- 聚合酶链反应(PCR)检测水中钩体DNA方法的建立和初步应用
- 1999年
- 目的:为了建立一个检测水中钩体DNA的技术方法。方法:本研究采用了根据1993年C.Gravekamp设计的引物G_1G_2序列自行合成的引物G_1G_2建立了检测致病钩体DNA的PCR方法。运用此方法并结合“优筛法”对采自云南河口、蒙自等地区108份水样进行检测,并与分离培养后经中国药品生物制品检定所鉴定结果进行了比较。结果:两组方法检测所有水样呈阴性,其精确度和一致性达100％,但分离培养方法漏检率为8.3％(9/108)。结论:建立了PCR检测水中钩体DNA方法。此方法简单、快速、准确,适用于一般实验室及大规模水样钩体DNA的检测,值得推广应用。
- 刘燕孟佩云庄国正魏文斗尹惠琼杨美峰景芳
- 关键词：水样
- 福尔马林固定的猴淋巴组织中HIV-1DNA的扩增
- 2003年
- 本文尝试从福尔马林固定的猴淋巴组织提取HIV - 1CNA ,并用PCR方法进行扩增和对扩增产物HIV - 1DNA进行检测。结果认为 ,采取从福马林固定标本中提取PNA的方法是可行的。在提取DNA中 ,采用过量TE(pH9.0 )长时间浸泡标本 ,并适当提高蛋白酶K(10 0 0 μq/ml)和SDS(2 %～ 3% )的浓度 ,可有助于DNA的提取 ;同时适当提高提取液的pH值 (pH 9.0 ) ,对DNA具有一定的保护作用。
- 刘燕倪燕萍安克贵
- 关键词：福尔马林聚合酶链反应
- 云南边防某地疟疾流行病学调查
- 1999年
- 云南边防多在北纬25°线以南的高度疟疾流行地区,近年来驻军部队疟疾发病虽较低,但周围居民终年均有病例发生,为了解目前居民疟疾流行特点,为指导部队疟疾防治工作提供依据,我们对某边防驻军医院收治的56例疟疾患者进行了调查分析,报告如下。
- 杨洪霞孟佩云刘燕尹慧琼魏文斗
- 关键词：疟疾流行病学抗药性
- 钩端螺旋体种特异性抗原的提取被引量：1
- 2001年
- 钩端螺旋体病(简称钩体病)是流行广泛的自然疫源性人兽共患病.由于其群(型)复杂,流行菌株众多,且有地区性即有许多地方株的存在,预防效果不佳,危害极大.目前主要用钩体疫苗进行预防,现已发展到第三代,第一代是全细胞死菌苗,虽有一定效果,但存在免疫力低下,副作用大等缺陷.第二代是钩体外膜菌苗[1]、脂多糖疫苗[2]、红细胞致敏物菌苗[3]及核糖体提取物疫苗[4],与全细胞菌苗相比,具有化学成份单纯,免疫效果好,毒性较小等优点,但仍属群(型)特异性疫苗,故需制备多价疫苗用于预防,为此许多学者正致力于钩体属(种)特异性疫苗的研制[5].近年有研究者发现[6],分子量为39KD的疏水外膜蛋白为问号状钩体所独有,是其稳定的抗原分子,有种特异性.本实验主要目的是想通过一系列实验建立一种在普通实验室条件下提取39KD钩体外膜蛋白的方法,为其进一步应用提供实验技术路线.现报告如下:
- 刘燕孟佩云尹惠琼周卫国庄国正
- 关键词：钩端螺旋体种抗原
- 赖型钩体弱毒株外膜蛋白基因的序列分析
- 2002年
- 目的 :探讨赖型钩体弱毒株外膜蛋白基因的特点及其与强毒株的差别。方法 :对问号钩体赖型 5 660 1株的外膜蛋白基因进行PCR扩增得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列测定 ,并与我国特有的强毒株 0 17株进行了Omp11基因核苷酸序列、推导的氨基酸序列以及亲水性和疏水性和二级结构的比较。结果 :赖型钩体 5 660 1株和 0 17株Ompl1基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列同源性均为 99%。结论 :赖型钩体 5 660 1株和 0 17株Ompl1基因核苷酸序列存在较小差别 ,可能与毒力强弱有关。另外 ,两株钩体Ompl1基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列同源性很高 。
