韩波
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞抑制角膜移植排斥反应的机制研究被引量：8
- 2007年
- 目的研究CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞(DC)抑制角膜移植排斥反应的机制。方法采用脂质体转染法将质粒CTLA4Ig转入DC,用RT-PCR检测转染前后DC中吲哚胺2,3二氧化酶(IDO)的变化,CCK8检测CTLA4Ig-DC对同种异体T细胞的增生的影响,用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测L-色氨酸对CTLA4-DC功能的影响,建立大鼠同种异体角膜移植模型,分别在术后注入DC和DC+L-色氨酸于受体体内,观察疗效。结果转染CTLA4Ig后促进DC上IDO的表达,CTLA4-DC在体外能诱导同种异体T细胞凋亡,而L-色氨酸能有效拮抗CTLA4-DC的功能,动物实验中DC+L-色氨酸组大鼠角膜植片的存活时间较DC组缩短(P<0.01),且颌下淋巴结内未见明显T细胞凋亡。结论CTLA4-DC可能通过降低局部色氨酸浓度,从而延长角膜植片的存活时间。
- 韩波胡燕华
- 关键词：角膜移植
- 地塞米松对牛眼小梁水通道蛋白表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的观察地塞米松对牛眼小梁细胞的损伤使其水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)表达的影响。方法体外培养牛眼小梁细胞,取第4代细胞鉴定后用于实验。应用浓度为5,25,50,250μg/L地塞米松的培养液培养7天,通过WesternBlot方法检测培养的牛眼小梁细胞在不同浓度地塞米松作用下AQP-1的蛋白表达水平。结果牛眼小梁细胞可见AQP-1蛋白条带表达,未经地塞米松作用的AQP-1蛋白条带表达灰度值为102.87±11.73。在浓度为5,25,50,250μg/L地塞米松的培养液培养7天后AQP-1蛋白条带表达灰度值分别为111.64±13.32,115.31±9.41,121.39±9.81,129.42±13.52。当地塞米松浓度≥25μg/L时,AQP-1表达出现抑制作用(P<0.05)。结论地塞米松使培养的牛眼小梁细胞AQP-1的表达减少,这可能是皮质类固醇性青光眼房水流出阻力增加的原因之一。
- 席祖莲熊新春张海江苗娟韩波胡义珍
- 关键词：地塞米松小梁细胞水通道蛋白-1
- 高表达吲哚胺2,3-二氧化酶的树突状细胞对角膜植片存活时间的影响被引量：2
- 2007年
- 目的研究高表达吲哚胺2,3-二氧化酶(in-doleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的树突状细胞(dendritic cells,DC)对角膜植片存活时间的影响。方法采用脂质体转染的方法将质粒CTLA4Ig转入F344大鼠(供体)DC,用荧光显微镜观察目的基因的表达,采用RT-PCR方法检测转染前后DC中IDO mRNA的表达变化,应用流式细胞仪检测转染前后不同时间的DC对同种异体T细胞的影响。以F344大鼠为供体、Lewis大鼠为受体建立大鼠同种异体角膜移植模型,将基因修饰后高表达IDO的DC在术后立即注入Lewis大鼠体内(实验组),注射转染前DC的受体为对照组。用裂隙灯观察角膜植片的存活情况,术后第7天用八肽胆囊收缩素测定受体鼠T淋巴细胞对供体抗原的反应。结果转染CTLA4Ig促进了树突状细胞IDO的表达(P<0.05),并且转染后48h的DC能显著引起T细胞凋亡(P<0.05),注射高表达IDO的DC能明显延长角膜植片的存活时间(P<0.01),治疗组Lewis大鼠T淋巴细胞对供体的抗原刺激的反应明显低于对照组(P<0.05)。结论高表达IDO的供体DC能特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,明显延长角膜植片存活时间。
- 韩波胡燕华
- 关键词：吲哚胺2,3-二氧化酶树突状细胞
- 体外培养的小梁细胞表达水通道蛋白-1被引量：1
- 2006年
- 目的观察体外培养条件下的牛眼小梁细胞(bovine trabecular meshwork cell,BTMC)是否表达水通道蛋白-1(Aquaporin-1,AQP-1)。方法采用免疫组织化学方法检测AQP-1在BTMC上的表达,并进行半定量分析。结果正常BTMC可见AQP-1蛋白表达,其灰度值为:167.94±1.18;阴性对照为:195.64±1.62,统计学分析其差异具有显著性(P<0.05)。结论在体外培养条件下,BTMC表达AQP-1,这有助于在体外条件下研究房水流出阻力、并探讨青光眼的药物治疗。
- 熊新春席祖莲张海江苗娟韩波胡义珍
- 关键词：小梁细胞水通道蛋白-1青光眼
- 基因修饰后树突状细胞吲哚胺2,3二氧化酶表达变化及其对T细胞增殖的影响
- 2009年
- 背景:研究表明,吲哚胺2,3二氧化酶的表达可以降低机体的免疫应答反应,保护细胞和组织移植物,参与同种异体移植免疫耐受。细胞毒T细胞相关抗原4可以抑制T细胞的活化,在维持周边免疫耐受的过程中起着关键性的作用,但其作用机制尚不清楚。目的:观察转染细胞毒T细胞相关抗原4基因前后树突状细胞上吲哚胺2,3二氧化酶表达水平及其活性对T淋巴细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2005-09/2007-02在华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科实验室和眼科实验室完成。材料:成年雌性Lewis大鼠和F344大鼠购自北京维通利华实验动物种子中心,体质量180～200g。方法:采用脂质体转染的方法将质粒pG/细胞毒T细胞相关抗原4转入F344大鼠髓源性树突状细胞中,将转染前、转然后24,48,72h树突状细胞分为4组,反转录-聚合酶链反应检测转染前后骨髓源树突状细胞中吲哚胺2,3二氧化酶mRNA的表达,反相高效液相色谱法检测吲哚胺2,3二氧化酶活性。以Lewis大鼠T淋巴细胞为反应细胞,丝裂霉素C灭活的转染前后不同时间F344大鼠骨髓源树突状细胞为刺激细胞建立混合淋巴细胞培养体系。有或无L-色氨酸存在下,CCK8试剂盒检测T淋巴细胞增殖率,AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡。主要观察指标:①树突状细胞吲哚胺2,3二氧化酶mRNA的表达及吲哚胺2,3二氧化酶活性。②混合淋巴细胞培养CCK8及AnnexinV-FITC细胞凋亡检测结果。结果:转染细胞毒T细胞相关抗原4后树突状细胞中吲哚胺2,3二氧化酶的表达较转染前高(P<0.01),且转染后48h树突状细胞的吲哚胺2,3二氧化酶活性最高(P<0.01)。高表达吲哚胺2,3二氧化酶的树突状细胞在体外能诱导同种异体T细胞凋亡,抑制T细胞增殖,混合淋巴细胞培养体系中加入L-色氨酸后T淋巴细胞的凋亡率明显下降(P<0.01)。结论:树�
- 韩波胡燕华田元李宛
- 关键词：T淋巴细胞树突状细胞L-色氨酸
