陈晓光
- 作品数:281 被引量:969H指数:16
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金World Health Organization更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定被引量:4
- 2005年
- 目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,SDS-PAGE分析和鉴定该基因的表达水平、表达产物的可溶性及其相对分子质量,Western-blot分析表达产物的免疫反应性。结果该基因在原核表达系统中经诱导,得到了Mr31000的可溶性融合表达产物。经Ni-NTA纯化,纯度可达90%以上。免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别。结论弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值。
- 杨培梁陈晓光王元占李华周晓红吴焜言慧
- 关键词:弓形虫多表位大肠杆菌免疫反应性
- 应用抗SjP38的单克隆抗体建立血吸虫感染的胶体金免疫层析检测体系被引量:10
- 2005年
- 目的建立一种检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析方法。方法将已获得的单抗用protein-G亲和层析纯化,通过间接ELISA测定每株单抗的亲和常数。按改良过碘酸钠标记法,8株单抗标记辣根过氧化物酶(HRP)后进行不同株单抗配对,选出亲和力高、稳定性强的单抗配对组合。胶体金标记4株抗体,选择最佳反应模式,建立胶体金免疫层析方法,并对弓形虫感染鼠血样、血吸虫感染前和感染后2、3、4、5、6周的鼠血样进行检测。结果8株抗SjP38单克隆抗体经纯化后纯度达95%以上,其亲和常数介于1×10-8mol/L^2.82×10-10mol/L。根据配对实验,1A6与9H6、1A6与9G7、6G12与9H6、6G12与9G7以及9H6与9G7为最佳配对组合。标记1A6、6G12、9H6与9G7这4株单抗后筛选出最佳反应模式,即以9G7为包被抗体,包被浓度为2.5μg/μl;当1A6为金标抗体,抗体稀释浓度为1:4时,检测效果最佳。对rSjP38的最低检测量为12.5ng/ml。抗检测感染3、4、5、6周小鼠血清,阳性率分别为40%、50%、60%、80%,而弓形虫感染鼠和血吸虫感染前小鼠血样的检测结果为100%阴性。结论通过抗体配对、最佳包被量和金标抗体稀释倍数条件的优化,建立了快速、简便、特异的胶体金免疫层析方法,自制的rSjP38试纸条能检测血吸虫早期感染鼠血清中的循环抗原SjP38。
- 吴锦雅杨培良周晓红李华陈晓光
- 关键词:血吸虫P38单克隆抗体
- 刚地弓形虫缓殖子期特异性抗原BSR4的重组表达和免疫反应性分析
- 目的:克隆表达刚地弓形虫ME49株BSR4基因,并检测其免疫反应性。方法:提取弓形虫ME49株速殖子DNA;根据弓形虫ME49株BSR4基因设计引物,利用PCR扩增得到BSR4基因产物、扩增产物经双酶切后分别连接入原核表...
- 罗蓝妮阮嘉雯吴焜陈晓光
- 文献传递
- 白纹伊蚊全球迁徙扩张的现状与展望
- 白纹伊蚊又称亚洲虎纹,是当今世界上最具侵袭性的蚊种,更是近期引起中非、意大利等地的基孔肯雅热的罪魁祸首。近30年来白纹伊蚊已经从其发源地亚洲东南部地区扩张至全球除南极洲以外的四个大洲,在多个地区已经替代埃及伊蚊成为当地的...
- 徐家宝陈晓光
- 关键词:白纹伊蚊物种入侵虫媒传染病
- 文献传递
- 卵黄蛋白原启动子驱动的防御素基因在转基因按蚊中的高效可调控性表达
- 2007年
- 遗传修饰蚊虫,使其不传播疾病或使蚊虫种群密度下降,是一种控制蚊媒传染病的新策略.该策略实施的前提是能够改造蚊虫的基因组,使得效应分子在适宜启动子驱动下,在转基因蚊中高效特异表达.本研究旨在评价冈比亚按蚊卵黄蛋白原启动子驱动的中华按蚊防御素基因在转基因斯氏按蚊中的表达效果.克隆冈比亚按蚊卵黄蛋白原启动子序列,并将其与已克隆的中华按蚊防御素基因顺式插入穿梭载体pSLFa,然后再插入转化载体pBac[3xP3-DsRedafm]的AscⅠ位点;将重组质粒pBac[3xP3DsRed-AgVgT2-DefA]和帮助质粒phsp-pBacDNA显微注射入斯氏按蚊的虫卵.通过观察G1代幼虫眼部的特异荧光筛选出两株转基因阳性品系;Southernblot证明,防御素基因的表达元件以单拷贝的形式插入到蚊基因组中;RT-PCR分析显示,防御素基因在吸血后雌蚊的脂肪体中得到了特异高效表达,而且防御素的表达比较内源性卵黄蛋白原能维持较长的时间,因此多次吸血后的防御素表达呈现出可调性非周期型,这对其发挥抗病原作用非常重要.结果表明,按蚊属蚊虫的卵黄蛋白原启动子和防御素基因在不同种按蚊中功能保守,可以作为转基因抗疟研究中的候选调控分子和功能分子.
