付艳萍
- 作品数：11 被引量：36H指数：4
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- 利用CRISPR/Cas-9技术创制水稻温敏核不育系被引量：8
- 2018年
- 水稻光温敏核不育系的选育是两系法杂交稻选育的关键环节。温敏不育基因tms5在生产上应用最为广泛,通过CRISPR/Cas9基因组编辑技术突变可育水稻品种的TMS5基因,可以快速选育水稻温敏型两系不育系。利用CRISPR/Cas-9技术创制水稻温敏核不育系的试验结果表明:通过构建CRISPR/Cas-9基因编辑载体TMS502,转化优良中间材料GH89获得10株T0代转基因苗,有6株产生了插入或缺失突变,其中纯合突变株tms5-1和双等位突变株tms5-4在T0代就表现出温敏不育特征;T1代非转基因单株中共有4种纯合突变基因型,突变类型与T0代检测结果一致,并未产生新的突变;T2代tms5不育系材料的温敏不育起点温度约为24℃,符合水稻两系不育系选育要求。研究结果证明了利用基因编辑技术培育水稻两系不育系的有效性,所创制的不育系可供进一步选育利用。
- 吴明基林艳刘华清陈建民付艳萍杨绍华王锋
- 关键词：杂交水稻两系不育系基因
- CRISPR/Cas9编辑Badh2基因改良优质粳稻品种香味性状被引量：7
- 2020年
- 【目的】利用基因编辑技术编辑水稻香味基因,改良优质粳稻香味性状。【方法】构建CRISPR/Cas9-BADH基因编辑载体,转化优质粳稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134,测序鉴定3个优质粳稻品种的香味基因Betaine aldehyde dehydrogenase 2(Badh2)突变体并分析潜在脱靶效应,利用气相色谱-质谱联用技术测定不同遗传背景badh2突变体稻米的2-乙酰-1-吡咯啉(2-acetyl-1-pyrroline,2AP)含量。【结果】转化获得的30株T0代中有24株为badh2突变体,其中53.33%为杂合型突变,16.67%为纯合型突变,10%为双等位突变类型。T1代非转基因植株内共鉴定获得7种纯合badh2突变基因型。在5个预测位置上未检测到脱靶事件的发生,说明设计的sgRNA具有高度特异性。所有Badh2移码突变体稻米的2AP含量都达到或高于稻花香的水平,但不同品种来源的badh2突变体间2AP含量差异极显著。【结论】本研究提供了一个能够高效诱导水稻Badh2突变的CRISPR/Cas9定向编辑靶点,改良了生产上大面积推广的3个优质水稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134的香味性状,发现了不同遗传背景的水稻badh2突变体间2AP含量差异显著,为基于定向编辑Badh2基因的方法培育适合生产应用的香稻品种、提高育种效率提供科学依据。
- 吴明基林艳刘华清付艳萍宋亚娜王锋
- 关键词：水稻香味
- 利用TALEN技术编辑水稻光温敏核不育基因PMS3被引量：2
- 2019年
- 【目的】利用TALEN技术定向突变水稻pms3的原始突变区域,创制不同类型osa-smR5864小RNA编码序列突变体,鉴定不同突变体的雄性育性光温反应变化规律,为基于定向编辑水稻PMS3基因的方法培育水稻两系不育系材料提供科学依据。【方法】构建基因编辑载体TALEN-PMS3,转化日本晴和明恢86,通过测序鉴定pms3突变体,利用福州夏季自然长日高温鉴定T2代pms3突变体的雄性育性及自交结实率。【结果】转化获得25个转基因T0代克隆,其中日本晴有4个克隆产生了突变,明恢86有5个克隆产生了突变,突变率分别为40.0%和33.3%。在T1代非转基因材料中,日本晴背景中有3种纯合突变类型,明恢86中有5种纯合突变类型。在福州夏季自然长日高温条件下,T2代pms3突变体能够产生正常可育的花粉,自交结实率正常,并未表现出类似培矮64S的光温敏雄性不育特征。【结论】本研究通过基因编辑获得的多种类型水稻pms3突变体并不能产生光温敏雄性核不育表型,说明了pms3位点调控水稻光温敏核不育性分子机制的复杂性。
- 林艳刘华清付艳萍吴明基
- 关键词：水稻光温敏核不育
- 一种提高水稻磷吸收率的方法
- 本发明公开一种提高水稻磷吸收率的方法。本发明利用PCR技术克隆OsSUT2基因的全长cDNA，构建由玉米Ubi启动子驱动的植物表达载体，通过农杆菌介导法获得过表达OsSUT2基因水稻。转基因纯合水稻在低磷生长条件下植株磷...
