钟孝欢
- 作品数：10 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠髁状突软骨细胞体外分离培养和压力模型的构建被引量：2
- 2007年
- 目的培养大鼠髁状突软骨细胞(Mandibular Condylar Chondrocytes,MCCs),建立简便易行的髁状突软骨细胞持续静压力模型。方法SD大鼠处死后无菌条件下分离髁状突软骨,利用机械—酶二次消化法分离细胞并培养传代,鉴定细胞来源,观察细胞生长情况,绘制生长曲线;在压力模型给细胞加压后,检测培养细胞的形态、增殖等。结果成功获得MCC有限细胞系,给细胞加压48h有促进细胞增殖的作用,90kpa压力抑制细胞增殖。结论利用机械—酶二次消化法,可成功培养出原代SD大鼠MCCs,自制压力模型可作为加压装置对细胞实施加压干预。
- 黄生高王明朗钟孝欢王会欣
- 关键词：细胞培养软骨细胞
- 甲状旁腺激素相关蛋白和机械力对成骨细胞增殖分化的影响被引量：2
- 2006年
- 甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)调节着骨骼代谢。PTHrP通过对成骨细胞功能调节来影响骨骼代谢,这种作用主要由环腺苷酸(cAMP)依赖性的蛋白激酶A(PKA)和钙离子/蛋白激酶C(Ca2+/PKC)信号传导通路介导机械力来诱导成骨细胞增殖和分化。了解PTHrP和机械力对成骨细胞增殖和分化的影响,有助于指导正畸临床或基础研究。
- 钟孝欢黄生高
- 关键词：甲状旁腺激素相关蛋白成骨细胞信号传导
- 持续静压力对人牙周膜细胞OPG及ODFmRNA表达的影响被引量：13
- 2006年
- 目的:研究持续静压力(continuously compressive pressure,CCP)作用下人牙周膜细胞(human periodon-tal ligament cells,HPDLCs)护骨素(osteoprogerin,OPG)和破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)的表达,探讨其在正畸骨改建中的作用机制。方法:组织块酶消化法原代培养HPDLCs,建立压力模型,分别对细胞施以1 g/cm22、g/cm23、g/cm2顶-底轴向压力0.5 h1、.5 h、6 h1、2 h2、4 h和48 h,利用逆转录聚合酶链反应(re-verse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测OPG及ODF信使RNA(mRNA)的表达。结果:随着CCP作用时间的增加,HPDLCs ODF mRNA表达增强(P<0.01);OPG mRNA在加力后期明显升高(P<0.05)。随力值增加,ODF及OPG mRNA表达均增强,力值为2 g/cm2时,改变最明显(P<0.05)。结论:CCP可上调HPDLCsOPG及ODF mRNA表达。而OPG mRNA表达升高则明显滞后。
- 黄生高张建兴熊培颖王明朗钟孝欢
- 关键词：牙周膜细胞护骨素破骨细胞分化因子逆转录聚合酶链反应
- 兔正畸牙移动过程中牙周组织血小板衍生生长因子-AA的表达被引量：3
- 2005年
- 目的观察兔正畸牙移动过程中牙周组织血小板衍生生长因子AA(platelet-derivedgrowthfactorAA,PDGF-AA)的表达与分布,探讨血小板衍生生长因子-AA在正畸牙移动过程中的作用机制。方法选择35只体重为2.0￣2.5kg的健康新西兰大耳白兔,随机分成7组,每组5只,分别为1、3、5、7、14和21d正畸加力组和正常对照组。2%戊巴比妥钠麻醉,兔下切牙常规粘网底颊面管,以镍钛推簧施力40g。采用免疫组织化学染色进行血小板衍生生长因子-AA半定量分析。结果血小板衍生生长因子-AA在正畸加力组牙周组织的表达明显强于正常对照组(P<0.01),7d组为表达高峰期,14、21d组表达减弱。并且同一实验组,血小板衍生生长因子-AA在张力侧表达均高于压力侧(P<0.01)。结论血小板衍生生长因子-AA在兔正畸牙移动过程中的表达明显増强,从而推测血小板衍生生长因子-AA可能参与了正畸骨改建过程的骨形成调节,并发挥着重要作用。
- 康祖铭黄生高张建兴熊培颖钟孝欢
- 关键词：血小板衍生生长因子免疫组化牙移动正畸
- 静态牵张应变作用下PTHrP对人成骨样细胞增殖及其c-fos mRNA表达的影响
- 目的：探讨静态牵张应变作用下PTHrP对人成骨样细胞(MG-63)增殖及其c-fos mRNA表达的影响。
方法： 1、将培养的细胞接种于膜式细胞牵张应变施加装置中，利用逆转录聚合酶链反应(reverse tr...
