黄飚
- 作品数：9 被引量：21H指数：4
- 供职机构：重庆市綦江区人民医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响。方法利用RT-PCR检测人肾透明细胞癌细胞系786-O和人胚肾细胞系HEK-293中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(yes-associated protein,YAP)mRNA的表达水平,用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)对LATS1低表达细胞786-O进行甲基化分析,5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)处理786-O和HEK-293后,用RT-PCR、Western blot检测各组细胞LATS1和YAP的mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期,CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况。结果 786-O较HEK-293 LATS1mRNA表达水平显著降低(P<0.05),YAP mRNA表达水平显著升高(P<0.05),BSP显示LATS1在人肾癌细胞系786-O中高度甲基化;DAC处理786-O后,LATS1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),YAP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),周期停滞在G0/G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05),而HEK-293组均无明显变化(P>0.05)。结论 LATS1基因去甲基化后下调YAP基因表达,抑制786-O细胞增殖并诱导其凋亡。LATS1基因甲基化在肾癌发生中起重要作用。
- 陈柯宏李兴森何江黄飚曹建佳盛夏李文宾李美材王德林曾强锋黄亮亮
- 关键词：肾细胞癌去甲基化
- RNAi沉默整合素连接激酶基因对人膀胱癌BIU-87细胞体内成瘤的影响
- 2012年
- 目的:研究RNAi沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因对人膀胱癌BIU-87细胞裸鼠皮下成瘤的影响。方法:构建4条针对ILK基因的特异性miRNA干扰载体和1条阴性对照载体,并利用脂质体转染法将其转染BIU-87细胞,并筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测抑制效果。将10只裸鼠随机分为2组,皮下分别接种转染组细胞和未转染组细胞,观察瘤体的生长情况,并于接种4周后处死裸鼠,测量其瘤体体积和重量,并将瘤体做HE染色,观察瘤体病理情况。结果:转染组细胞ILK的表达明显受到抑制,以miR-3组的抑制效率最高。裸鼠皮下成瘤实验检测发现:两组均有瘤体形成,未转染组较转染组瘤体生长快,未转染组体积平均为:289.56±36.49mm3,转染组为:56.67±4.32mm3。瘤体重量分别为:1.265±0.02 g和0.518±0.03g。转染组与未转染组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:利用RNAi技术能有效抑制靶基因ILK的表达,从而降低膀胱癌细胞的体内的增殖能力。
- 何江陈亮王德林黄飚
- 关键词：ILKBIU-87裸鼠
- 年龄因素对大鼠睾丸中脑红蛋白表达的影响
- 2011年
- 目的:探讨脑红蛋白(neuroglobin,NGB)在不同年龄段大鼠睾丸中的分布特征及表达差异。方法:随机选取3月、9月、15月龄SD雄性大鼠,每个年龄段各8只,处死后立即在无菌情况下取睾丸组织,免疫组织化学SP法观测NGB在大鼠睾丸中的定位,巢式PCR和Western blotting分析NGB mRNA和蛋白的表达差异。结果:免疫组织化学显示NGB在大鼠睾丸的间质细胞、精原细胞、各级精母细胞、支持细胞和精子细胞的胞质和胞核都有表达;巢式PCR检测表明9月龄组大鼠睾丸组织中NGB mRNA表达量最高,15月龄组表达次之,3月龄组表达量最低;而NGB蛋白表达与其mRNA相一致。结论:NGB在各年龄段大鼠睾丸组织中广泛表达,且年龄因素影响大鼠睾丸中脑红蛋白的表达。
- 黄飚陈亮王德林
- 关键词：巢式PCR
- 脑红蛋白的最新研究进展被引量：6
- 2010年
- 黄飚王德林
- 关键词：脑红蛋白《NATURE》脊椎动物肌红蛋白血红蛋白
- 尿流动力学在儿童及青少年遗尿中的应用价值被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨和分析尿流动力学检查在儿童及青少年遗尿症中的临床价值。方法:对我院诊治的61例遗尿症儿童及青少年进行尿流动力学检查,根据检查结果,并结合其临床症状、体征及其它辅助检查,选择适当的个体化治疗方案。结果:其中有42例尿流动力学检查结果显示异常,占总例数的68.9%;19例尿流动力学检查结果显示无异常发现,占总例数的31.1%。结论:膀胱敏感性增加、膀胱容量相对减小、膀胱逼尿肌无抑制性不稳定收缩、膀胱顺应性和尿道压减低、出现残余尿量是遗尿症儿童及青少年尿流动力学检查结果出现异常的常见原因,行尿动力学检查在一定程度上能为遗尿症儿童及青少年在诊疗方案的选择上提供临床指导和参考。
- 赵伟李加彬魏利军吴文强蒲世年黄飚李兴森
- 关键词：尿流动力学遗尿症
- 年龄因素对大鼠睾丸中脑红蛋白表达的影响
- 目的:探讨脑红蛋白(neuroglobin,NGB)在不同年龄段大鼠睾丸中的分布特征及表达差异。
方法:随机选取3个月,9个月,15个月龄SD级雄性大鼠,每个年龄段各8只,处死立即在无菌情况下取睾丸组织,免疫组织化...