- 邱薇孟佩云尹惠琼范泉水李刚山刘燕王双印
- 关键词：钩端螺旋体外膜蛋白基因
- 浅析钩端螺旋体菌种保存方法
- 2004年
- 钩端螺旋体病(简称钩体病)是流行广泛的自然疫原性人兽共患病，是我国法定监测的25种甲乙类传染病之一，在1998年洪灾中呈现出一定流行趋势，据1993年统计，该病死亡率排在我国十大传染病的第五位。在有关科研、教学和生产中经常使用钩端螺旋体菌种，能否长期保存钩端螺旋体菌种，具有重要意义。本文旨在对近年来国内外钩端螺旋体菌种保存方法的研究进展加以综述，供参考。
- 黄勇唐安建刘燕
- 关键词：钩端螺旋体菌种保存甲乙类传染病钩体病人兽共患病国法
- 钩端螺旋体分类方法研究进展
- 2000年
- 钩端螺旋体是一种独特的微生物，具有庞大的群体迅速的繁殖力和旋转运动能力，能使人和许多动物感染，因此，钩端螺旋体病(简称钩体病)是世界范围内的疾病，也是地理分布最广泛的人兽共患病之一。
- 刘燕尹惠琼孟佩云
- 关键词：钩端螺旋体微生物分子杂交技术
- 犬型钩端螺旋体抗血清被动免疫保护力初步测试
- 2003年
- 目的 :拟通过大型钩端螺旋体 5 6 6 0 3株 39KD抗原抗血清的制备及其抗血清免疫保护力测试 ,为钩体病的诊断与防治研究提供资料。方法 :将 39KD抗原采用四种方法接种家兔制备抗血清 ,然后通过被动免疫途径 ,对其抗血清免疫保护力进行测试。结果 :四种方法接种家兔制备的抗血清凝集效价均在 2 0 0左右 ,四者无显著差异。除 1株非致病钩体PatocⅠ外 ,其抗血清能保护豚鼠免受 10株致病性钩体 ( 10群 10型 )的攻击。结论 :犬型钩体 39KD抗原抗血清 ,具有很好的动物免疫保护作用 ,具有种特异性 ,值得进行深入的研究。
- 刘燕孟佩云庄国正尹惠琼周卫国魏文斗
- 关键词：抗血清被动免疫凝集抗体钩端螺旋体病免疫保护作用
- 3株钩端螺旋体外膜蛋白基因的序列分析被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨钩端螺旋体外膜蛋白基因在钩体遗传分类中的作用。方法 对我国的 2株问号钩体赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株的外膜蛋白基因Ompl1进行PCR扩增 ,得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列分析。测序的 2株钩体与流感伤寒型RH5 2株进行了核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株钩体Ompl1基因核苷酸序列与流感伤寒型RH5 2株的同源性分别为 89%和 80 % ,推导的外膜蛋白氨基酸序列的同源性分别为 92 %和88%。由此可以看出 5 6 6 0 1株、5 6 6 0 2株与RH5 2株分别属于不同的血清群 ,这与Yasuda的遗传分类相一致。结论 我国的赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株及流感伤寒型RH5 2株Ompl1基因的核苷酸序列存在一定差别 。
- 邱薇孟佩云尹惠琼范泉水李刚山刘燕王维祥王双印
- 关键词：钩端螺旋体外膜蛋白基因
- 犬型钩端螺旋体39KD抗原提取和免疫保护力初步测试
- 2001年
- 刘燕孟佩云等
- 关键词：免疫保护力钩端螺旋体凝胶过滤
