- 鱼藤酮对星形胶质细胞谷氨酸摄取功能的影响
- 2009年
- 目的研究鱼藤酮对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运功能的影响。方法应用HPLC荧光法检测鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度,同位素标记法检测Glu摄取能力,采用RT-PCR与Western blot技术观察谷氨酸转运体基因及蛋白表达。结果鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度明显升高,Glu摄取能力显著降低,谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter,GLAST)基因和蛋白表达均明显降低,而谷氨酸转运体-1(glutamatetransporter-1,GLT-1)蛋白表达升高。结论鱼藤酮可显著降低星形胶质细胞谷氨酸摄取功能,引起胞外Glu浓度升高;GLAST表达下调可能是鱼藤酮诱导胞外谷氨酸含量增加的主要原因之一,而GLT-1上调可能为神经细胞自我保护机制,以限制谷氨酸的神经毒作用。
- 刘辉李云鹏陈峻峰董兆君
- 关键词：鱼藤酮星形胶质细胞
- 氧化应激对鱼藤酮PC12细胞中的毒性作用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨氧化应激在鱼藤酮多巴胺能神经元PC12细胞中的毒性作用。方法用高分化的PC12细胞作为多巴胺能神经元的细胞模型,经不同浓度的鱼藤酮处理,观察细胞形态及其超微结构,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性和增殖抑制及细胞代谢状态,生化分析法检测SOD活力、MDA含量,特异性DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS水平。结果经鱼藤酮处理24 h后PC12细胞突起样结构消失,细胞体积变小、形态变圆,部分细胞呈悬浮状态;细胞线粒体代谢和超微结构发生改变;PC12细胞增殖抑制,细胞活性降低;细胞内的SOD活力下降,MDA含量增高;荧光探针标记显示PC12细胞荧光强度增加,细胞内ROS含量增加。结论鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,可抑制细胞增殖,影响线粒体代谢,氧化应激可能在鱼藤酮的多巴胺神经元毒性机制中起作用。
- 赛燕吴强陈峻峰乐卫东董兆君
- 关键词：鱼藤酮PC12细胞氧化性应激
- 鱼藤酮对PC12细胞凋亡及ERK1/2蛋白表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察鱼藤酮对PC12细胞凋亡以及细胞外信号调节酶1和2(ERK1/2)蛋白表达的影响,以深入探讨ERK1/2蛋白表达与鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡之间的关系。方法通过建立PC12细胞鱼藤酮染毒模型,光镜下观察鱼藤酮对PC12细胞形态的影响;流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率的改变;Western蛋白印迹法和免疫组化法检测PC12细胞ERK1/2蛋白表达及定位情况。结果鱼藤酮处理24h后PC12细胞形态明显改变且凋亡率增加,20μmol/LMEK抑制剂PD98059预处理1h与单纯鱼藤酮染毒比较凋亡率没有显著性改变;磷酸化ERK1/2蛋白表达量随着鱼藤酮剂量的加大而增高,且活化的ERK1/2蛋白主要集中在胞浆内表达。结论鱼藤酮体外作用可以诱导PC12细胞凋亡以及ERK1/2蛋白磷酸化表达增强。
- 陈峻峰董兆君吴强
- 关键词：鱼藤酮PC12细胞细胞凋亡细胞外信号调节MAP激酶类
- 鱼藤酮对PC12细胞多巴胺相关转运体的影响
- 2009年
- 探讨鱼藤酮对PC12细胞多巴胺转运体(DAT)和突触囊泡单胺转运体2(VMAT2)的影响。我们将PC12细胞经不同浓度的鱼藤酮处理24h后,利用HE染色观察PC12细胞的形态学变化;利用免疫组织化学法观察不同浓度的鱼藤酮对PC12细胞酪氨酸羟化酶(TH),DAT和VMAT2蛋白表达的影响;利用RT-PCR法检测鱼藤酮对PC12细胞DAT和VMAT2基因表达的影响;通过生化实验检测Na+/K+-ATP酶活性。实验结果显示:鱼藤酮浓度为1.0mmol/L时,PC12细胞出现了明显的形态学改变,胞浆染色不均、胞体呈圆形、细胞核形状不规则、核浆比例增加;TH蛋白阳性细胞数量减少;DAT蛋白和基因表达增加;VMAT2蛋白和基因表达降低,与对照组比较均具有统计学意义(P<0.05),且随着鱼藤酮浓度的增加,变化趋势更为明显。鱼藤酮浓度为1.0mmol/L时,Na+/K+-ATP酶活力与对照组比较显著降低(P<0.05)。因此,DAT和VMAT2的表达异常可能参与了毒性作用。
- 赛燕陈峻峰吴强曹家洪李云鹏董兆君
- 关键词：鱼藤酮PC12细胞多巴胺转运体
- 鱼藤酮对大鼠海马MAPK//ERK信号传导通路调控机制的研究
- 鱼藤酮是一种应用广泛的农业杀虫剂,能选择性地结合并抑制线粒体复合物Ⅰ,从而破坏细胞呼吸链的正常功能。流行病学资料显示,长期低剂量接触鱼藤酮的人群帕金森病的发病机率高于未暴露人群。动物实验进一步证实,鱼藤酮能作用于黑质-纹...
- 陈峻峰
- 关键词：鱼藤酮磷酸化
- 文献传递
- Fluoro-JadeB染色法显示鱼藤酮致大鼠纹状体和海马神经元退行性病变
- 2007年
- 目的探讨鱼藤酮慢性中毒致大鼠纹状体及海马神经元退行性病变情况。方法采用微量渗透泵背部植埋的方法,建立大鼠鱼藤酮慢性中毒模型,观察大鼠一般情况,利用Fluoro-jadeB复合荧光尼氏双染法检测纹状体及海马变性细胞和正常细胞的改变情况。结果微量渗透泵植埋后鱼藤酮中毒大鼠出现明显的类似于帕金森病的症状,取脑组织染色,可见纹状体和海马内出现大量的阳性变性细胞,阴性对照组未出现相关改变。结论和传统的鱼藤酮皮下注射法比较,微量渗透泵背部植埋法是建立鱼藤酮慢性中毒模型较为理想的方法。鱼藤酮对纹状体和海马神经元具有显著的损伤作用,可以引起神经细胞发生退行性病变。
- 陈峻峰吴强刘辉董兆君
- 关键词：鱼藤酮纹状体神经元变性
- 鱼藤酮对大鼠主要器官毒性作用特点研究被引量：1
- 2009年
- 陈峻峰吴强董兆君
- 关键词：鱼藤酮线粒体帕金森病
