何雷
- 作品数：122 被引量：180H指数：7
- 供职机构：河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 嗜肠道型新城疫病毒VGGA毒株的分离培养和全基因测序及分析
- 【目的】新城疫病是由新城疫病毒引起的急性、热、败血症和高接触性传染病。近年来新城疫病毒给世界各地的养殖企业造成巨大的损失。鸡源NDV毒株的全基因序列测定,毒力特点差异及遗传进化规律对于研发新城疫疫苗具有重要意义。【方法】...
- 何雷王加冕王海蓉赵文龙张杭侯德民程相朝
- 文献传递
- gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响
- 2019年
- 【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga-miRNA-155,并将其克隆入pMD-18T载体,构建克隆载体pMD-18T-pre-gga-miRNA-155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA真核表达载体和pMD-18T-pre-gga-miRNA-155,将pre-gga-miRNA-155酶切回收片段与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA的酶切回收片段进行连接,构建重组真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCC-MSB1细胞中,应用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)检测gga-mi-RNA-155的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154bp的鸡pre-gga-mi-RNA-155基因。成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,瞬时转染MD-CC-MSB1细胞后gga-miRNA-155表达水平显著增加,且MDCC-MSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体,其可在MDCC-MSB1细胞中过表达gga-miRNA-155,且可促进MDCC-MSB1细胞的体外增殖。
- 余祖华丁轲丁轲贾艳艳郁川廖成水贾艳艳张梦珂何雷张春杰廖成水
- 关键词：细胞增殖
- 单增李斯特菌hly基因缺失株的构建及重要特性分析被引量：7
- 2019年
- 为构建单增李斯特菌(LM)hly基因缺失株,并分析其生物学特性和免疫保护效果,本研究利用同源重组技术获得基因缺失株LM△hly112-153,研究该缺失株对巨噬细胞的侵袭力、溶血能力并测定其LD50,同时评价该缺失株对小鼠的免疫保护效果。结果显示经PCR扩增及序列分析表明获得基因缺失株LM△hly112-153,该缺失株对巨噬细胞的侵袭能力显著下降(p<0.01);其溶血活性比野生株降低2个滴度;并且该缺失株对BALB/c小鼠的LD50为4.253×108 cfu,高于野生株3个数量级;免疫保护试验显示,经缺失株免疫的小鼠对野生株攻毒有75%的免疫保护率。本研究构建了基因缺失株LM△hly112-153,该缺失株对小鼠具有较好的免疫保护效果,以上研究为减毒李斯特菌疫苗载体的研发奠定重要基础。
- 赵莹莹贾艳艳杜付玉余祖华余祖华何雷廖成水张春杰
- 关键词：单增李斯特菌安全性基因缺失同源重组
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株sipB和crp基因缺失对其侵袭力影响的比较被引量：3
- 2015年
- 目的:为探讨sip B和crp基因对侵袭能力的影响。方法:以鼠伤寒沙门菌SL1344株sip B和crp缺失株为研究对象,进行生物学特性以及体内外侵袭力的研究。结果:生物学特性结果表明,sip B缺失株生化特性和亲本菌株相比没有发生明显的变化,而crp缺失株失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力,并且生长速度较亲本菌株相比发生了显著的降低。体内侵袭力结果表明两个实验组小鼠肝脏和脾脏分离到的细菌数目均低于对照组,体外感染He La细胞结果显示sip B缺失菌株组的黏附率和侵入率较crp组和对照组均发生了显著的降低。结论:以上结果表明sip B基因在细菌侵染机体过程中扮演着重要的角色。
- 陈松彪张春杰程相朝李银聚李静何雷郁川张明亮余祖华贾艳艳赵战勤
- 关键词：鼠伤寒沙门菌侵袭力
- 鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响被引量：2
- 2020年
- 旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的迁移与侵袭能力。结果显示,与相应阴性对照相比,转染TGFβ1过表达质粒可显著上调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,且使G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时增加细胞凋亡率,降低细胞的迁移与侵袭能力;转染TGFβ1干扰表达质粒可显著下调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著促进MDCC-MSB1细胞的增殖,G1期细胞减少、S和G2期细胞增加,同时降低细胞凋亡率,增加细胞的迁移与侵袭能力。结果表明,鸡TGFβ1可抑制MDCC-MSB1细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。
- 余祖华丁轲贾艳艳郁川何雷廖成水李静张春杰李银聚吴庭才程相朝门凯凯张瑾余祖玲周子誉罗俊
- 关键词：TGFΒ1细胞增殖细胞凋亡迁移
- 鸭肝炎病毒I型VP1蛋白抑制肽及其应用
- 本发明公开了一种鸭肝炎病毒I型VP1蛋白抑制肽及其应用，属于动物病毒分子生物学技术领域。本发明通过基因工程方法获得DHV-1VP1蛋白，并以DHV-1VP1蛋白作为靶标，利用噬菌体随机12肽库筛选得到与DHV-1VP1特...
