闵敏
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 系统性红斑狼疮患者外周血CD19^+细胞数量的变化及p16 mRNA的表达
- 2013年
- 目的:检测系统性红斑狼疮患者外周血中CD19^+细胞数目的变化及p16 mRNA的表达。方法:采用免疫磁珠法分离SLE外周血CD19^+细胞并计数;分选出来的细胞提取RNA,应用实时定量RT-PCR方法检测CD19^+细胞中p16 mRNA表达水平。结果:SLE患者外周血中CD19^+细胞(66.23±4.455)较正常对照组(32.15±5.108)增加。SLE患者p16 mRNA在CD19^+细胞中的表达(47.3731±22.2939)比健康对照组(0.7276±0.1183)明显增加。结论:CD19^+细胞的数量及p16 mRNA的异常在SLE的发病中起一定作用。
- 马红许辉张雪静闵敏李遇梅
- 关键词：P16MRNA系统性红斑狼疮CD19+
- 尖锐湿疣患者γ-干扰素及白细胞介素-17水平检测被引量：3
- 2014年
- 目的探讨尖锐湿疣(CA)患者CD4+T淋巴细胞、皮损组织及血清中白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)的水平,以及其在CA免疫发病机制中的作用。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20例CA患者CD4+T淋巴细胞、皮损组织中及血清IL-17、IFN-γ的水平,并与20名正常人作比较。结果 CA患者CD4+T淋巴细胞中IL-17高于正常对照组(P<0.01),IFN-γ水平也高于正常对照组(P<0.01);皮损组织中IL-17高于正常对照组(P<0.01),同样IFN-γ水平也高于正常对照组(P<0.01);血清中IFN-γ的水平高于对照组(P<0.05),而IL-17与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论人乳头瘤病毒感染可引起患者细胞免疫功能异常,IFN-γ、IL-17在CA发病机制中可能起重要作用。
- 许辉马红闵敏顾文涛李遇梅
- 关键词：尖锐湿疣白细胞介素17Γ-干扰素IL-17IFN-Γ
- 人脂肪间充质干细胞体外向黑素细胞分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的 建立体外诱导人脂肪间充质干细胞（hADSC）向黑素细胞分化的方法。 方法 由人皮下脂肪分离培养获得hADSC，流式细胞仪检测细胞表型，成骨成脂分化证明分化潜能。将干细胞生长因子（SCF）、内皮素3 （EDN-3）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等加到条件培养基中，促使第5代hADSC向黑素细胞方向诱导，诱导至第10周。未诱导组为正常对照组。使用实时荧光定量PCR检测黑素相关基因小眼畸形转录因子（MITF），酪氨酸激酶受体c-Kit（KIT），多巴色素异构酶（DCT），酪氨酸酶（TYR），酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1），性别决定区域相关转录因子10（SOX10） mRNA的表达量，统计学分析采用单因素方差分析及LSD-t检验。诱导结束后，通过免疫细胞化学法、细胞免疫荧光法进行鉴定。 结果 流式细胞仪显示分离培养获得的hADSC高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166，阳性率均在95%以上；低表达或不表达CD31、CD34、CD45，人白细胞DR抗原（HLA-DR）。成骨成脂分化结果显示hADSC具有分化潜能。实时荧光定量PCR结果显示，诱导10周后，MITF、KIT、DCT、TYR、TYRP1、SOX10 mRNA的表达水平分别为0.325 ± 0.012，0.042 ± 0.006，0.046 ± 0.013，0.036 ± 0.005，0.041 ± 0.003，0.225 ± 0.014，与诱导0周组相比，均有上调（P 〈 0.05）。诱导结束后，免疫细胞化学MITF、HMB45染色阳性，细胞免疫荧光TYRP1、S100阳性表达。 结论 由人脂肪间充质干细胞诱导所得细胞具有一定的黑素细胞生物学特性。
- 闵敏张雪静马红许辉李遇梅
- 关键词：分化黑素细胞
- 尖锐湿疣皮损中p16基因启动子区高甲基化及其mRNA的表达被引量：1
- 2015年
- 目的:明确尖锐湿疣组织中p16基因启动子区高甲基化与p16 mRNA表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR技术检测30例尖锐湿疣组织及20名正常对照组织p16基因启动子区CpG岛甲基化状态,用RT-PCR法检测p16 mRNA的表达。结果:尖锐湿疣组织p16基因启动子高甲基化率为26.67%(8/30),正常对照组高甲基化率为0,差异具有统计学意义(P<0.05)。高甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达高于未甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达和高于正常对照组织p16mRNA的表达。结论:尖锐湿疣组织皮损中p16基因启动子区甲基化不导致p16 mRNA表达的缺失。
- 许辉马红闵敏顾文涛李遇梅
- 关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒甲基化P16
- 人脂肪间充质干细胞的原代培养及体外成骨成脂诱导分化被引量：8
- 2013年
- 目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性。初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制。方法 :剖宫产手术获得腹部皮下脂肪,0.15%Ⅰ型胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞并进行体外培养。行MTT细胞增殖实验绘制增殖曲线,使用流式细胞及细胞免疫荧光技术检测细胞表面抗原,行成骨成脂分化鉴定其分化潜能。通过RT-PCR技术检测成骨成脂过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)和骨桥蛋白mRNA表达情况。结果 :通过分离培养,获得了大量旋涡状生长的人脂肪间充质干细胞。MTT法显示细胞增殖能力强。流式细胞鉴定结果显示,CD29、CD73、CD105、CD166高表达,CD31、CD34、CD45、HLA-DR低表达。细胞免疫荧光结果与之相符。hADSCs在特定诱导条件下,具有成骨成脂分化潜能。在成骨分化过程中同时伴有成脂发生。RT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂诱导组PPARγ-2 mRNA有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,成骨诱导组骨桥蛋白,PPARγ-2 mRNA均有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:建立了一种分离培养hADSCs简单可靠的方法。获得的细胞具有贴壁生长、增殖活性强、干细胞表型以及多向分化等特征。hADSCs体外成骨过程中,三酰甘油的形成对成骨具有一定的促进作用。
- 闵敏张雪静马红许辉李遇梅
- 关键词：成骨分化成脂分化
