黄永业
- 作品数:10 被引量:5H指数:1
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪体细胞核移植重编程和胚胎发育影响因素研究
- 体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)可以快速大量复制具有优良数量、质量性状家畜个体,是一项有着广泛应用前景重要胚胎工程技术。本实验以提高猪SCNT效率为中心,从三个方面对猪...
- 黄永业
- 关键词:体细胞核移植乙酰化多能性嵌合体
- 文献传递
- 小型猪体细胞克隆试验被引量:1
- 2010年
- [目的]建立体细胞克隆小型猪的技术平台并了解克隆效率。[方法]运用体细胞核移植技术,以小型猪胎儿成纤维细胞作为核移植供体细胞,以体外成熟卵母细胞作为核移植受体细胞进行体细胞克隆猪生产,并利用STR序列对所出生的克隆猪进行个体识别。[结果]将重构胚胎移植到5头代孕母猪体内,其中一头代孕母猪成功产下2头克隆小型猪。经过个体识别试验证实克隆小型猪来自供核细胞,与代孕母猪无直接亲缘关系。[结论]克隆小型猪的成功出生表明所建立的技术平台适于小型猪的克隆。
- 黄永业李小平周焱谢万华段新平谭广云李栋袁婷高飞谢光洪赖良学欧阳红生逄大欣
- 关键词:体细胞核移植小型猪克隆猪性别鉴定
- Fat-1转基因克隆猪的制备研究
- <正>ω-3不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)是一类被广泛研究和关注的脂肪酸,越来越多的研究证明ω-3 PUFAs是人类及其他哺乳动物的生长和健康所必须的物质,对维持其正常...
- 袁婷谢万华谭广云周炎黄永业逄大欣赖良学欧阳红生
- 文献传递
- DNA甲基化和组蛋白修饰在兔早期胚胎的动态分析被引量:1
- 2019年
- 胚胎发育过程伴随着遗传学与表观遗传学不断变化,表观重编程完整性直接影响胚胎发育能力。孤雌胚胎发育可能与表观重编程不完全密切相关。然而,当前关于兔早期胚胎发育的表观遗传研究鲜有报道。研究拟确定兔早期胚胎中DNA甲基化与组蛋白修饰动态分布,比较这些表观修饰在体内受精胚胎与孤雌胚胎的差异。结果表明:体内受精胚胎与孤雌胚胎均呈现较高H3K4me2和泛乙酰化丰度,而较低H3K27me2和巴豆酰化丰度。四细胞到囊胚时期,孤雌胚胎5-甲基胞嘧啶(5mC)含量高于体内受精胚胎。二细胞到桑椹胚时期,孤雌胚胎5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)水平高于体内受精胚胎。培养基添加维生素C并没有显著改善孤雌胚胎DNA甲基化状态,而应用5-Aza-dC处理58 h能够降低5mC和5hmC水平,说明使用化合物进行适当处理可以改善孤雌胚胎的表观修饰水平。
- 王安峰黄永业逄大欣
- 关键词:孤雌胚胎组蛋白甲基化
- 绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养
- 2010年
- 目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。
- 谭广云谢万华周焱黄永业宋红肖李栋宋娜袁婷段新平逄大欣欧阳红生
- 关键词:EGFP胚胎干细胞小鼠
- 猪再克隆胚胎多能性相关基因表达分析
- 重编程不完全和/或胚胎发育过程中基因表达异常导致再克隆效率低下。以往对早期胚胎基因表达分析往往以胚胎群体进行测定,可能掩盖单个胚胎间基因表达差异。本研究拟分析单个猪早期胚胎间基因表达差异。分析的胚胎包括体外受精、体细胞核...
- 王安峰黄永业李占军欧阳红生
- 规模化体细胞克隆猪生产的探讨
- <正>目前体细胞核移植技术已经成为转基因动物生产的一种最为有效的手段。猪与人类具有许多生物学相似性,能够更真实地模拟人类基因功能和疾病进程,同时猪的器官被认为是最适合人类器官异种移植的来源,因而转基因猪将成为一种重要的生...
- 黄永业谭广云谢万华周炎李栋赖良学逄大欣欧阳红生
- 文献传递
- 双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的研究被引量:3
- 2010年
- 通过PCR扩增哺乳动物雄性决定基因SRY来鉴定胚胎的性别在畜牧业生产上已经得到广泛应用,优化技术路线,缩短鉴定时间对后期实验的成功有非常重要的意义。根据猪的SRY基因和GAPDH(内标)基因序列,分别设计并合成两对引物,通过双温PCR反应实现对猪早期胚胎性别的快速鉴定,结果表明:母猪只能扩增出404bp的GAPDH基因片段,而公猪能同时扩增出309bp的SRY基因片段和404bp的GAPDH基因片段。阳性率为100%,鉴定时间较常规时间缩短2h时。表明该检测方法快速、准确。该方法为在转基因克隆动物研究中快速鉴定胎儿成纤维细胞系的性别提供了可靠的技术保证。
- 李小平袁婷高飞武蓉黄永业段新平谢万华逄大欣
- 关键词:SRY基因多重PCR性别鉴定
- 人IL-18基因真核表达载体的构建
- 2011年
- 目的:通过克隆人的Interleukin-18基因,构建Interleukin-18基因的哺乳动物细胞真核表达载体。方法:把人基因组DNA通过PCR获得Interleukin-18,克隆载体pMD18-T/Interleukin-18,并将其转化到大肠杆菌里,最后进行重组真核表达载体pCDNA3.1/Interleukin-18的构建和鉴定。结果:以人总DNA为模板扩增出580 bp左右的特异性条带,测序结果与GeneBank测序结果相比,除两个碱基外,其余的完全一致,翻译成的氨基酸序列相同。对重组质粒pCDNA3.1/Interleukin-18进行双酶切鉴定并测序,结果也完全一致。结论:重组质粒pCDNA3.1/Interleukin-18由真核载体pCDNA3.1和Interleukin-18片段组成。且插入的Interleukin-18片段与已知序列完全相同。
- 刘炜炜黄永业宋立巍韩冰
- 关键词:PCR真核表达载体构建
- 气候和卵巢状况影响猪体细胞核移植胚胎体内发育
- <正>通过SCNT手段成功制备克隆猪依赖于多个方面风险因素减少。因此,为了更好地辅助SCNT研究领域,对作者所在课题组收集的有关克隆猪生产相关数据进行回顾性分析。结果显示,胚胎移植受体猪在5月份的怀孕到期率显著高于平均水...
- 王安峰黄永业李占军欧阳红生
- 文献传递