兰小鹏
- 作品数：271 被引量：571H指数：12
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：福建省农科院青年科技人才创新基金福建省自然科学基金福建省科技厅国际合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术机械工程更多>>
- 利用Tet—on可诱导系统构建稳定表达PESl的SKOV3细胞株被引量：1
- 2012年
- 目的为了进一步研究PES1的生物学功能，采用Tet—on系统构建可诱导稳定表达PES1的卵巢癌细胞株SKOV3。方法采用PCR技术将PES1克隆到pTRE—Tight载体中，并进行表达鉴定。将调控质粒pTet—on转染卵巢癌细胞，经G418筛选后再转染pTRE—Tight—PES1，然后经潮霉素筛选出阳性克隆。用不同浓度的强力霉素（Dox）进行诱导后，Westernblot确定Dox的最佳诱导浓度。结晶紫实验观察Dox诱导的稳定转染pTRE—Tight-PES1的SKOV3细胞生长速度。结果将成功构建的pTRE—Tight—PES1转染SKOV3细胞后，经过筛选获得Dox可诱导表达PES1的SKOV3细胞克隆。浓度低于2mg／L的Dox可以剂量依赖性地诱导PES1表达，2mg／L可以诱导PES1高表达。Dox诱导的转染pTRE—Tight和未转染任何质粒的SKOV3生长速度无明显差异，而转染pTRE—Tight—PES1的SKOV3细胞比转染pTRE-Tight和未转染任何质粒的细胞在第g天时生长速度明显更快（P=0．001）。结论成功建立了可诱导表达PES1的SKOV3细胞，为研究PES1的生物学功能提供了有效的细胞模型。PES1表达可以增强SKOV3细胞的生长。
- 李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋
- 关键词：基因表达卵巢肿瘤
- 筛选环孢霉素A适体的SELEX技术的建立(英文)被引量：10
- 2007年
- 体外合成一个全长78个核苷酸,中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,以环孢霉素A(CsA)为靶目标,以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链酶抗生物素-辣根过氧化物酶系统,检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选并鉴定CsA特异性的适体.经过11轮的筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势.将第10轮筛选产物克隆测序并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.随机挑选的19个克隆适体,根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主,这可能是适体与CsA作用的部位.CsA特异性的适体将用于酶联法、免疫荧光法等对CsA进行检测.
- 李卫滨兰小鹏杨湘越周长邵
- 关键词：环孢霉素A适体
- 高血压脑出血患者脑脊液差异蛋白组学研究被引量：10
- 2012年
- 目的筛选出与高血压脑出血密切相关的疾病特异性蛋白，探讨其在高血压脑出血发病机制中的作用。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测69例脑脊液标本的蛋白质谱，其中健康对照者15例、高血压患者10例、高血压脑出血术前患者24例、高血压脑出血术后患者20例。比较分析高血压脑出血术前组与高血压组、高血压脑出血术前组与术后组、健康对照组与高血压组脑脊液蛋白质谱。用BiomarkWizard软件分析其差异蛋白质峰，并通过蛋白数据库检索出与高血压脑出血密切相关的疾病特异性蛋白。结果通过比较分析高血压脑出血术前组与高血压组、高血压脑出血术前组与术后组、健康对照组与高血压组脑脊液蛋白质谱，分别筛选出23个、16个、0个差异蛋白质峰。高血压脑出血术前组与高血压组问的23个差异蛋白质峰中有6个差异峰有重要意义，与这6个差异峰相对分子质量接近的蛋白质分别为B型脑钠肽、中性粒细胞防御素2、活性氧自由基、亚型戊烯半胱氨酸氧化酶、分泌载体相关的膜蛋白SCAMP4、白介素-31。结论通过分析高血压脑出血患者脑脊液蛋白质谱，可以筛选出与高血压脑出血相关的疾病特异性蛋白，其能成为预测高血压脑出血的分子标志物。
