刘玲英
- 作品数：75 被引量：139H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学一般工业技术更多>>
- 表皮干细胞向汗腺细胞分化的表型改变及其通路机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)诱导分化为汗腺细胞(sweat gland cells,SGCs)过程中表型的改变及其通路的调控机制。方法取健康成人包皮,采用中性蛋白酶消化后高浓度Ⅳ型胶原黏附法分离培养获得ESCs,行β_1整合素、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及p63免疫荧光染色法鉴定;取健康成人全层皮肤,采用Ⅱ型胶原酶消化法分离提取汗腺组织,体外增殖培养SGCs,行CK7、CK18、CK19和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫荧光法鉴定。取第2代ESCs分为4组:A组将ESCs及SGCs两种细胞通过Ttranswell共培养系统共培养,B组通过单纯添加汗腺上清液培养ESCs,C组在A组基础上加入浓度为60 ng/mL的EGF,D组在A组基础上加入浓度为10 mmol/L的PD98059。分别通过倒置相差显微镜进行细胞形态学观察、流式细胞术检测ESCs表型阳性率及Western blot检测分化过程中的信号通路机制。结果经细胞形态学观察及免疫荧光染色鉴定提示培养细胞为ESCs和SGCs。倒置相差显微镜观察示,A、C、D组培养后细胞形态变化相似,9 d后细胞开始出现扁平多角形结构改变;B组形态变化较慢培养12 d后与其他3组结构相似。流式细胞术结果示,与B组比较,A组Transwell共培养系统共培养后,ESCs的β_1整合素阳性率显著下调、CEA阳性率显著上调(P<0.05);C组加入EGF可降低共培养系统中ESCs的β_1整合素下调和CEA上调,D组加入PD98059可增强共培养系统中ESCs的β_1整合素下调和CEA上调,A、C、D组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测示,4组均有较高水平细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)表达,但B组明显低于其他3组(P<0.05);磷酸化-ERK表达A组最高、C组最低,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论处于SGCs生长环境中时,通过Transwell共培养系统共培养,ESCs可经诱导分化为SGCs,其表型发生相应改变;通过对丝裂原活化蛋白激�
- 陈甫寰岳晓彤宋慧锋柴家科何秀叶王统民刘玲英
- 关键词：表皮干细胞汗腺细胞细胞分化表型
- hUCMSC来源exosomes在严重烧伤过度炎症反应中的机制研究
- 本文研究人脐带间充质干细胞(human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,hUCMSC)来源exosome对严重烧伤大鼠过度炎症反应的调控.建立30％面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,经尾静...
- 李晓柴家科刘玲英杨靖郁永辉马丽
- 关键词：烧伤炎症反应白细胞介素
- 外源性肺泡表面活性物质对重度烧冲复合伤大鼠急性肺损伤的治疗作用被引量：13
- 2015年
- 目的 观察外源性肺泡表面活性物质对重度烧冲复合伤大鼠急性肺损伤的治疗作用.方法 健康雄性SD大鼠180只,用随机数表法分为假伤组、治疗组、对照组各60只,每组致伤前0h及伤后6、24、48、72 h共5个观察时相点各12只.进行如下处理：（1）假伤组：脱毛12 h后,以3％戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔内注射麻醉,将背部脱毛区域置入37℃水中持续12s;（2）治疗组：参照既往大鼠重度烧冲复合伤模型,致伤后立即经气管插管滴注外源性肺泡表面活性物质即猪肺磷脂注射液2 ml/kg;（3）对照组：参照既往大鼠重度烧冲复合伤模型,致伤后立即经气管插管滴注等量的生理盐水2 ml/kg.