- 黄飚
- 关键词：年龄因素大鼠睾丸脑红蛋白表达NGB阳性表达
- shRNA沉默YAP基因对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨慢病毒干扰载体沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响。方法:用细胞免疫荧光法检测肾癌786-O细胞中YAP蛋白表达情况;构建针对YAP基因的shRNA慢病毒干扰载体转染786-O细胞。RT-PCR和Western blot分别检测干扰786-O细胞前后YAP mRNA及蛋白的表达情况;CCK-8(cell counting kit-8)法检测沉默YAP后细胞增殖的改变;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡和周期的变化。结果:786-O细胞中YAP蛋白表达于细胞浆和细胞核;shRNA-YAP慢病毒干扰载体转染4 d后,可明显下调786-O细胞YAP mRNA及蛋白表达水平(P=0.000),并且明显抑制细胞增殖和促进细胞凋亡(P=0.000);细胞周期紊乱,G1期细胞明显增加,S期细胞明显降低(P=0.000)。结论:YAP-shRNA慢病毒干扰载体能有效抑制YAP基因在786-O细胞中表达,进而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
- 曹建佳何江李兴森陈柯宏盛夏李文宾李美材黄飚王德林
- 关键词：肾细胞癌RNA干扰慢病毒
- YAP基因及蛋白在肾癌中的表达及意义被引量：2
- 2012年
- 目的:观察Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因及蛋白在肾癌组织中的表达情况及其意义。方法:采用RT-PCR技术及免疫组化检测42例肾癌组织和癌旁正常肾组织中YAP基因及蛋白的表达情况。结果:YAP基因在肾癌组织中阳性表达率为88.10%,而在癌旁正常组织中仅为14.29%。YAP蛋白在肾癌组织中阳性率也高于癌旁正常组织(95.23%vs.30.95%),两者相比有统计学差异(P<0.05)。结论:YAP可能与肾癌的发生发展密切相关,YAP在肾癌中的异常表达可为肾癌的诊断,治疗提供实验依据,尤其为诱导细胞凋亡和基因治疗肾癌打下基础。
- 李兴森黄飚王德林唐伟
- 关键词：肾癌逆转录聚合酶链反应免疫组化
- RNAi沉默整合素连接激酶基因表达对膀胱癌细胞BIU-87增殖的影响被引量：4
- 2010年
- 为了研究整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因沉默对膀胱癌BIU-87细胞系增殖产生的影响,应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,合成了4条针对ILK的miRNA干扰载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-ILK-miR(miR-1、miR-2、miR-3、miR-4)作为实验组,另设1条为阴性对照组,分别转染膀胱癌BIU-87细胞系.经杀稻瘟菌素持续压力筛选和有限稀释法培养获得稳定转染细胞株.采用RT-PCR和Western-blot检测各组对ILK基因的抑制作用,实验组miRNA对BIU-87细胞ILK mRNA和蛋白的表达均有明显的抑制作用,以miR-3组抑制效应最强.通过流式细胞术检测发现,miR-3组细胞周期G0/G1期细胞所占比例较未转染组明显增加,而S期则明显减少(P<0.05).四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测发现,转染组细胞在体外的增殖能力较对照组明显下降(P<0.05).证明RNA干扰技术能有效抑制靶基因ILK的表达,进而抑制了膀胱癌细胞系BIU-87的增殖.
- 陈亮王德林黄飚
- 关键词：膀胱癌稳定转染
