刁世勇
- 作品数：18 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒载体介导的血小板第4因子p17-70 cDNA对荷瘤裸鼠抗血管新生的作用被引量：3
- 2003年
- 目的 以腺病毒做载体研究血小板第 4因子 (PF4)氨基末端改构体cDNA(p1 7 70cDNA)的荷瘤裸鼠体内、外抗血管新生作用。方法 将p1 7 70cDNA克隆至AdEasyTM系统 ,转染 2 93细胞包装成含p1 7 70cDNA的腺病毒载体。用RT PCR方法证明有p1 7 70cDNA外源基因插入 ,Western印迹分析KB细胞 (人上皮细胞癌 )表达的目的蛋白P1 7 70肽。用此病毒直接转导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并将此病毒注射到负有KB细胞的荷瘤裸鼠体内。以内皮细胞的增殖情况及瘤块体积、质量、瘤体内微血管数分析P1 7 70肽的抑制血管新生的作用。结果 转导p1 7 70cDNA病毒后的HUVEC增殖较含空载体病毒对照减低 58% ,注射病毒 2周后的实验组、空载体组及PBS对照组瘤块质量分别为 (0 0 86± 0 .0 54)g ,(0 .1 71± 0 .0 76)g和 (0 .1 95± 0 .0 67)g ,体积分别为 (1 6 .7± 5 .2 )mm3 、(36 .5± 2 3 .7)mm3 和 (41 .5± 1 2 .2 )mm3 ,免疫组化示微血管计数分别为 9.5± 1 .2 ,30 .6± 2 .6 ,31 .3± 2 .5 ,实验组、空载体病毒组及PBS对照组之间差异有显著性 (P <0 0 5) ,而空载体病毒与PBS两个对照组之间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论 腺病毒载体介导的P1 7 70肽体外具有抑制内皮细胞增殖活性 ,裸鼠体内具有抑制血管新生从而抑制肿瘤生长?
- 吴立华宋国丽刁世勇蔡英林李妍涵李尚珠杨仁池韩忠朝
- 关键词：腺病毒载体血小板第4因子血管新生
- 抗人癌蛋白iASPP的单克隆抗体及应用
- 本发明公开了一种抗人癌蛋白iASPP的单克隆抗体及应用，制备能与癌蛋白iASPP的两种异构体在细胞内和细胞外特异性结合的小鼠的单克隆抗体。提供了针对筛选iASPP单克隆抗体时所用抗原的载体构建、蛋白表达和纯化的方法，以及...
- 王建祥王敏刁世勇饶青张新伟廖晓龙
- 文献传递
- RNAi阻断癌基因iASPP在白血病中的作用研究
- 王敏王建祥张新伟邢海燕刘航刁世勇唐克晶田征
- 1、检测了76例急性白血病(AL)患者iASPPmRNA表达情况，发现初治AL患者骨髓细胞iASPPmRNA异常高表达，高于正常人和缓解期AL患者，提示iASPP高表达和白血病有关。2、设计并合成了四对iASPP特异性R...
- 关键词：
- 关键词：白血病
- 一个新的iASPP异构体的克隆及与p53的相互作用
- p53凋亡促进蛋白(apoptosis stimulating protein of p53,AsPP)家族抑制性成员(inhibitory member of ASPP of p53 family,iASPP)是一个新...
