赵郁
- 作品数：20 被引量：45H指数：4
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 双启动子shRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。方法:通过PCR分别扩增带有BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有BglⅡ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO。再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功。结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段。
- 娜仁郭刚张瑞赵郁汪蓓蕾梁东春杨宇虹
- 关键词：聚合酶链反应质粒
- 简易的凝胶干燥与图像扫描替代凝胶成像
- 2002年
- 赵郁穆云翔刘新宇
- 关键词：图像扫描图像处理分子生物学
- 人载脂蛋白CⅡ成熟肽编码基因的克隆被引量：1
- 2005年
- 目的:克隆人载脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)成熟肽编码基因。方法:以人基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应(PCR)分别扩增ApoCⅡ成熟肽的编码基因外显子3和外显子4,继而采用外显子拼接法,以两种扩增产物为模板再次进行PCR,得到246bp的人ApoCⅡ基因编码片段。将ApoCⅡ基因编码片段重组入载体pUC18,并进行序列测定。结果:PCR扩增得到ApoCⅡ基因编码片段,经测序证实重组入载体pUC18中的ApoCⅡ编码片段的序列与Genbank中所检索到的编码序列完全一致。结论:利用外显子拼接法完成人ApoCⅡ成熟肽基因编码片段的克隆,为基因工程研制有生物活性蛋白提供了可行的技术手段。
- 赵莉莉汪军梅刘新宇赵郁解用虹
- 关键词：基因克隆
- 十二烷基硫酸钠与十二烷基磺酸钠被引量：16
- 2004年
- 十二烷基硫酸钠与十二烷基磺酸钠的混淆及误用具有一定的普遍性。两者虽均属于阴离子表面活性剂但结构及理化性质均有所差别 ,因此在实验中予以一定的关注是必要的。
- 赵郁刘新宇杨宇虹
- 关键词：十二烷基硫酸钠十二烷基磺酸钠SDS-PAGE
- 小鼠载脂蛋白CⅡ编码基因的克隆
- 2006年
- 目的:克隆小鼠载脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)编码序列。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法扩增获得ApoCⅡ编码序列,将ApoCⅡ基因编码片段重组入质粒pUC18,得到重组克隆载体pUC18-ApoCⅡ,进行序列测定。结果:经测序证实重组质粒pUC18-ApoCⅡ中的ApoCⅡ编码片段的序列与GenBank中的一致。结论:成功构建了含编码小鼠ApoCⅡ基因的重组克隆载体pUC18-ApoCⅡ,为基因工程生产有生物活性的ApoCⅡ、开展ApoCⅡ的免疫学测定及进一步探讨ApoCⅡ治疗高甘油三酯血症的可能性奠定了基础。
- 汪军梅赵莉莉刘新宇赵郁解用虹
- 关键词：基因小鼠
- 脂蛋白脂肪酶基因突变的研究被引量：9
- 2004年
- 目的:筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变,并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法:对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析,电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点,引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果:在高甘油三酯血症人群中,检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子,1例外显子5Pro207→Leu突变杂合子,在全部样品中检出1例Ser447→stop突变纯合子,50例Ser447→stop杂合子。结论:天津地区人群中存在着LPL基因突变,除Ser447→stop外,内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关,可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。
- 赵郁穆云翔杨宇虹刘新宇葛林解用虹
- 关键词：高甘油三酯血症杂合子LPL剪接PCR产物
- 构型与构象被引量：6
- 2004年
- 构型和构象是表征分子结构特征的易混淆的两个概念 ,构型是指具有一定构造的分子中原子或基团的固有空间排列。广义的构象是指分子中原子或基团在三维空间的取向和定位 ,狭义的构象是指具有相同构造和构型分子中原子或基团在空间的取向和定位。构型和构象既相互区别 ,又相互联系。对分子构型和构象概念的正确认识是阐明生物大分子结构与功能复杂关系的重要前提 ,对其正确地理解和运用将有助于教师教学任务的完成和学生对相关知识的理解和掌握。
- 赵郁刘新宇杨宇虹解用虹
- 关键词：构型构象
- 人载脂蛋白C Ⅱ原核表达载体构建及蛋白表达方法
- 2014年
- 目的构建人载脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)的原核表达载体,表达融合蛋白GST-hApoCⅡ。方法采用限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切pUC18/hApoCⅡ获得ApoCⅡ成熟肽基因片段,并与相同酶切处理的表达载体pGEX-3X连接构建重组质粒。重组质粒经酶切鉴定、测序验证后转化感受态E.coli DH5α,IPTG诱导表达,优化表达条件,表达产物经SDS-PAGE电泳分析鉴定。选取最佳条件诱导表达,亲和层系法纯化融合蛋白,采用Western blot鉴定。结果重组质粒经酶切和测序后证实目的基因已连接入表达载体,SDS-PAGE检测到35 kD的目的蛋白条带,优化和纯化后经Western blot证实蛋白质产物为融合蛋白GST-hApoCⅡ。结论本方法成功表达融合蛋白GST-hApoCⅡ,此为ApoCⅡ结构及其作用机理研究及制备ApoCⅡ抗体等提供了便利条件。
- 赵莉莉汪军梅刘新宇赵郁毛用敏解用虹
- 关键词：脂蛋白脂肪酶基因工程高甘油三酯血症融合蛋白
- 脂蛋白脂肪酶内含子3C→T突变被引量：5
- 2003年
- 为筛查中国人群脂蛋白脂肪酶基因的突变情况 ,并探讨这些突变对脂蛋白代谢可能产生的影响 ,研究者利用聚合酶链反应—单链构象多态性分析技术 ,对 14 0例人群 (高甘油三酯血症组 5 1例 ,正常对照组 89例 )的脂蛋白脂肪酶基因进行了突变筛查 ,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果在外显子 4扩增片段 (包括内含子—外显子交界区 )有 2例可疑突变被检出 ,经测序证实均为内含子 3受位剪接位点上游 6bp的C→T转换突变杂合子。由于该突变仅见于重度高甘油三酯血症患者 ,结合国内外相关文献 ,研究者认为我国人群存在脂蛋白脂肪酶基因内含子 3受位剪接位点的C→T突变 ,该突变可能是我国人群高甘油三酯血症的遗传易患因子。
- 杨宇虹葛林赵郁解用虹
- 关键词：脂蛋白脂肪酶聚合酶链反应-单链构象多态性分析高甘油三酯血症
- 一种新的脂蛋白脂肪酶基因突变(C^(562)→T)被引量：1
- 2006年
- 目的:筛查国人(天津地区)脂蛋白脂肪酶基因突变情况,并探讨其对血脂水平的影响。方法:利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术,对386例患者(血脂正常组278例,血脂异常组108例)的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果:在386例样本中,检出1例外显子3C562→T(Leu103→Leu)同义突变杂合子。结论:新LPL突变(C562→T)的发现,对进一步阐述LPL结构与功能的关系有重要的参考价值。
- 赵莉莉汪军梅穆云翔杨宇虹赵郁刘新宇解用虹
- 关键词：脂蛋白脂酶基因突变聚合酶链反应