分别于致伤前0h及伤后6、24、48、72 h监测大鼠动脉血氧分压（PaO2）及二氧化碳分压（PaCO2）,测定各组大鼠肺功能,留取肺组织,行病理观察.结果 除去实验过程中的死亡损耗后,最终3组5个时相点分别均衡纳入8只大鼠进行统计学分析.PaO2：对照组6、24、48、72 h各时相点均显著低于假伤组[（69.55±5.11）、（62.05±6.54）、（53.24±7.65）、（50.00±7.45）比（93.75±3.41）、（94.25±2.19）、（93.63±2.33）、（93.25±1.83） mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）,均P＜0.05];治疗组6h接近假伤组[（92.63±3.74）比（93.75±3.41）mmHg,P=0.594];对照组6h时即降至70 mmHg左右,随后逐渐下降,而治疗组各时相点均显著高于对照组[（92.63±3.74）、（87.50±3.34）、（78.75±3.11）、（71.38±3.74）比（69.55±5.11）、（62.05±6.54）、（53.24±7.65）、（50.00±7.45） mmHg,均P＜0.05].PaCO2：治疗组在6、24、48 h显著低于对照组[（45.50±6.79）、（49.38±7.52）、（54.13±4.82）比（53.25±2.76）、（59.50±6.61）、（63.60±7.33） mmHg,均P＜0.05],72 h时而治疗组与对照组均显著高于假伤组[（59.63±6.87）、（68.88±6.85）比（36.38±1.85） mmHg,均P＜0.05],而治疗组与对照组差异无统计学意义（P =0.051）.�
- 李百玲柴家科胡泉张旭龙张东海马丽郁永辉刘玲英
- 关键词：肺表面活性物质相关蛋白质类烧冲复合伤急性肺损伤
- 人脐带间充质干细胞不同分离方法的效果比较被引量：7
- 2013年
- 目的对比分析分离人脐带间充质干细胞（MSCs）常用方法的效果，筛选比较高效的分离方法。方法采集足月剖宫产手术胎儿的脐带组织（n=15），充分洗涤后去除3条脐血管及脐带外膜，将其剪碎至1mm^3的组织块，洗涤离心确定组织块的总体积，平均分为4组，分别采用组织块法和单纯胶原酶Ⅱ消化法、胶原酶Ⅱ＋胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ＋透明质酸酶消化法，分离获得人脐带MSCs，行锥虫蓝染色计数细胞；倒置相差显微镜观察细胞形态；使用免疫荧光染色检测细胞表面标志物CDl05、CD90、CD73、CD31、CD44、CD45、人类白细胞抗原Ⅰ（HLA—Ⅰ）和人类白细胞抗原Ⅱ类分子（HLA—DR）的表达情况，进行细胞鉴定；噻唑蓝（MTY）法检测细胞的增殖曲线。结果组织块法和单纯胶原酶Ⅱ消化法、胶原酶Ⅱ＋胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ＋透明质酸酶消化法4种方法均可分离获得干细胞，但获得细胞的数量和增殖能力不同。4种方法获得的细胞数量分别为（5．44±0．21）×10^5、（4．03±0．24）×10^5、（4．91±0．33）×10^5和（5．94±0．40）×10^5，胶原酶Ⅱ＋透明质酸酶消化法显著多于其他3种方法，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。组织块法种植后第9～11天观察到细胞在组织块周围生长，而其他3种方法种植后第2天即可见贴壁生长的细胞。4种方法细胞达到90％-95％融合的时间分别为（18．5±3．5）、（8．0±1．0）、（7．5±1．5）、（3．5±0．5）d，胶原酶Ⅱ＋透明质酸酶消化法显著短于其他3组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。组织块法原代细胞的形态多为多角形，不规则，细胞的体积较大，单纯胶原酶Ⅱ消化法和胶原酶Ⅱ＋胰蛋白酶消化法原代细胞的形态均较短小，而胶原酶Ⅱ＋透明质酸酶消化法细胞形态呈细长的梭形。4种方法得到的细胞均阳性表达CDl
