黄腊平
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞生长因子受体靶向shRNA真核表达载体的构建和鉴定
- 2006年
- 目的:构建和鉴定人肝细胞生长因子受体(cM et)的shRNA的真核表达载体。方法:人工合成针对cM et的4对shRNA序列并定向克隆到siRNA(sm all interference RNA)真核表达载体RNA i-Ready pSIREN-DNA-D sRed-Express Vector上;采用双酶切和测序法鉴定。结果:酶切及测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。结论:成功构建肝细胞生长因子受体靶向shRNA的真核表达载体。
- 黄腊平田德英
- 关键词：真核表达载体SIRNA
- HGF/cMet系统与肝癌细胞侵袭转移关系的实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨HGF/cMet基因表达与肝癌细胞侵袭转移能力的关系。方法:采用荧光定量PCR和WesternBlot检测5株肝癌细胞系MHCC-1、HepG2、Huh7、SMCC-7721、Hep3B和永生化肝细胞株L02以及26份肝组织中cMetmRNA和蛋白质表达水平,同时采用免疫组化法检测26份肝组织中cMet蛋白质的表达。结果:6株肝癌细胞cMetmRNA分别为7.9×106,3.4×106,2.1×106,6.5×105,3.8×105和5.8×103(copies/ml),5株肝癌细胞系cMetmRNA显著高于L02细胞系(P<0.01),其中以转移能力较强的MHCC-1细胞系的cMetmRNA表达量最高;肝癌组织、癌旁组织及周围正常组织的cMetRNA分别为2.28×107、6.80×105、5.68×105,肝癌组织的cMet基因表达明显高于癌旁及周围正常组织(P<0.01);在肝癌组织中,T1、T2、T3/T4期及NO、N1/N2的cMetmRNA分别为4.88×104、6.98×105、1.72×106、4.67×105、8.73×105,cMet的表达与肿瘤的大小及其侵袭能力明显正相关;WesternBlot和免疫组化也显示不同肝细胞系蛋白质表达水平与cMetmRNA表达一致。结论:HGF/cMet系统参与了肝癌的形成,并且在肝癌细胞的侵袭和转移的过程中起重要作用。
- 黄腊平黄元成田德英
- 关键词：癌基因肝癌
- HEV ORF3真核表达载体的构建、鉴定和真核表达被引量：1
- 2007年
- 目的构建表达戊型肝炎病毒(HEV)ORF3-pXF2RH融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的L02细胞系。方法利用PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,HindⅢ/EcolⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pXF2RH真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pXF2RH。将阳性克隆用脂质体法转染L02细胞系,G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定ORF3-pXF2RH融合蛋白的表达。结果真核表达质粒转染L02细胞,SDS-PAGE显示在28.5kD左右蛋白表达量明显高于对照组,Western blot在28.5kD左右有一条强的棕色条带。结论成功构建ORF3-pXF2RH真核表达质粒,在L02细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础。
- 陈焰贾柳萍黄腊平田德英
- 关键词：肝炎病毒真核表达凋亡增殖
- RNA干扰抗乙型肝炎病毒的研究进展
- 2007年
- 操明黄腊平
- 关键词：RNA干扰抗乙型肝炎病毒RNAI技术抑制HBVRNA病毒DNA病毒
