钟彦彦
- 作品数：23 被引量：56H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氟他胺诱导干眼模型大鼠角膜和泪腺组织病理变化及TNF-α、IL-1α的表达被引量：9
- 2016年
- 目的通过雄激素受体拮抗剂氟他胺溶液灌胃建立大鼠干眼模型,观察干眼大鼠角膜及泪腺组织病理变化及TNF-α、IL^(-1)α的表达。方法取32只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,氟他胺高、中、低浓度组和对照组,每组8只,每天分别用浓度为16 mg·kg-1、13 mg·kg-1、10 mg·kg-1氟他胺溶液和1 m L生理盐水灌胃。给药后0周、2周、4周、8周、16周、20周分别检测各组基础泪液分泌试验(SchirmerⅠtest,SⅠt)值、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素钠染色情况。给药后0周、10周、20周采用放射免疫法检测各组血清睾酮浓度。给药后20周处死大鼠取各组角膜与泪腺组织行病理学观察,免疫组织化学方法检测各组TNF-α、IL^(-1)α的表达情况。结果给药后4周时高、中浓度组SⅠt值开始减小,与对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。8周时高、中、低浓度组的SⅠt值均小于对照组(均为P<0.05),20周时高(3.23±0.31)mm、中(3.98±0.36)mm、低(4.73±0.18)mm浓度组的SⅠt值进一步减小,且均较对照组(9.60±0.60)mm下降大于50%(均为P<0.05),高、中、低浓度组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高浓度组大鼠即出现BUT缩短,8周时,高、中、低浓度组的BUT均短于对照组(均为P<0.05),20周时高(2.40±0.61)s、中(4.32±0.68)s、低(6.10±0.81)s浓度组的BUT较对照组(9.12±0.73)s进一步缩短,各组之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高、中浓度组开始出现角膜上皮点状荧光素钠着色,16周时中、低浓度组出现小片状着色,高浓度组可见角膜上皮弥漫性大片状着色,20周时各组染色评分两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后20周时睾酮浓度高浓度组(5.08±0.21)pg·m L^(-1)、中浓度组(4.23±0.16)pg·m L^(-1)、低浓度组(3.58±0.24)pg·m L^(-1)较对照组(2.24±0.15)pg·m L^(-1)不同程度升高,与对照组比较差异�
- 彭玲蔡伟浩陆晓和钟彦彦易锐文
- 关键词：雄激素受体拮抗剂氟他胺白细胞介素-1Α
- 1型重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因转染人脐静脉内皮细胞的体外研究被引量：2
- 2008年
- 目的评价1型重组腺相关病毒(rAAV1)作为新生血管性角膜病变基因治疗载体的可行性。方法rAAV1-EGFP按转染倍数(MOI)5×103,5×104,5×105转染ECV304细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察ECV304细胞中GFP阳性表达情况和细胞生长形态特点等,流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对EVE304细胞的转染效率。MTT法检测rAAV1-EGFP对EVC304细胞增殖的影响。结果转染后2d,MOI=5×105组细胞中的GFP开始表达;表达强度随MOI值的增高而增强,同时GFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强,转染后第7天达到高峰,此时流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对ECV304细胞的转染率分别为45.90%(MOI=5×103),58.56%(MOI=5×104),68.31%(MOI=5×105)。AAV1-EGFP转染ECV304细胞后,细胞生长及形态正常,MTT法显示转染后72、96h各转染组与未转染组之间A值无显著性差异。结论rAAV1-EGFP对ECV304细胞转染稳定、有效,重组腺相关病毒对细胞增殖无明显抑制,重组腺相关病毒可作为基因治疗角膜新生血管性病变的载体。
- 汤明芳陆晓和高基民钟彦彦罗微周明乾
- 关键词：腺相关病毒绿色荧光蛋白基因脐静脉内皮细胞
- 携带人内皮抑素基因的重组腺相关病毒感染对人脐静脉内皮细胞增生的影响被引量：1
- 2010年
