键词:家蚕 克隆