黄金山
- 作品数：27 被引量：9H指数：2
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- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用
- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用，提供一种以MβCD为有效成分，防治BmNPV入侵细胞的药物。该药物在深入研究病毒入侵机制、杆状病毒感染宿主的受体研究方面有重要意义。当MβCD浓度在8mM以上...
- 黄金山郝碧芳沈兴家程晨梁飞
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- 一种提高家蚕细胞表达外源蛋白分泌率的方法
- 一种提高家蚕细胞表达外源蛋白分泌率的方法，设计并合成用于干扰家蚕BmN细胞中BiP基因的RNAi干扰片段，转染BmN细胞24h后继续转染携带外源基因的表达载体，72h后即可以显著提高外源蛋白的分泌率。该方法操作简单易行，...
- 郝碧芳刘娜孙璐萍徐瀛潘世佳沈兴家黄金山
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- 甲基-β-环糊精在提高杆状病毒外源蛋白表达量中的应用
- 甲基‑β‑环糊精在提高杆状病毒外源蛋白表达量中的应用，本发明用一定浓度MβCD孵育用于表达外源蛋白的细胞，能显著的提高昆虫杆状病毒感染效率并提高外源蛋白的表达量。本发明可明显改善杆状病毒表达系统的表达效率，同时MβCD本...
- 黄金山郝碧芳南文斌柳林沈兴家
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- 家蚕核型多角体病毒经口感染因子1编码基因的转录及亚细胞定位分析
- 2019年
- 杆状病毒在感染循环中产生的包涵体衍生病毒(occlusion-derived virus,ODV)介导病毒经口感染。由至少9种经口感染因子(per os infectivity factor,PIF)形成的复合体介导ODV感染昆虫中肠上皮细胞。为深入研究经口感染因子1(PIF1)的作用机制,克隆了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)陕西分离株的pif1基因,序列分析显示其编码蛋白与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的PIF1氨基酸序列一致性为85%,含有2个RGD基序;5′RACE分析发现pif1转录起始位点位于起始密码子上游53 bp处,含有病毒晚期启动子的保守序列ATAAG;定量PCR分析显示pif1在感染晚期开始大量转录,一直持续到感染极晚期;利用瞬时表达系统将PIF1与EGFP融合表达,通过激光共聚焦显微镜观察荧光分布位置,结果发现荧光均匀分布于细胞质中,而在病毒感染后荧光进入细胞核中,表明PIF1在其他病毒因子参与下,被运输至细胞核中。研究结果为今后深入研究BmNPV PIF1在ODV经口感染中的作用奠定了基础。
- 黄金山黄金山
- 关键词：家蚕核型多角体病毒转录亚细胞定位
- 甲基-β-环糊精在提高杆状病毒对哺乳动物细胞转导效率中的应用
- 甲基‑β‑环糊精（MβCD）在提高杆状病毒对哺乳动物细胞转导效率中的应用，其步骤是用一定浓度的MβCD孵育正常培养的哺乳动物细胞，孵育30min后，去除孵育液，再用BmNPV转导哺乳动物细胞，即可显著提高BmNPV对哺乳...
- 郝碧芳徐瀛刘娜孙璐萍潘世佳沈兴家黄金山
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- 一种延长家蚕感染核型多角体病毒死亡时间的方法及其重组杆状病毒和应用
- 本发明公开了一种延长家蚕感染核型多角体病毒死亡时间的方法及其重组杆状病毒和应用，该方法敲除家蚕核型多角体病毒的gp64基因，在此基础上回复截短了18个氨基酸的gp64基因，构建的重组病毒半数致死时间较对照延长了32小时，...
- 郝碧芳陈凯黄金山沈兴家
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- 甲基-β-环糊精在扩大家蚕核型多角体病毒宿主域中的应用
- 甲基‑β‑环糊精在扩大家蚕核型多角体病毒宿主域中的应用，用含有一定浓度MβCD处理BmNPV非宿主细胞后，能显著的提高BmNPV感染非宿主昆虫细胞效率，使BmNPV可在非宿主细胞中复制扩增，产生有感染性的病毒粒子及多角体...
- 郝碧芳黄金山柳林南文斌沈兴家
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- 人生长素HGH基因在Bac-to-Bac/BmNPV家蚕杆状病毒表达系统中快速表达
- 长激素(Human growth Hormone，HGH)是由腺垂体分泌的一种在机体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素，具有广泛的生理功能。本实验采用Bac—to-Bac／BmNPV家蚕杆状病毒表达系统，以家蚕为宿主表...
- 付凡陈蔚唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：家蚕
- 家蚕氨肽酶N家族基因在5龄幼虫中肠组织的表达分析被引量：2
- 2013年
- 氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)是一种偏好水解蛋白质或寡肽N端中性氨基酸的酶,在鳞翅目昆虫中主要分布于中肠上皮细胞的刷状缘囊膜上,是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)伴孢晶体(Cry)毒素的重要受体蛋白。为了研究家蚕APN家族基因的表达特征,运用Real-time PCR技术检测分析该家族基因在不同家蚕品种幼虫中肠组织的表达差异以及同一家蚕品种幼虫中肠组织中该家族基因各个成员的表达丰度。在所有供试家蚕品种的幼虫中肠组织均可检测到APN家族基因的表达,但不同化性家蚕品种间APN基因的表达水平存在显著差异(P<0.05),而相同化性品种间的差异较小(P>0.05);在同一家蚕品种幼虫中肠组织中,APN2、APN4、APN5基因的表达量较高,而APN1及APN3基因的表达量较低。研究结果有助于进一步研究家蚕APN家族基因的作用机制,并为家蚕抗Bt品种的选育提供理论依据。
- 王猛程晨郝碧芳徐安英沈兴家黄金山
- 关键词：家蚕中肠组织
- 一种增强杆状病毒感染性的方法及其重组杆状病毒和应用
- 本发明公开了一种增强杆状病毒感染性的方法及其重组杆状病毒和应用，该方法将埃博拉GP蛋白基因重组到杆状病毒基因组上，产生的重组病毒经过测定，可以明显提高杆状病毒的滴度，增强感染性，可以在病毒繁殖扩增过程中，加入少量病毒可达...
- 郝碧芳罗得勇黄金山沈兴家
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