- 目的评价携带人内皮抑素(endostatin,ES)基因的重组腺相关病毒(rAAV)感染对人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)增生的影响。方法以不同感染复数的rAAV-ES感染ECV304细胞,Western blotting检测细胞裂解液中ES蛋白的表达,ELISA法检测ES蛋白的分泌情况,流式细胞仪分析感染后ECV304的细胞周期,MTT法检测ECV304增殖情况。结果感染了rAAV-ES的ECV304细胞可表达并分泌ES蛋白,表达高峰在感染后96h,表达量为96.93μg·L-1;感染后的ECV304细胞增殖受到抑制,流式细胞仪分析其周期中G0与G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例显著减少;MTT检测显示以感染复数为5×105vg.cell-1感染96h时对ECV304细胞增殖的抑制率最高(54.54±1.37)%。结论 rAAV-ES感染ECV304细胞后有高水平的ES蛋白表达并能显著抑制ECV304细胞的增殖。
- 汤明芳于健钟彦彦陆晓和
- 关键词：重组腺相关病毒内皮抑素基因脐静脉内皮细胞增生
- 准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎的临床分析及治疗被引量：4
- 2006年
- 目的:观察准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎的发病情况,总结采用唯地息凝胶治疗的效果,探讨其发病相关因素及防治方法。方法:所有患者2139眼,按术前有无角膜接触镜配戴史分为Ia组493眼(有角膜接触镜配戴史)与Ib组1646眼(无角膜接触镜配戴史),按术式分为IIa组1916眼(LASIK术后)与IIb组223眼(LASEK术后),比较其发病率,观察准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎的发生情况,发病者迅速、足量使用唯地息凝胶治疗,观察其疗效,分析该病变的临床特征,相关发病因素及防治措施。结果:Ia组与Ib组术后丝状角膜炎发病率分别为3.45%和1.76%,两者有显著差异(P<0.05);IIa组与IIb组术后丝状角膜炎发病率分别为1.93%和4.04%,两者有显著差异(P<0.05)。唯地息凝胶治疗准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎的平均疗程1.22±0.63d,随访6mo未见复发。结论:与准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎发生的相关因素包括:术前配戴角膜接触镜继发干眼及眼表炎症、术中角膜损伤、术后角膜上皮愈合及术后用药等。唯地息凝胶治疗准分子激光角膜屈光手术后丝状角膜炎,疗程短、效果显著。
- 罗航乐汤明芳张柳钟彦彦
- 关键词：准分子激光角膜屈光手术LASIKLASEK丝状角膜炎
- 兔眼前房积血并发高眼压时角膜的病理改变被引量：1
- 2010年
- 目的探讨实验性前房积血继发高眼压时角膜组织的病理改变。方法30只新西兰白兔随机分为3组各10只,每组随机一眼作为实验眼,另一眼作为对照眼;第一、二、三组实验眼前房内注射自血形成高眼压,维持时间分别为3、5、8d,对照眼做同样的操作,注射生理盐水。术后裂隙灯显微镜观察角膜情况,于第3、5、8d分别测量3组实验兔的实验眼及对照眼的角膜厚度;并取3组兔实验眼及对照眼角膜并分别进行光镜检查,观察前房积血形成高眼压的实验眼随着时间延长有无角膜血染发生;角膜基质水肿、弹力纤维变化、新生血管等情况;嗜酸细胞、纤维细胞、淋巴细胞、浆细胞变化情况,以及角膜各层病理变化与对照眼进行比较,结果用两个重复测量因素的方差分析进行角膜厚度的组间比较,采用SPSS13.0进行统计分析。结果动物模型成功建立,术后第三组角膜水肿最重,角膜厚度最大,差异有明显的统计学意义(P=0.000)。光学显微镜下可见角膜基质弹力纤维间隙增大,纤维扭曲变形很重。角膜边缘区可见新生血管长入,可见嗜酸细胞浸润,可见少量淋巴细胞及浆细胞、纤维细胞;三组均显示后半部分水肿较前半部分明显。结论实验性前房积血并发高眼压的角膜组织的病理结果显示:随着时间延长角膜水肿越来越重;前房积血并发高眼压8d角膜未出现血染,此时角膜后弹力纤维可见断裂现象,这预示:此时应积极处理高眼压及前房出血,若不积极治疗,可能会引起不可逆的病理改变。
- 王凤云陆晓和张彩霞白浪张静钟彦彦王双双
- 关键词：前房出血高眼压病理改变实验兔
- 蛋白芯片技术监测大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的发生被引量：1
- 2008年
- 目的利用蛋白质芯片技术双盲监测大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的发生。方法采用弱阳离子交换芯片（WCX2）结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术对穿透性角膜移植术后大鼠血清中表达的免疫排斥反应相关的低分子量差异蛋白进行筛选，并通过双盲法利用蛋白质芯片技术监测筛选结果。结果质荷比0-20000范围内，共检测到58个蛋白峰，其中6个蛋白质峰的表达有统计学意义。双盲法监测结果：血清中出现这6个蛋白质峰的大鼠角膜全部发生免疫排斥反应。结论蛋白芯片技术能够筛选出灵敏度和特异性好的差异表达蛋白，为角膜移植排斥反应病情的治疗监测提供依据。
- 周瑾陆晓和柯晓云汤明芳宫玉波袁伟钟彦彦
- 关键词：角膜移植免疫排斥反应SELDI双盲法
