关洪鑫 作品数:5 被引量:8 H指数:2 供职机构: 中国农业科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
反向遗传技术及其在猪传染性胃肠炎病毒研究中的应用 被引量:3 2012年 对反向遗传学技术及其在RNA病毒研究中的应用进行了综述。论述了猪传染性胃肠炎病毒反向遗传技术的发展现状,并对该技术在猪传染性胃肠炎病毒的基因功能、致病机理、基因工程疫苗研究中的应用及前景等方面进行了探讨。 关洪鑫 李志勇 白银梅 柳纪省关键词:反向遗传技术 猪传染性胃肠炎病毒 O型FMDV衣壳抗原酸稳定性位点及影响其高效表达区域的鉴定 口蹄疫(Foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种人兽共患传染病,可以导致被感染的家畜生产机能严重下降,... 关洪鑫关键词:FMDV 文献传递 稳定表达T7 RNA聚合酶的BHK-21细胞系的建立 被引量:1 2013年 为了建立能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞系,利用PCR方法从BL21(DE3)细菌中扩增T7RNA聚合酶基因,并克隆到慢病毒表达系统的pLVX-Puro转移载体上,然后与Lenti-X HTX包装载体共转染Lenti-X 293T细胞系,收获高效价的慢病毒。将慢病毒感染BHK-21细胞,用嘌呤霉素多次筛选后获得抗性细胞。用构建的pET-28a-IRES-EGFP检测质粒转染得到的抗性细胞,有荧光表达的细胞即可以稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系。结果表明:构建的BHK-T7株细胞能稳定表达T7RNA聚合酶。 关洪鑫 李志勇 高鹏 许生智 白银梅 柳纪省关键词:T7 RNA聚合酶 细胞系 狂犬病病毒aG株G基因的克隆与生物信息学分析 被引量:3 2012年 为了研究狂犬病病毒aG株的进化情况,分析狂犬病病毒的遗传变异和基因功能,采用BHK-21细胞培养繁殖狂犬病病毒aG株,运用RT-PCR扩增G基因,将其与pMD18-T simple vector连接后转化JM109感受态细胞,经PCR扩增和测序分析进行鉴定,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示,狂犬病病毒G蛋白基因全长1 575bp,包含1个阅读框(ORF),编码524个氨基酸。生物信息学分析表明,G蛋白的分子质量为58 377.22u,理论等电点为7.080,半衰期为30h(体外哺乳类网状细胞),不稳定系数为42.99,脂肪指数为88.45,总平均亲水性为-0.106,最大疏水性为3.489,最小疏水性为-2.600,信号肽序列为1~19位氨基酸残基,跨膜区结构分析显示该蛋白为跨膜蛋白,预测可能包含有4个N-糖基化作用位点,2处基于cAMP和cGMP的蛋白激酶磷酸化位点,13处蛋白激酶C磷酸化位点,12处酪蛋白Ⅱ磷酸化位点;1处酪氨酸激酶磷酸化位点;9处N豆蒄酰化位点;1个酰胺化位点。系统进化分析表明,aG株G蛋白与DRV株进化距离最近。 焦文强 关洪鑫 殷相平 柳纪省关键词:狂犬病病毒 G基因 生物信息学分析 家蚕杆状病毒表达系统及其在口蹄疫疫苗研究中的应用 被引量:1 2013年 口蹄疫(Foot and mouth disease, FMD)是由FMD病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性人兽共患传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须通报的动物传染病,我国将其列为一类动物传染病。该病传播途径多,传播速度快。目前除了北美、澳洲等地区外,世界范围内多次暴发流行。最近几年,一些已经消灭FMD的国家又再次爆发,FMD防制形势依然严峻。在FMD防制中,加强流行病学监测和采取疫苗免疫是防制其发生的主要措施和关键环节。因此,特异性诊断抗原的制备和新型疫苗的开发就显得尤为重要。 关洪鑫 李志勇 白银梅 柳纪省关键词:口蹄疫疫苗 世界动物卫生组织 人兽共患传染病 动物传染病 流行病学监测