- 王臣何雷李小康牛明媚张春杰
- 文献传递
- 洛阳地区鸡肉中单增李斯特菌毒力基因的分布研究被引量：4
- 2015年
- 为分析鸡肉中单增李斯特菌毒力基因的分布特征,从洛阳地区市售鸡肉中分离18株单增李斯特菌,血清凝集试验确定其血清型,然后采用PCR方法对inl A、inl B、virR、dlt A、dlt B、dlt C、dlt D及mpr F等8个毒力基因进行检测。结果显示,18株分离株血清型均为1/2型,且有9株具有全部毒力基因,其中inl B、dlt A、dlt B基因全部呈阳性,inl A、virR、dlt C、dlt D、mpr F存在缺失现象,其检测率分别为88.9%(16/18)、94.4%(17/18)、83.3%(15/18)、88.9%(16/18)、83.3%(15/18)。毒力基因缺失与血清型相关性分析结果显示,不同血清型缺失基因呈多样性。表明这8个毒力基因在市售鸡肉的单增李斯特菌中普遍分布。
- 贾艳艳何雷郁川李静程相朝张春杰李银聚
- 关键词：单增李斯特菌毒力基因鸡肉
- 鼠伤寒沙门菌超氧化物歧化酶SodA基因的原核表达
- 究利用PCR方法扩增鼠伤寒沙门菌的SodA基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-SodA.将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG进行诱导表达.通过双酶切和...
- 张建康梅晶晶张春杰余祖华何雷贾艳艳李静郁川程相朝汪洋
- 关键词：鼠伤寒沙门菌超氧化物歧化酶原核表达
- MDV Meq基因簇miRNAs基因缺失株的致病性被引量：1
- 2016年
- 为了探讨Meq基因簇microRNAs（Meq-clusteredmiRNAs）对马立克氏病病毒（Marek’Sdiseasevirus，MDV）致病性的影响．本研究将MDVMeq—clusteredmiRNAs基因缺失株GX0101AMeq—miRNAs感染1日龄SPF鸡，并于感染后90d内进行毒株致死率、致肿瘤率、鸡体质量、免疫器官指数和鸡血液中病毒含量等方面的检测。结果显示：1日龄SPF鸡在接种Gxol01AMeq—miRNAs后90d内累计死亡率和眼观肿瘤发生率分别为4％和8％，与亲本株GX0101BAC相比分别下降了23．5倍和2．5倍；与鸡胚成纤维细胞（chickenfibroblastcells，CEF）阴性对照相比，GX0101△Meq—miRNAs感染鸡在整个试验期间体质量差异均不显著（P〉0．05）；在感染后14～21d，GX0101△Meq—miRNAs组的法氏囊指数和胸腺指数均显著降低（P〈0．05）；与亲本株相比，GX0101／XMeq—miRNAs在血液中的含量及导致的显微肿瘤发生率均下降。结果表明：MDVMeq—clusteredmiRNAs基因的缺失降低了MDV的致病性，Meq—clusteredmiRNAs具有调控MDV致病性的功能。
- 余祖华丁轲滕蔓马圣明贾艳艳郁川何雷程相朝
- 关键词：马立克氏病病毒
- 猪瘟病毒NS5A蛋白的亚细胞定位及对宿主细胞的影响
- 本研究的目的是了解猪瘟病毒(CSFV)NS5A蛋白对宿主细胞的影响，为揭示NS5A蛋白在CSFV致病中的作用及其机制提供科学资料。酵母双杂交技术在研究胞内蛋白与病毒蛋白相互作用中具有突出的优势。本研究进行了CSFV NS...
- 张彦明何雷张成成郭抗抗宁蓬勃
- 关键词：猪瘟病毒致病机制非结构蛋白亚细胞定位
- 文献传递
