丁振禹
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- 三羟基异黄酮对转染APP695基因PC12细胞周期和凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 目的以APP695MT基因转染PCI2细胞为细胞模型，研究三羟基异黄酮（Genistein，GST）对模型细胞周期和凋亡的影响。方法用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP／APP695MT表达载体转染正常的PCI2细胞，将细胞分为空载对照组、APP695转染组、GST干预组。应用流式细胞仪测定检测细胞周期和细胞凋亡率，激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡形态学变化。结果APP695转染组与空载对照组比较，PCI2细胞在G。和G。期明显增多，而进入s期的细胞减少，细胞增殖指数明显降低[（55．6±0．57）％，P〈0．01]，细胞凋亡率明显升高[（77．10±12．53）％，P〈0．01]；细胞死亡发出的红色荧光明显增多，胞体肿胀，细胞器崩解，细胞核固缩或碎裂。GST（15μmol／L）干预组与APP695转染组比较，PCI2细胞在G0和G1期明显减少，而进入S期的细胞增多，细胞增殖指数明显增加[（61．57±0．47）％，P〈0．01]，细胞凋亡率降低[（46．00±8．43）％，P〈0．01]；细胞死亡发出的红色荧光明显减少，绿色荧光显著增强，细胞形态较APP695转染组好转。结论GST能改善APP695MT基因转染引起的细胞周期阻滞，促进细胞向S期的过渡，降低PCI2细胞凋亡率，对转染细胞有一定的保护作用。
- 王凤斌丁振禹孔佑华王亚南李宁
- 关键词：三羟基异黄酮APP695PC12细胞细胞周期
- 三羟基异黄酮对APP695基因转染PC12细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察植物雌激素三羟基异黄酮（genistein，GST）对APP695基因转染PCI2细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP／APP695MT表达载体转染正常PCI2细胞，将细胞分为正常对照组、空载转染组、APP695转染组和GST干预组（5tLmol／L、15Ixmol／L）。采用免疫细胞化学SABC法和免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在PCI2细胞中的表达。结果免疫细胞化学SABC法结果显示，与正常对照组比较，APP695转染组PCI2细胞Bax蛋白细胞阳性表达率显著升高[（78．02±1．26）％，P〈0．01）]，Bcl-2蛋白细胞阳性表达率则明显降低[（15．40±0．72）％，P〈0．01）]；15~mol／LGST组与APP695转染组比较，Bax蛋白的阳性细胞表达率显著降低[（22．35±0．49）％，P〈0．01）]，而Bcl-2蛋白的阳性表达率明显增强[（68．11±0．24）％，P〈0．01）]。Westernblot结果表明，APP695转染组与对照组比较Bax蛋白的表达量明显增多，Bcl-2蛋白表达则明显降低；GST各处理组与APP695转染组比较，Bax蛋白的表达量明显降低，Bcl-2蛋白表达显著增强。结论GST能降低APP695基因转染引起的PCI2细胞内Bax蛋白表达的水平，而提高Bcl-2蛋白的表达水平，对PCI2细胞产生保护作用。
- 丁振禹赵翠香王凤斌刘冰谭春艳王亚南
- 关键词：三羟基异黄酮APP695BAX蛋白BCL-2蛋白PC12细胞
- GST对转染APP695基因PC12细胞β淀粉样蛋白表达和形态功能的影响
- 2012年
- 目的:观察三羟基异黄酮(Genistein,GST)对APP695转染PC12细胞β淀粉样蛋白(Aβ)表达和形态功能的影响。方法:用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导PC12细胞72 h后,放射免疫法测定Aβ的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞形态学的变化,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)分泌量。结果:APP695转染组与对照组比较Aβ生成量明显增加(P<0.01),细胞突起数量少、突起长度较短,CA分泌量明显降低(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较Aβ生成量减少(P<0.05),细胞突起数量增多、突起较长,CA分泌量明显增加(P<0.01)。结论:GST能减少APP695基因转染引起的PC12细胞Aβ的表达,改善细胞分化程度,提高CA的分泌量,对转染PC12细胞具有一定的保护作用。
- 王凤斌赵翠香张丽娟丁振禹
- 关键词：三羟基异黄酮APP695PC12细胞Β淀粉样蛋白
- 三羟基异黄酮对APP695基因转染PC12细胞凋亡的保护作用
- 2011年
- 目的探讨植物雌激素三羟基异黄酮(Genistein,GST)对APP695基因转染PC12细胞凋亡的保护作用及机制。方法用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,将细胞分为对照组、空载组、APP695转染组、GST干预组。应用流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫细胞化学SABC法和Western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。结果 APP695转染组与空载组比较,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3为强阳性表达(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较,PC12细胞凋亡率明显降低(P<0.01),Caspase-3的免疫反应产物明显减弱(P<0.01),且15μmol.L-1和20μmol.L-1 GST处理组与5μmol.L-1和10μmol.L-1 GST处理组比较,Caspase-3的免疫反应产物减弱更明显(P<0.01)。结论 GST能降低APP695基因转染的PC12细胞凋亡率,其机制可能与减少凋亡蛋白Caspase-3的表达有关。
- 王凤斌龙云王亚南丁振禹赵翠香
- 关键词：三羟基异黄酮APP695PC12细胞凋亡CASPASE-3
