傅敏根
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- miR-130b在食管鳞癌中的表达及对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:检测微小RNA-130b(miR-130b)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达并探讨其对ESCC细胞增殖、迁移的影响.方法:microRNA(miRNA)芯片筛选ESCC组织中异常表达的miRNAs,TaqMan MGB探针法定量PCR检测19例ESCC组织及配对癌旁组织标本中miR-130b的表达;通过脂质体转染模拟物miR-130b mimics(miR-130bm)促进ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,转染抑制物miR-130b inhibitor(miR-130bi)抑制Eca109细胞中miR-130b的表达;进一步采用CCK-8法和Transwell迁移实验检测ESCC细胞增殖、迁移的变化;生物学信息预测miR-130b的靶基因,双荧光素酶报告基因验证其靶向作用;采用SYBR Green定量PCR和Western blot检测靶基因mRNA和蛋白表达.结果:miR-130b在ESCC组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);转染miR-130bm可有效增加ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,进而促进Eca109细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数明显多于对照(112.9±2.4vs54.3±1.8,P<0.01);转染miR-130bi则降低细胞中miR-130b的表达;进而抑制细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数较对照明显减少(33.9±2.3vs56.2±1.9,P<0.01).miR-130b可作用于PTEN3'非翻译区抑制其表达.miR-130b可负向调控PTEN蛋白表达,并促进Akt磷酸化,但对PTENmRNA表达无明显影响.结论:miR-130b在ESCC组织中表达上调,增加其表达促进ESCC细胞Eca109增殖和迁移,降低其表达则抑制Eca109细胞增殖和迁移;miR-130b可在转录后水平负向调控PTEN的表达并促进Akt磷酸化.提示miR-130b有望成为ESCC治疗的新靶点.
- 郁婷婷李硕傅敏根曹日昇朱宏施瑞华
- 关键词：食管鳞癌增殖迁移
- miR-195在食管癌中的表达及其对食管癌细胞株增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨microRNA-195(miR-195)在食管癌中的表达及其对食管鳞癌细胞Eca109增殖的影响。方法:采用Taqman探针实时定量PCR方法检测10对外科手术食管鳞癌标本miR-195的表达,用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-195类似物转染入Eca109细胞,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测蛋白表达水平。结果:与正常食管上皮相比,食管鳞癌组织miR-195表达明显降低(P<0.05)。在48、72、96 h,miR-195转染组细胞吸光值明显低于对照组(P<0.05),且miR-195转染组处于G0/G1期细胞的百分数明显高于对照组(P<0.05)。Western blot结果显示miR-195转染组Cdc42蛋白水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:miR-195可阻滞Eca109细胞从G1期进入S期,抑制其增殖。
- 傅敏根李硕郁婷婷钱丽娟高树娟朱宏冯亚东曹日昇陈亮施瑞华
- 关键词：食管鳞癌增殖细胞周期
