公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

绵羊原代睾丸细胞培养及形态学观察被引量：1: 2008年; 用胰酶消化法分离培养绵羊睾丸细胞,分别对原代细胞244、8、72、96h的细胞形态用倒置显微镜和电子显微镜进行观察,并对13、、51、2月龄的绵羊的睾丸细胞活力进行生长速度和传代能力进行研究。结果表明,培养前期细胞多呈三角形活多角形,后期细长呈梭形,并且睾丸的年龄越小,生长速度越快,传代次数越多,细胞活力越强。; 李有文魏风郭志儒陈创夫; 关键词：细胞培养细胞形态

山羊痘病毒疫苗株RR基因的克隆与序列分析: 2009年; 用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计还原酶(RR)基因的特异引物进行PCR扩增,并克隆至pGEM-TEasy载体,蓝白斑筛选,酶切和测序签定,并对目的基因进行了序列分析。结果获得了RR基因的阳性克隆PGM-RR,DNA片段长度2 669 bp,内存在BglII等4个单一限制性内切酶酶切位点,编码区5′端含有早期转录终止信号TTTTTN(T)T。RR基因核苷酸和推测的氨基酸同源性与GENEBANK中发表的9个参考毒株的同源性分别在97%和99%以上,说明羊痘病毒RR基因具有高度的保守性。; 李有文魏风陈创夫王远志张辉任艳郭志儒; 关键词：山羊痘病毒

奶牛无乳链球菌疫苗的研究进展被引量：4: 2008年; 无乳链球菌是奶牛乳房炎最常见的病原体之一,其所致感染率高,给治疗带来了极大困难。疫苗是预防无乳链球菌感染的有效手段,但是无乳链球菌的血清型比较多,给疫苗设计带来非常大的困难。随着现代分子生物学技术的发展,应用基因工程技术重组表达来获取高纯度保护性抗原重组蛋白作为疫苗,是一个很好的发展方向。文中对近年来关于无乳链球菌在此方面的研究做一综述。; 褚明亮陈创夫刘君魏风胡圣伟; 关键词：无乳链球菌 SIP GAPDH 奶牛乳房炎

山羊痘疫苗株表达载体: 本发明提供用于在重组山羊痘病毒中表达外源蛋白的表达载体，在表达载体中的VV I1L启动子或VV P11启动子下游，插入外源基因，通过与山羊痘病毒亲本株同源重组获得12个表达外源蛋白的重组羊痘病毒，载体中能与山羊痘病毒亲本...; 陈创夫郭志儒李有文魏风; 文献传递

山羊痘病毒疫苗株TK基因的克隆与序列分析被引量：1: 2010年; 用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计TK基因的特异性引物并进行PCR扩增,获得了2405bp的DNA片段,并将PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体。酶切鉴定、PCR鉴定和测序结果表明,成功获得了TK基因,获得的TK基因内存在唯一的ACC65I酶切位点和3′末端早期转录终止信号TTTTTN(T)T。核苷酸和氨基酸同源性分析表明,弱毒疫苗株G14-STV44-55TK基因与基因Bank中发表的13个参考毒株的同源性在96%和95%以上,说明羊痘病毒TK基因具有高度的保守性。; 李有文魏风郭志儒陈创夫; 关键词：山羊痘病毒 TK基因

山羊痘病毒培养及其细胞病变观察研究被引量：8: 2009年; [目的]研究不同处理的细胞对病毒生长的影响。[方法]制备原代绵羊睾丸细胞,并用原代、传代和冻存3种处理的睾丸细胞对我国山羊痘病毒疫苗株分别进行培养,并用倒置显微镜和电子显微镜观察。[结果]病毒在3种处理的细胞上生长出现细胞病变的时间略有差异,并且细胞病变也不尽相同。[结论]不同处理的细胞出现的细胞病变不同。; 李有文魏风郭志儒陈创夫; 关键词：山羊痘病毒睾丸细胞细胞病变

山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株表达载体的构建: 2011年; PCR扩增山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55的TK(Thymidine kinase)基因作为侧翼序列;用XhoⅠ/NotⅠ消化含有报告基因的质粒pLSEG得到痘苗病毒(Vaccinia virus,VV)p7.5启动子调控大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(E.coli.gpt)作为报告基因;人工合成VV I1L启动子用于调控表达外源基因,用Overlap PCR的方法将VV I1L启动子和VV p7.5启动子调控的gpt连接但使两启动子转录方向相背,并在VV I1L启动子下游引入XhoⅠ位点作为外源基因的插入位点,构建成表达载体元件I1L-P7.5-GPT。将I1L-P7.5-GPT插入TK基因的Acc65Ⅰ位点,构建成表达载体。将构建的载体转染山羊痘病毒G14-STV44-55株感染的羔羊睾丸细胞,用含有霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)等筛选试剂的培养基筛选重组山羊痘病毒(rGTPV)。结果显示,构建成以TK基因为侧翼、以VV I1L启动子调控目的基因,以gpt为报告基因的表达载体pGEM-TK-I1L-GPT,成功筛选到表达gpt的rGTPV,rGTPV至少可稳定传代15代。结果表明,构建了我国山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株的表达载体;TK基因是GTPV G14-STV44-55疫苗株的复制非必需区,以TK基因为插入位点获得的重组病毒可稳定传代15代以上。; 李有文魏风陈创夫王远志张辉任艳郭志儒; 关键词：山羊痘病毒启动子报告基因

全选清除导出

共1页<1>

魏风