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热休克蛋白65及其融合蛋白Hsp65-6×P277的分离纯化和稳定性研究(英文)被引量：6: 2007年; 来源于牛分枝杆菌的热休克蛋白65(Hsp65)在没有佐剂的情况下可作为载体分子将抗原表位递呈给免疫系统。热休克蛋白具有蛋白酶的催化活性,容易发生自溶而降解,这制约了基于Hsp65疫苗的研究。该研究中,建立了纯化Hsp65及其融合蛋白Hsp65-6×P277(P277为来源于人热休克蛋白60的肽段,线性重复6次)的方法。Hsp65与Hsp65-6×P277以可溶形式表达于大肠杆菌。在低温及添加EDTA的条件下经细胞裂解、硫酸铵沉淀及阴离子交换树脂等纯化方法,可得到电泳纯的目的蛋白。用纯化的融合蛋白Hsp65-6×P277免疫小鼠,可激发机体产生强烈的免疫应答,该融合蛋白有希望作为免佐剂的糖尿病疫苗加以进一步研究开发。; 陈庆梅吴国君吴洁李泰明曹荣月刘景晶; 关键词：融合蛋白纯化降解

一种免佐剂具有治疗动脉粥样硬化作用的免疫调节剂: 本发明提供了一种能用于治疗动脉粥样硬化的免疫调节剂。针对抗原多肽的弱免疫原性，将源于人HSP60的一段抗原表位多肽(SEQ ID NO.1)插入霍乱毒素B亚单位(Cholera toxinB subunit，CTB)的下...; 刘景晶李建平熊祺焱陈庆梅吴洁曹荣月; 文献传递

一种免佐剂具有防治人胰岛素依赖型糖尿病作用的免疫调节剂: 本发明提供了一种能用于预防和治疗胰岛素依赖型糖尿病的免疫调节剂。针对抗原多肽的弱免疫原性，将抗原表位多肽基因(源于人HSP60的一段抗原表位p277)六次重复串联反复插入源于牛分枝杆菌(Mycobacterium bov...; 刘景晶金亮王宇朱爱华陈庆梅李建平熊祺琰曹荣月吴洁; 文献传递

抗阿尔茨海默病重组蛋白疫苗的克隆、表达和免疫学鉴定被引量：1: 2006年; 目的:制备抗阿尔茨海默病的重组蛋白疫苗。方法:将β淀粉样蛋白42肽N端表位Aβ1-15基因,通过来源于破伤风毒素的辅助性T细胞表位多肽TTP基因片段,与大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ(AnsB)基因的C末端融合,构建表达质粒pET28 a-AnsB-TTP-Aβ1-15。转化至E.coliBL-21,TBYE培养基(Kanr)培养,乳糖诱导表达,通过渗透休克、DEAE52-cellu lose和Sepha-dex G-100柱层析制备融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15,通过酶活力和抗原性测定鉴定融合蛋白。结果:获得的融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15保留了AnsB 71%的催化活力,具有与抗Aβ1-42抗体特异性结合的能力。结论:获得了在AnsB多聚酶分子表面呈现有Aβ1-15表位的融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15,为抗阿尔茨海默病疫苗研究奠定了基础。; 林洁刘景晶陈庆梅施小明; 关键词：阿尔茨海默病重组疫苗表位抗原性

一种具有防治2型糖尿病作用的免疫调节剂: 本发明提供了一种能用于预防和治疗2型糖尿病的免疫调节剂。该免疫调节剂是来源于牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)的热休克蛋白Hsp65(SEQ ID NO.1)。该免疫调节剂在不添加佐剂的条件下，通过粘膜...; 刘景晶陈庆梅李建平熊祺琰孙云霄李祝方吴洁曹荣月; 文献传递

霍乱毒素B亚单位与p277融合基因在大肠杆菌中表达及免疫分析被引量：6: 2007年; 为了增强多肽表位的免疫原性,构建了霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)和p277的融合基因CTB-p277,将该融合基因克隆到pET28a(+)中,获得原核表达载体pET28a-CTB-p277;并将该质粒转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中;重组菌株经2%的乳糖诱导5 h后的表达产物用12%的SDS-PAGE分析表明可以表达融合蛋白,融合蛋白占全菌蛋白约40%,且主要以包含体的形式存在。包含体经洗涤、裂解,用DEAE纤维素离子交换纯化,可以获得99.1%的重组蛋白。重组蛋白的包含体经复性后,在体外可以自组装成五聚体。重组蛋白免疫KK-Ay小鼠后,ELISA的分析表明可以产生抗p277的抗体。血糖和体重的测定结果显示,给药组小鼠的血糖有明显的降低,体重也有相应的减轻。同时GM1-ELISA的检测表明,CTB-p277在体外可以和神经节苷脂GM1(Monosialoganglioside)特异结合,具有生物活性。; 李建平熊祺琰陈庆梅吴洁曹荣月刘景晶; 关键词：霍乱毒素B亚单位包含体免疫分析神经节苷脂GM1

基于血管紧张素Ⅱ的肿瘤多肽疫苗: 本发明提供一种基于血管紧张素II的肿瘤多肽疫苗。该肿瘤多肽疫苗以血管紧张素II的八肽(SEQ ID NO.1)为靶抗原表位设计。该多肽疫苗免疫机体后能诱发机体产生特异性的抗血管紧张素II抗体。在医学领域中，该多肽疫苗可用...; 刘景晶谢燕飞吴国君吴若飞陈庆梅吴洁曹荣月; 文献传递

一种快速提取抗胃泌素释放肽肿瘤疫苗的制备工艺: 本发明属于医药生物技术领域，公开了一种快速高效地从大肠杆菌中提取抗胃泌素释放肽肿瘤疫苗的制备工艺。将表达目的蛋白的重组工程菌裂解以后，用一步硫酸铵沉淀法从裂解上清液中获得了高纯度的目的蛋白，既避免了蛋白在多步纯化过程中的...; 刘景晶吴国君欧阳可栋谢燕飞过为李建平陈庆梅吴洁曹荣月; 文献传递

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陈庆梅