- 苏军张武君宋亚娜付艳萍颜静宛胡太蛟李刚林智敏
- 文献传递
- 不同水稻tms5突变位点对雄性不育起点温度的影响
- 2023年
- 【目的】研究不同水稻tms5突变位点对雄性不育起点温度的影响,探讨不育起点温度遗传调控途径。【方法】在水稻TMS5的6个外显子上设计11个CRISPR/Cas9基因编辑靶点,依次命名为T501—T511,构建相应载体转化粳稻品种日本晴和籼稻品种明恢86,获得各靶点的tms5移码突变体。田间自然高温及人工气候箱(设日平均22、24和28℃3种温度)条件下分析tms5突变体的花粉碘染及自交结实率,鉴定不育起点温度。【结果】粳稻日本晴tms5突变体的不育起点温度高于28℃,籼稻明恢86的不同tms5突变体不育起点温度为22~28℃。此外,同一遗传背景下,通过T501靶点编辑产生的tms5-1移码突变体不育起点温度均显著高于T502靶点的tm5-2突变体,其他位点上的tms5突变体育性特征与tm5-2突变体并无差异。基因表达量分析表明,tms5-1突变体幼穗Ub_(L40)基因表达量显著低于tm5-2突变体的表达量。【结论】水稻tms5突变体不育起点温度不仅受遗传背景的影响,tms5基因突变位点不同也会影响不育起点温度,特别是T501位点与其余位点突变体间不育起点温度差异显著,为研究水稻tms5两系不育起点温度的分子机理及遗传调控网络提供了新思路。
- 吴明基刘华清陈建民付艳萍杨绍华宋亚娜林艳王锋
- 关键词：水稻温敏核不育不育起点温度
- 一种<Sup>13</Sup>C水稻愈伤组织制备方法
- 本发明提供了一种用于评价转基因水稻对土壤微生物多样性影响的水稻愈伤组织制备方法。本发明以<Sup>13</Sup>C葡萄糖(D-GLUCOSE(U-13C6,99%))作为培养基的碳源，对转基因及非转基因水稻的愈伤组织进...
- 宋亚娜王锋苏军付艳萍
- 文献传递
- 磷胁迫下蔗糖对水稻苗期根适应性和磷酸转运蛋白基因表达的影响被引量：11
- 2014年
- 磷是植物生长和发育中最重要的必须元素之一。尽管土壤中磷资源很丰富,但大部分磷是以植物不能吸收利用的固定态和有机态存在,特别是以酸性土壤为主的南方稻田,水稻缺磷现象非常严重。理解和掌握水稻对低磷的适应机制有助于利用分子手段培育磷高效利用水稻品种。为阐明蔗糖提高水稻耐低磷的机制,本研究对水稻幼苗进行不同磷、糖处理,分析水稻幼苗在不同磷糖配比培养基中的根系结构、无机磷、酸性磷酸酶活性的变化,并利用定量RT-PCR技术分析水稻磷酸转运蛋白基因(OsPT)和酸性磷酸酶基因(OsSAP1)的表达。试验设2个磷浓度:无磷和85 mg·L?1KH2PO4,2个蔗糖浓度:无糖和3%蔗糖,正交设计。结果表明,在低磷胁迫时添加蔗糖,能使水稻幼苗的根总长度、总根数、根冠比显著增加,根分泌的酸性磷酸酶活性降低,但水稻体内的磷酸转运酶活性提高。11个与磷具有高度亲和力的磷酸转运酶的表达发生了改变,其中根优势表达的4个基因OsPT2、OsPT3、OsPT4、OsPT6对磷、糖的影响最为敏感,暗示了蔗糖是通过调节磷转运蛋白维持磷的吸收和平衡。增加根系的蔗糖分配能够提高水稻幼苗对磷胁迫的耐受性。
- 苏军张武君杜琳宋亚娜付艳萍
- 关键词：水稻磷胁迫蔗糖酸性磷酸酶
- 一种<Sup>13</Sup>C水稻愈伤组织制备方法
- 本发明提供了一种用于评价转基因水稻对土壤微生物多样性影响的水稻愈伤组织制备方法。本发明以<Sup>13</Sup>C葡萄糖(D-GLUCOSE(U-13C6,99%))作为培养基的碳源，对转基因及非转基因水稻的愈伤组织进...
- 宋亚娜王锋苏军付艳萍
- 文献传递
- 一种提高水稻磷吸收率的方法
- 本发明公开一种提高水稻磷吸收率的方法。本发明利用PCR技术克隆OsSUT2基因的全长cDNA，构建由玉米Ubi启动子驱动的植物表达载体，通过农杆菌介导法获得过表达OsSUT2基因水稻。转基因纯合水稻在低磷生长条件下植株磷...
- 苏军张武君宋亚娜付艳萍颜静宛胡太蛟李刚林智敏
- 文献传递
- 农杆菌介导水稻BADH2基因RNA干涉表达载体的转化
- 2007年
- 利用农杆菌(Agrobacterium tumefa-ciens)介导将水稻BADH2的RNAi载体导入多个水稻品种幼胚、成熟胚诱导的愈伤组织。试验表明,不同外植体来源影响愈伤组织的诱导和转化,并且愈伤组织的诱导和转化效果受基因型的影响。在农杆菌转化过程中,潮霉素和除草剂都是较好的筛选剂,前者筛选所得的抗性愈伤分化成苗所需时间较短;但后者筛选所得的抗性愈伤形成的苗更健壮。T0代PCR检测表明,通过转化确已获得一定数量的转基因植株。
- 刘俊利王峰牛向丽付艳萍刘永胜
- 关键词：水稻农杆菌