- 刘玲英柴家科段红杰侯玉森尹会男郁永辉胡泉郝岱峰冯光李涛杜俊东
- 关键词：间质干细胞脐带胶原酶类胰蛋白酶细胞分离
- 严重烧伤诱导过度炎症反应治疗措施的研究进展被引量：7
- 2014年
- 复习目前国内外关于严重烧伤诱导过度炎症反应的基础和临床研究,探讨其相关治疗措施,并进行分析总结。严重烧伤诱导过度炎症反应的治疗措施包括液体复苏治疗、手术治疗、药物治疗、细胞治疗以及低温治疗、高压氧治疗、血液净化治疗、营养支持等其他治疗措施,这些治疗措施均能从不同的角度发挥抗炎作用。因此,根据患者的病情,综合合理地运用上述治疗措施,从而达到最佳的治疗效果。
- 冯瑞刘玲英
- 关键词：烧伤系统性炎症反应综合征药物治疗细胞治疗
- 间充质干细胞在烧伤创面修复中的研究进展被引量：3
- 2020年
- 烧伤是皮肤软组织损伤较常见的病因,给患者带来极大的生理及心理负担。目前临床上对大面积烧伤的救治仍有较大的局限性。近年来,关于干细胞治疗皮肤烧伤创面的组织工程研究备受关注。本文归纳、总结间充质干细胞治疗烧伤创面的临床前研究和临床试验性研究,并对MSC应用于烧伤创面修复的研究进展作一综述。
- 王宏宇刘玲英巴特
- 关键词：烧伤伤口愈合间质干细胞
- “护理实习”在烧伤专业研究生培养中的重要性探讨
- 2017年
- 针对烧伤专业医疗工作的特点和特殊性及研究生培养质量关乎医疗发展水平,本文分析了"护理实习"在烧伤专业研究生培养中的重要作用,强调了"护理实习"对于烧伤专业研究生提高医疗水平、增强医患及医护沟通能力、提高综合素质中的重要性,剖析了现状,提出了"护理实习"对于烧伤专业研究生整体水平提升的重要意义。
- 杨龙龙刘玲英柴家科
- 关键词：护理实习研究生培养
- 芦荟多糖对体外培养人成纤维细胞增殖和分泌透明质酸与羟脯氨酸的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:观察芦荟多糖对体外培养人成纤维细胞增殖及其分泌透明质酸与羟脯氨酸水平的影响,并探讨其在创面愈合过程中的可能作用机制。方法:将体外培养人成纤维细胞随机分为芦荟多糖组(25、50、100、200和400mg/L)和对照组。通过甲基噻唑基四唑法检测细胞增殖状况,流式细胞技术检测细胞周期,吖啶橙-溴乙锭(acridine orange-ethidium bromide,AO-EB)染色法检测细胞生存状况,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率检测细胞损伤程度,3H脯氨酸掺入法观察细胞胶原合成情况,酶联免疫吸附测定法检测细胞分泌透明质酸和羟脯氨酸的水平。结果:各个浓度芦荟多糖均能促进细胞增殖,并于细胞培养的第5天达到高峰。与对照组相比,各个浓度芦荟多糖组G0/G1期细胞所占百分率显著下降,而G2/M期和S期细胞所占百分率显著上升(P<0.01);AO-EB染色显示各浓度芦荟多糖组细胞核着绿色荧光并呈正常结构,未发生死亡或凋亡;各个浓度芦荟多糖组LDH漏出率均呈不同程度的下降(P<0.05);芦荟多糖能明显促进细胞内胶原合成及透明质酸和羟脯氨酸的分泌(P<0.05)。结论:芦荟多糖可通过促进人成纤维细胞增殖和透明质酸与羟脯氨酸等细胞外基质的分泌,加速创面愈合。
- 刘玲英陈晓东吴伯瑜江琼
- 关键词：芦荟多糖成纤维细胞透明质酸羟脯氨酸
- 人脐带间充质干细胞不同分离方法的比较
- 目的 对比分析分离人脐带间充质干细胞(MSCs)常用方法 的效果,筛选比较高效的分离方法 。方法 采集足月剖腹产手术胎儿的脐带组织(n=15),充分洗涤后去除3条脐血管及脐带外膜,将其剪碎至1mm3的组织块,洗涤离心确定...
- 刘玲英柴家科段红杰侯玉森尹会男郁永辉胡泉郝岱峰冯光李涛杜俊东
- 死亡受体介导的细胞凋亡在严重烧伤大鼠膈肌萎缩中的作用
- 目的 及意义严重烧伤病人常伴随呼吸功能障碍。呼吸肌是完成外呼吸功能的动力,呼吸肌萎缩可导致呼吸减弱,通气不足,抑制咳嗽反射,使肺部感染的机会增加,呼吸机脱机困难,严重时可导致呼吸衰竭,甚至死亡。严重烧伤后呼吸肌萎缩的机制...
- 段红杰柴家科张旭龙胡泉刘玲英冯永强马丽
- 关键词：烧伤膈肌细胞凋亡肌萎缩