- 张新伟刁世勇刘航邢海燕饶青王敏王建祥
- 关键词：IASPPP53转录
- 文献传递
- 癌基因iASPP的克隆、表达与纯化被引量：4
- 2005年
- iASPP是新近发现的高度保守的p5 3相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NF κBp65亚基和p5 3功能,进而抑制NF κB的转录调节和p5 3对凋亡的调节功能。利用RT PCR方法从人白血病细胞系U 937中克隆出癌基因iASPP ,将其克隆至原核表达载体pET2 8a( + )中,成功构建iASPP表达载体PIAF ,重组质粒读码框和序列与预期一致。在IPTG诱导下,重组载体大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,表达产物经SDS PAGE和Westernblot方法分析证实系iASPP融合蛋白。利用Ni离子鳌合层析的方法纯化iASPP融合蛋白,经SDS PAGE鉴定其纯度超过80 %。
- 刁世勇张新伟饶青邢海燕陈森王建祥王敏
- 关键词：癌基因IASPP克隆纯化P53抗体
- PUMA的研究进展被引量：4
- 2005年
- PUMA是新近发现的p53的靶基因,属于bcl-2家族的BH-3亚家族成员,其蛋白产物定位于细胞的线粒体上,参与p53依赖和非依赖途径的促凋亡过程。由于在放化疗、许多病理性凋亡和肿瘤发生过程中发挥着重要作用,提示PUMA有可能成为人类肿瘤和其他疾病治疗的新靶点。
- 刁世勇王敏
- 关键词：放化疗人类肿瘤新靶点病理性家族成员
- 血小板第4因子体外保护造血干/祖细胞抗放射的实验研究被引量：3
- 2001年
- 马月霞韩忠朝刁世勇张丽艳
- 关键词：血小板第4因子抗放射
- 癌蛋白iASPP对小鼠骨髓细胞增生促进作用研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究 iASPP(一个新发现的 p53家族抑制性成员)在小鼠骨髓细胞中过表达对细胞增生作用的影响。方法构建反转录病毒载体,通过基因转导方法,使小鼠骨髓细胞过表达人类 iASPP或(和)突变的 N-Ras,采用集落形成实验检测细胞体外增生能力的变化。结果转导 iASPP 的小鼠骨髓细胞与转导空载体对照组相比集落形成能力显著增强(P<0.01),转导突变的 N-Ras 也能提高小鼠骨髓细胞的体外增生能力,二者差异无统计学意义(P>0.05),但 iASPP 联合突变的 N-Ras 可使集落的数量显著多于单基因组(P<0.05)及空载体对照组(P<0.01),而且集落体积增大。结论癌蛋白 iASPP 可以显著提高小鼠骨髓细胞的体外增生能力,并且与突变的 N-Ras 具有协同作用,因而 iASPP 有望成为研究肿瘤及白血病治疗的新靶点。
- 邢海燕张新伟刘向荣唐克晶田征刁世勇饶青王敏王建祥
- 关键词：癌基因蛋白质类IASPP反转录病毒
- 全文增补中
- 血小板第四因子在原核中的高效表达、分离纯化及活性测定
- 2002年
- 构建重组表达质粒pET - 32c PF4 ,并在原核中进行表达 ,以探讨其对白血病细胞系 (HEL)细胞增殖的作用。方法 :通过PCR方法从含有PF4基因的PQE - 6 0 PF4质粒中扩增PF4 ,用NcoⅠ HindⅢ双酶切 ,克隆到原核表达质粒pET - 32C中 ,使之在BL2 1表达 ,Ni-ChelatingSepharose亲和柱纯化 ,用细胞集落形成方法研究重组PF4对HEL的抑制作用。结果 :菌株筛选后在大肠杆菌中获得可溶性高效表达 ,重组PF4占菌体总蛋白的 2 2 %。肠激酶酶切除去N -端融合部分 ,获得了高纯度的重组人血小板第四因子 (rh -PF4 ) ,纯度为 95%以上。活性实验发现重组PF4可抑制HEL细胞集落的形成 ,抑制率为 4 7%。结论 :原核表达质粒pET - 32C可高效可溶性表达PF4 ,重组PF4对HEL细胞的增殖有抑制作用。
- 顾洁刘拥军卢士红蔡英林刁世勇韩忠朝
- 关键词：血小板第四因子原核分离纯化活性测定
- 抗人iASPP单克隆抗体的制备及研究应用被引量：1
- 2008年
- 脾脏内注射iASPP-SV真核表达质粒免疫Balb/c小鼠3 d后,取小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞(NS1)进行常规融合。应用原核表达的iASPP-SV全长及iASPP-SV片段His-tag融合蛋白进行间接酶联免疫吸附方法筛选阳性克隆,并对亚克隆后的阳性杂交瘤细胞株所制备的腹水进行了初步生物学特性鉴定。结果获得了6株可稳定分泌特异性抗人癌蛋白iASPP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并可以应用于Western Blot、免疫组织化学等实验。因此,本研究成功制备了抗人癌蛋白iASPP的单克隆抗体。
- 刁世勇廖晓龙佘鸣张新伟饶青王敏王建祥
- 关键词：IASPPP53