- 蛋白芯片技术快速筛选穿透性角膜移植大鼠血清中免疫排斥反应相关低相对分子质量差异蛋白
- 2008年
- 目的筛选穿透性角膜移植大鼠血清中免疫排斥反应相关的低相对分子质量差异蛋白。方法采用弱阳离子交换芯片,结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术,对穿透性角膜移植大鼠血清中表达的免疫排斥反应相关的低相对分子质量差异蛋白进行筛选,通过相应软件结合生物信息学方法进行初步分析。结果质荷比0～20000范围内,共检测到58个蛋白峰,其中6个蛋白质峰的表达有统计学意义。结论穿透性角膜移植术后发生免疫排斥反应与未发生免疫排斥反应的大鼠血清中低相对分子质量蛋白存在明显差异,为角膜移植排斥反应病情的治疗监测提供依据。
- 周瑾陆晓和宫玉波袁伟汤明芳钟彦彦
- 关键词：角膜移植免疫排斥反应差异蛋白
- 雷帕霉素滴眼剂抑制大鼠角膜血管新生:血管内皮生长因子及炎症因子的作用被引量：5
- 2010年
- 背景:雷帕霉素全身用药可明确抑制角膜移植后植片新生血管的生长,但雷帕霉素滴眼剂能否起到相同或者类似的作用尚有待验证。目的:观察雷帕霉素滴眼剂抑制大鼠角膜新生血管生长过程中血管内皮生长因子及炎症因子的作用。方法:角膜缝线法建立SD大鼠左眼角膜新生血管模型,以抽签法随机分为生理盐水对照组与雷帕霉素滴眼剂组。各组均术后第1天开始用药,4次/d,1滴/次。每日行裂隙灯显微镜检查,术后第3,7,14天测量角膜新生血管的长度,计算新生血管面积。14d后切取角膜行组织学检查,并采用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子以及白细胞介素2受体α的表达。结果与结论:生理盐水对照组不同时间点角膜新生血管面积均高于雷帕霉素滴眼剂组(P=0),说明雷帕霉素滴眼剂可抑制缝线后角膜新生血管的生长。与生理盐水对照组比较,雷帕霉素滴眼剂组角膜上皮层、浅基质层、新生血管内皮、角膜缝线处上皮以及浸润的炎性细胞内血管内皮生长因子及白细胞介素2受体α表达明显降低,病理切片上炎性细胞浸润减少。结果提示雷帕霉素滴眼剂抑制角膜新生血管生长,可能通过降低血管内皮生长因子的表达及抑制炎性细胞的分化浸润从而抑制新生血管的生长。
- 钟彦彦张海峰陆晓和
- 关键词：西罗莫司角膜新生血管血管内皮生长因子
- 缝线诱导大鼠角膜血管新生过程中环氧化酶2和基质金属蛋白酶2的表达被引量：1
- 2010年
- 背景:研究表明环氧化酶2和基质金属蛋白酶2在角膜新生血管的发生中起重要作用,但其具体机制及相互关系仍不明确。目的:观察环氧化酶2和基质金属蛋白酶2在缝线法诱导的大鼠角膜新生血管中的表达,并分析其相关性,探讨角膜新生血管形成的有关机制。方法:采用缝线法建立SD大鼠角膜新生血管模型,术后每日裂隙灯观察角膜新生血管的生长情况,并于1,4,7,14,21d取材,行免疫组化及RT-PCR检测环氧化酶2和基质金属蛋白酶2蛋白的分布及二者mRNA的相对表达量,并进行相关性分析。结果与结论:角膜缝线后三四天可见明显从角膜缘伸入角膜的毛刷状小血管,垂直角膜缘切线方向,角膜缝线处水肿;7d角膜新生血管生长旺盛,角膜水肿继续加重,14d新生血管延伸到达或超过缝线位置,分支密集并互相吻合形成袢状血管;21d角膜新生血管变细。免疫组化及RT-PCR显示环氧化酶2和基质金属蛋白酶2于缝线后表达逐渐增加,7d达高峰,以后随炎症细胞的减少而减弱,主要分布于炎症细胞胞质及新生血管内皮细胞,两种因子的表达在角膜新生血管中具有正相关性(r=0.981,P<0.05)。证实炎症相关的角膜新生血管中环氧化酶2和基质金属蛋白酶2的表达增加,并且与新生血管的发生、发展密切相关。
- 张静陆晓和张妍李祥钟彦彦张海峰
- 关键词：角膜新生血管环氧化酶2基质金属蛋白酶2
- 糖皮质激素对角膜移植术后大鼠角膜TLR2表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的检测大鼠角膜组织TLR2mRNA的表达,研究糖皮质激素对穿透角膜移植术后角膜TLR2表达的影响及对术后排斥反应的作用。方法实验动物分正常对照组(N)、同种同体角膜移植组(A)、同种异体角膜移植组(B)和同种异体角膜移植激素(典必殊滴眼液点术眼,每日2次)抗排斥组(C),A、B、C3组大鼠给予穿透角膜移植术,术后裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管并用排斥反应指数评价;分别于术后第5、7、9天取材,行组织病理学检查和实时荧光定量PCR检测,动态观察角膜组织中TLR2mRNA的表达。结果术后随时间变化角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊、新生血管生长。B组大鼠平均在穿透角膜移植术后7d发生排斥反应并获病理学支持;A组和C组大鼠术后排斥反应指数计分未达到诊断标准。术后3组手术干预组角膜TLR2mRNA的表达均增加,同种异体角膜移植组角膜TLR2mRNA的表达较同种同体角膜移植组显著增加,激素抗排斥组角膜TLR2mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论糖皮质激素可能通过抑制角膜TLR2的表达及其介导的信号转导,抑制排斥反应,对移植物起保护作用。
- 白浪陆晓和钟彦彦张静周瑾武海军
- 关键词：角膜糖皮质激素角膜移植免疫排斥反应