- 刘盛泽陈实张永亮林健林茂晖杨庆武陈文旭陈爱国蒋小玲林海谅兰小鹏赵猛
- 关键词：高血压脑出血脑脊液蛋白组学SELDI-TOF-MS技术
- 靶向DcR3的siRNA抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的以脂质体为载体,探讨靶向诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)的siRNA对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法裸鼠背部皮下种植结肠癌SW480细胞,建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型。针对靶标DcR3基因,利用Dharmacon公司软件设计并合成siRNA序列,通过瘤体局部多点注射脂质体与DcR3 siRNA混合物,将DcR3 siRNA转染到裸鼠背部皮下移植瘤内。同时设立阴性对照组和空白对照组。观察肿瘤治疗前后体积变化,评价DcR3 siRNA对肿瘤的抑制作用;比较肿瘤治疗前后的细胞形态学改变;免疫组织化学及RT-PCR检测DcR3基因表达;原位细胞凋亡检测肿瘤的凋亡情况。结果治疗组肿瘤体积明显小于对照组,肿瘤组织内坏死面积增大,细胞凋亡率显著增高,DcR3蛋白表达水平降低。治疗过程中裸鼠生长良好,无明显毒性反应。结论脂质体介导的DcR3 siRNA对裸鼠皮下结肠癌SW480细胞移植瘤有明显抑制、杀伤作用,细胞凋亡是DcR3 siRNA所致肿瘤细胞死亡的重要形式。
- 张胜行兰小鹏易浔飞
- 关键词：结肠癌SW480细胞DCR3裸鼠
- 猪囊尾蚴cC1亚单位疫苗毕赤酵母高表达体系的优化
- 2003年
- 杨湘越兰小鹏孙树汉
- 关键词：猪囊尾蚴疫苗毕赤酵母囊虫病菌种
- 胱抑素C在慢性肾病中的诊断价值探讨
- 目的探讨胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)在慢性肾病(ChroniC Kidney disease,CKD)中的诊断价值。方法选正常人群50例为正常对照组,另选CKD患者140例,根据其内生肌酐清除率(crea...
- 陈鑫王开宇兰小鹏
- 文献传递
- 研制海训衫对部队海训的作用特点及建议
- 2003年
- 王德春徐元斌鲜荣华兰小鹏梅珍
- 关键词：皮肤病
- 用SELEX技术筛选葡萄球菌肠毒素B特异性适配体被引量：10
- 2009年
- 目的通过指数级富集配体的系统进化技术(SELEX)筛选能与葡萄球菌肠毒素B(SEB)特异、高亲和力结合的单链DNA(ssDNA)适配体(aptamer)。方法体外构建一个长度为96个碱基的随机ssDNA文库,与靶物质SEB混合,以磁珠作为固相介质,利用热洗脱方法分离与靶标结合的核苷酸片段,通过PCR反复扩增、富集数个循环。利用荧光素标记适配体,测定筛选过程中各轮结合率;通过地高辛标记适配体,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体进行酶促显色反应,检测适配体的特异性。结果经过13轮筛选,ssDNA文库与SEB的结合百分率从1.1%提高到39.8%。制备的适配体针对SEB的特异性强,与葡萄球菌A蛋白(SPA)及牛血清清蛋白(BSA)无非特异性结合。结论成功利用SELEX技术筛选获得了特异结合SEB的高亲和力的ssDNA适配体,为金黄色葡萄球菌感染的诊断与治疗奠定了基础。
- 江丽兰小鹏曾燕丽甘龙杰
- 关键词：SEB适体磁珠
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C202及其筛选方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C202及其筛选方法和应用，核酸适配体C202的序列为：AGGGCCGAGCTCACTTGTCACGGGCACCCTAACTGGGAGGAGGCAGGATAACACCGC...
- 王开宇兰小鹏廖剑洪笑迁闫慧慧杨湘越
- 文献传递
- 基于毕赤酵母系统表达的重组自身免疫调节生物制剂的研究进展
- 免疫调节制剂的靶目标为免疫系统相关分子如细胞因子、共刺激分子等，在治疗自身免疫病中很有潜力。免疫调节制剂的生产需要合适的表达系统，而毕赤酵母系统具有便于基因操作、易培养和高密度发酵等特征；更重要的是，毕赤酵母为真核细胞，...
- 杨湘越康伟兰小鹏
- 关键词：毕赤酵母表达系统自身免疫病