- 钟孝欢
- 关键词：人成骨样细胞甲状旁腺激素相关蛋白逆转录聚合酶链反应细胞增殖
- 文献传递
- 压应力对小鼠单核细胞RAW264.7 DNAX活化蛋白12、抗酒石酸酸性磷酸酶表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的探讨压应力对小鼠单核细胞RAW264.7 DNAX活化蛋白12(DAP12)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)表达的影响。方法以小鼠单核细胞RAW264.7为研究对象,采用四点弯曲体外细胞加载装置加载压应力0、3、6、12h,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法检测DAP12、TRAP mRNA和DAP12蛋白的表达情况。结果小鼠单核细胞RAW264.7经破骨细胞培养液培养后,体积变大,核数目增多,TRAP染色阳性。受压应力刺激后,DAP12、TRAP mRNA及DAP12蛋白表达随加力时间延长而增加(P<0.05)。结论小鼠单核细胞RAW264.7经破骨细胞培养液培养后成功向破骨细胞转化,转化细胞受压应力刺激活化过程中存在DAP12高表达。
- 黄生高凌天牖钟孝欢刘云峰
- 关键词：抗酒石酸酸性磷酸酶压应力破骨细胞
- DNAX相关蛋白12信号通路在压应力诱导小鼠单核细胞向破骨细胞分化中的作用
- 2012年
- 目的探讨DNAX相关蛋白12（DNAX—associatedprotein12，DAP12）信号通路在压应力诱导小鼠单核细胞向破骨细胞分化过程中的作用，以期阐明正畸治疗过程中牙槽骨破骨细胞分化的调节机制。方法以小鼠单核细胞RAW264．7为研究对象，构建并导人DAPl2短发夹RNA（shorthairpinRNA，shRNA）质粒，分为DAP12-shRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组，采用四点弯曲体外细胞加载装置加载压应力，以反转录聚合酶链反应、蛋白质印迹法分别检测DAPl2、抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistantacidphosphataseTRAP）、非受体酪氨酸激酶家族Btk和Tec激酶、活化T细胞核因子1（nuclearfactorofactivatedTcells1，NFATcl）mRNA和蛋白的表达情况。结果与阴性对照组（0．385±0．021）和空白对照组（0．391±0．009）相比，DAPl2．shRNA干扰组DAPl2mRNA表达水平（0．112±0．025）明显降低（P〈0．05）；DAP12-shRNA干扰组DAPl2蛋白表达（0．193±0．015）显著低于阴性对照组（0．526±0．006）和空白对照组（0．514±0．024）（P〈0．05）。干扰组内与压应力刺激细胞0h（0．497±0．031）相比，加力6h（0．671±0．031）和加力12h（0．800±0．043）TRAPmRNA表达显著增加（P〈0．05），但各对应时间点的表达均比阴性对照组弱（3、6、12h）（P〈0．05）。受压应力刺激DAP12-shRNA干扰组Btk、Tec、NFATc1的表达虽然随加力时间的增加而增加，但各时间点（6、12h）与阴性对照组比均显著减少（P〈0．05）。结论DAP12信号通路存在并参与调节压应力刺激诱导的破骨细胞分化，DAP12在其中起重要作用。
- 黄生高凌天牖钟孝欢熊祎刘云峰梁富英
- 关键词：基因沉默应力单核细胞
- 人牙周膜细胞体外培养和机械压力模型构建被引量：14
- 2006年
- 目的:培养人牙周膜细胞(hum an periodontal ligam ent cells,HPDLCs)获得HPDLCs有限细胞系,建立简单易行的HPDLCs持续静压力(continuously compressive pressure,CCP)模型。方法:组织块酶消化湿性贴壁法原代培养HPDLCs,传代并鉴定细胞来源、观察细胞生长情况,绘制4代细胞生长曲线。用圆形玻璃片给单层细胞接触加压,对细胞施加1 g/cm2、2 g/cm2、3 g/cm2、4 g/cm248 h,用MTT法检测加压对细胞的影响。结果:成功获得HP-DLCs有限细胞系,加压后当力值小于4 g/cm2时细胞无明显受损,力值增大到4 g/cm2时,细胞出现损伤。结论:组织块酶消化湿性贴壁法可以提高HPDLCs原代培养成功率,适宜力值的玻片直接接触加压模型可初步模拟压力对牙周膜细胞的生物学作用。
- 张建兴黄生高钟孝欢熊培颖
- 关键词：牙周膜细胞细胞培养细胞体外培养模型构建
- 胰岛素对成骨细胞机械力学应答反应影响的实验研究
- 正畸牙移动是在机械力的作用下,牙槽骨发生改建,从而使牙齿朝着预定的方向移动而获得治疗效果。成骨细胞和破骨细胞是牙槽骨发生改建的功能行使者。张力侧成骨细胞介导的骨沉积和压力侧破骨细胞介导的骨吸收的相互作用是正畸牙移动过程中...
- 钟孝欢
- 关键词：胰岛素生物力学成骨细胞
- 牵张力作用下甲状旁腺激素相关蛋白对人成骨样细胞增殖的影响被引量：6
- 2009年
- 目的研究牵张力作用下甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)对人成骨样细胞增殖的影响。方法建立体外培养细胞牵张力施力模型。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PTHrP mRNA的表达及12%牵张应变作用下PTHrP(1nmol/L)对MG-63细胞c-fos mRNA表达的影响。检测不同浓度PTHrP(0、0.01、0.1、1nmol/L)及12%牵张应变联合作用12h后对细胞增殖活性的影响。结果不同牵张力对PTHrP mRNA表达影响的差异具有统计学意义,12%牵张应变组作用的影响最为显著。牵张力联合PTHrP刺激下培养较PTHrP或牵张力的单独效应具有更强的促MG-63增殖作用。牵张力联合PTHrP作用较牵张力的单独效应具有更强的增加MG-63细胞c-fos mRNA表达的作用。结论牵张力可显著影响人成骨样细胞PTHrP mRNA的表达水平。PTHrP在牵张力环境下较牵张力的单独效应具有更强的促MG-63增殖作用。在牵张力环境下PTHrP可能通过c-fos信号传导途径影响成骨细胞增殖。
- 黄生高钟孝欢王会欣王明朗
- 关键词：甲状旁腺激素相关蛋白增殖