- 陈晓光张亚晶郑学礼王春梅
- 关键词:卵黄蛋白原启动子防御素转基因按蚊
- 易更改型《医学寄生虫学》教学课件的制作
- 2008年
- 介绍了如何在教学用PowerPoint基础上,利用FrontPage等工具制作具有系统性、易更改性、实用性和操作简便等特点的易更改型《医学寄生虫学》教学课件。该课件不仅适合不同教学风格的教师授课,便于随时将学科的新进展纳入教学中。同时适合学生的自学及其交互性学习。
- 李华邱秋王顺宏刘昌政陈晓光
- 关键词:医学寄生虫学教学课件
- 沙门菌grOEL基因序列在系统发育分析和PCR-限制性片段多态性分析鉴定中的应用
- 2009年
- 目的探讨grOEL基因序列在沙门菌进化分析和分型鉴定中的应用。方法对8种血清群的沙门菌菌株进行PCR扩增、测序,然后用分子生物学软件Bioedit与DNAstar进行序列分析,同时用PCR-限制性片段多态性分析(RFLP)技术进行分型鉴定。结果8种沙门菌血清群grOEL基因保守序列与变异序列呈锯齿状排列,其grOEL氨基酸系统发育树与grOEL基因系统发育树结果不完全相同,但O8、O9、O10之间亲缘关系最近,PCR-RFLP分析有5种模式图。结论grOEL基因序列在沙门菌系统发育中可作为遗传标记,同时也可作为分型鉴定的靶序列。
- 胡玉山刘俊华庞杏林陈守义陈晓光
- 关键词:GROEL系统发育
- 白纹伊蚊滞育研究进展
- 白纹伊蚊是登革热等的重要传病媒介,亦是最具生物入侵能力的蚊媒,其在全球的快速播散和定殖,为登革病毒等的迅速扩延提供了必要条件,白纹伊蚊的滞育为其适应不同气候地理条件提供了重要的生物学基础,本文综述了白纹伊蚊滞育及其相关机...
- 周晓红夏丹陈晓光
- 关键词:白纹伊蚊滞育光周期
- 文献传递
- 广州管圆线虫幼虫cDNA文库的构建及其表达模式与成虫表达模式的EST分析被引量:7
- 2005年
- 从感染广州管圆线虫3周的大鼠脑部挑取幼虫,提取其总RNA ,运用“SMARTcDNA文库构建试剂盒”构建其cDNA文库。分别将成虫和幼虫cDNA文库中的噬菌体克隆转化成噬菌粒,用5′端测序引物进行测序。利用BLAST程序对获取的EST从核苷酸和氨基酸水平进行同源性搜索。结果显示:所建文库的初始滴度为2 19×10 .6 pfu mL ,经1次扩增后的滴度为1. 0×10 1 0 pfu mL ,插入子的平均长度为1. 2kb ,重组率为97 .3%。从成虫的cDNA文库中得到6 4个EST ,其中有意义的EST有5 4个,占82 . 8% ;无意义的EST有10个,占17. 2 %。6 4个成虫EST序列中,rRNA基因4 9个,占总EST数的76 6 %。从幼虫的cDNA文库中共得到10 6个EST ,其中有意义的EST有91个,占85 . 8% ;无意义的EST有15个,占14 . 2 %。10 6个幼虫EST序列中rRNA基因78个,占总EST数的73. 6 %。本研究首次成功构建了广州管圆线虫幼虫的cDNA文库,EST分析显示广州管圆线虫幼虫和成虫基因表达谱中rRNA基因均占大多数。
- 赵醒村彭鸿娟陈晓光李华沈浩贤
- 关键词:广州管圆线虫幼虫CDNA文库基因表达模式
- 一种用于白纹伊蚊野外蚊卵收集的诱卵器
- 本实用新型公开了一种用于白纹伊蚊野外蚊卵收集的诱卵器,包括桶体,桶口敞开,还包括诱卵载体和水,所述水容纳在所述桶体中,所述诱卵载体为沿所述桶体内壁设置的环形体,且漂浮于所述桶体内的水面上。白纹伊蚊喜好沿水面边缘产卵,本实...
- 郭祥胡甜周晓红陈晓光
- 文献传递