陈义
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 脐带间充质干细胞培养及体外重建角膜后板层的初步研究
- 目的(1)应用改良及传统培养方法体外培养兔角膜基质细胞和人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs),观察其生物学特性,为下一步角膜后板层...
- 陈义
- 关键词：脐带间充质干细胞角膜基质
- 文献传递
- 人骨髓间充质干细胞分化为上皮样细胞的初步研究被引量：11
- 2010年
- 目的 应用猪板层角膜做载体将人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC）跨胚层诱导为上皮样细胞,甚至角膜上皮样细胞,初步探讨hMSC作为构建组织工程角膜种子细胞的可行性.方法 实验研究.用密度梯度离心培养技术结合贴壁培养法分离纯化hMSC并传代,对体外培养的hMSC进行免疫表型鉴定.将传代后的hMSC接种于去上皮的猪角膜基质片前弹力层表面培养诱导分化,免疫荧光检测角膜上皮细胞标志物角蛋白12（CK12）以及角膜缘干细胞标记物ABCG2和CK19的表达.运用体外培养的方法使种植在前弹力层表面的细胞复层化.待细胞融合形成单层后,置入插入式培养皿中进行气液界面培养.培养4周后进行HE染色及免疫组织化学检测,光镜下观察其复层情况.结果 获得的hMSC可以在体外培养扩增,表现出很强的增殖潜能.流式细胞仪示：培养的hMSC CD45阳性率为0.06%,CD34为0.41%,CD44为86.43%,CD29为85.72%,CD105为90.72%.诱导4周后部分细胞表达CK12和CK19,不表达ABCG2.运用气液界面培养法进行体外复层的结果显示可以形成1～2层的上皮样细胞,并很可能为角膜上皮样细胞.结论 在本实验的诱导条件下,hMSC可以分化为上皮样细胞,并很可能为角膜上皮样细胞,hMSC有可能作为组织工程技术角膜上皮重建的种子细胞的选择.
- 侯光辉叶楠吴静徐锦堂施文建陈义刘小浩张泽华
- 关键词：间质干细胞细胞分化角膜上皮样细胞
- 人骨髓间充质干细胞重建角膜上皮的初步研究
- 叶楠侯光辉吴静徐锦堂施文建陈义陈建苏陈剑
- 培养兔角膜基质细胞的一种新方法——悬浮基质片法被引量：2
- 2010年
- 目的寻找一种新的、简易的兔角膜基质细胞培养方法。方法去除兔角膜上皮层、后弹力层及内皮细胞层,将处理后剩下的全层基质(简称基质片)置于6孔板中,分别进行悬浮培养(悬浮基质片法)、组织块贴壁培养法培养、Ⅱ型胶原蛋白酶消化法培养。观察所培养细胞的体外生长特性,并进行波形蛋白免疫组化鉴定。结果采用悬浮基质片法可成功培养出兔角膜基质细胞,细胞具有长短不等的数个突起,呈梭形、不规则三角形或纺锤形,核椭圆、居中,胞浆清亮,未见其他细胞混杂其中。悬浮培养8～10d贴壁,贴壁后约5d基本融合。其生物学特性与组织块贴壁培养法及Ⅱ型胶原蛋白酶消化法培养的细胞一致。波形蛋白免疫组化染色显示3种方法均为阳性。结论悬浮基质片法培养角膜基质细胞,不需用酶,且具有简便、可靠、不易污染、成功率高等明显优势,为角膜基质细胞的培养提供了新的途径,值得推广。
- 陈义侯光辉吴静徐锦堂
- 关键词：角膜基质细胞组织工程角膜
