刘保才
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人HPPCn单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的：制备高灵敏度的抗人HPPCn单克隆抗体（mAb），以用于HPPCn的功能研究及其疾病相关性研究。方法：用重组蛋白免疫雌性BALB／c小鼠，采用常规杂交瘤技术进行细胞融合，经ELISA法进行阳性克隆筛选、通过有限稀释法进行亚克隆，获得稳定分泌抗人HPPCnmAb的细胞株。采用间接ELISA、Western blot、Ig亚类快速定性试纸分析法等鉴定抗体的生物学特性；通过细胞免疫荧光实验观察了HPPCn蛋白的细胞定位。通过噬菌体肽库技术分析抗体所识别的抗原表位。结果：得到了1株稳定分泌抗人HPPCn抗体的杂交瘤细胞株，命名为W2-D5。经Ig亚类分析确定，该细胞株分泌的抗体属于IgG1亚类。间接ELISA检测表明，该抗体检测HPPCn的极限为0．1μg／L；Western blot结果显示，该抗体能特异性识别HPPCn。细胞免疫荧光实验，证实了HPPCn蛋白定位在细胞核。通过肽库筛选及表位分析认为，该抗体识别的表位可能为HPPCn7-13（IHLELRN）。结论：成功地获得了抗人HPPCn的特异性mAb。
- 霍景瑞姚西宁刘英富刘保才吴峰范国才王清明
- 关键词：单克隆抗体效价噬菌体肽库
- 基于抗原表位制备抗人GP73单克隆抗体
- 2010年
- 目的：制备抗GP73蛋白的单克隆抗体（mAb）。方法：将GW／3蛋白N末端的肽段（AAAERGAVELK）展示于T7噬菌体表面，扩增重组噬菌体作为抗原免疫小鼠，制备抗体。通过ELISA法检测小鼠血清抗体的效价，筛选分泌抗GP73蛋白抗体的杂交瘤细胞株；通过ELISA、Western blot等方法检测mAb的特异性。结果：利用表面展示GP73抗原表位的重组噬菌体为抗原免疫小鼠，通过细胞融合和筛选得到了能识别GP73蛋白的mAb，且特异性较好。结论：将蛋白质抗原的合适抗原表位展示在T7噬菌体表面，用这种重组噬菌体作为替代抗原可以制备识别全蛋白的mAb。
- 姚西宁霍景瑞刘英富刘保才吴峰范国才王清明
- 关键词：噬菌体展示GP73抗原表位
- 肝癌候选标志物HCCR单克隆抗体的制备和鉴定被引量：7
- 2011年
- 目的:制备肝癌候选标志物HCCR蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:重组表达HCCR-1167-360蛋白用于动物免疫,用含有HCCR蛋白抗原表位YLGTRR的重组蛋白(Ep-HCCR)检测血清抗体效价及筛选阳性克隆。通过ELISA、Western blot、免疫荧光和免疫组化方法鉴定制备的HCCR抗体的性质。结果:获得1株分泌HCCR抗体杂交瘤细胞株,通过ELISA方法测定抗体的亲和力常数为5.4×106L/mol;Western blot结果显示,该抗体能特异识别肝癌HepG2细胞中HC-CR-1和HCCR-2蛋白;免疫荧光检测显示,HCCR蛋白主要分布在细胞质和细胞膜中;免疫组化检测到肝癌组织中有HCCR蛋白表达但在正常组织中没有。结论:成功制备了1株抗HCCR特异性mAb,为建立基于HCCR的肝癌检测方法奠定了基础。
- 刘保才霍景瑞刘英富范国才王清明
- 关键词：肝癌HCCR单克隆抗体
- 肝癌候选标志物HCCR单克隆抗体制备及初步应用
- 原发性肝癌是常见的恶性肿瘤,每年约有50万人被诊断出肝癌,在西方发达国家发病率在10?20/10万,而在亚洲、非洲一些发展中国家发病率则超过20/10万,且发病率逐年上升[1]。肝癌发病隐匿、早期无症状或症状不明显,待发...
- 刘保才
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