刘道永
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性被引量：11
- 2006年
- 目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR^(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR^(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。
- 孙冰生叶青海刘道永任宁逄锦忠雷科锋张巨波林国领武金才李国才钦伦秀
- 关键词：骨桥蛋白RNA干扰
- 肝细胞癌病人外周血中循环肿瘤细胞的检测和临床意义
- 原发性肝癌(主要是肝细胞癌，hepatocellular carcinoma，HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一，位居全球恶性肿瘤发病率的第5位，发病率仍持续升高。目前已成为我国第二位癌症死亡原因。尽管近几十年以来在肝...
- 刘道永
- 关键词：肝细胞癌循环肿瘤细胞检测比较基因组杂交全基因组扩增激光捕获显微切割
- 肝癌端粒酶活性与P27和氧化应激相关性研究
- 肝细胞癌(HCC)是中国最常见的恶性肿瘤之一,发病率呈升高趋势,尚不清楚肝硬变(LC)如何转化为肝癌.近年发现端粒酶激活、肿瘤抑制基因及其产物表达异常和氧化应激增强可能是细胞癌变和肿瘤进展的重要机制.目前采用TRAP-E...
- 刘道永
- 关键词：端粒酶活性P27蛋白氧化应激肝肿瘤肝硬变
- 文献传递
- 比较基因组杂交芯片技术对肝癌组织中骨桥蛋白不同表达肿瘤细胞基因组的研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨肝癌组织中骨桥蛋白（osteopontin，OPN）不同表达肿瘤细胞基因组的差异及其表达与临床病理特征的关系。方法免疫组化染色分析7l例肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的OPN表达，激光捕获显微切割和比较基因组杂交芯片分析肝癌中不同OPN表达肿瘤细胞基因组的改变。结果71例HCC中，OPN阳性表达29例（42．9％），表现为不均匀分布，阳性表达多位于癌巢周边、特别近肿瘤血管处，亦可见小癌结节呈广泛颗粒状表达，另有14例（19．7％）癌巢外的肝硬化组织呈OPN阳性染色；OPN过表达与肿瘤分化、脉管侵犯、肝内转移有关；OPN阳性与OPN阴性肿瘤细胞基因组相比有4q13．1q13．3、4q21．23—22．1、13q32．1-q32．3等拷贝数增加，其中阳性细胞中肿瘤相关基因如SMR3B、MUC7、EPHA5、SPP1（OPN）、CLDNIO等拷贝数明显增加。结论OPN提高肝癌细胞侵袭性而促进转移，可能与肿瘤细胞增殖、肝硬化的恶性转化有关。OPN阳性、阴性表达的肿瘤细胞之间存在肿瘤异质性。
- 武金才孙冰生刘道永李国才史炯任宁叶青海钦伦秀
- 关键词：肝细胞骨桥蛋白肿瘤异质性
- 肿瘤转移抑制基因HTPAP的Haploview单体型构建分析被引量：1
- 2008年
- 目的通过单核苷酸多态性（SNP）检测对肿瘤转移抑制基因HTPAP进行单体型构建和分析。方法取100例肝细胞癌（HCC）新鲜标本，应用激光捕获组织显微切割获取纯肝癌细胞、提取DNA，对HTPAP基因上已登录的15个SNP位点进行检测，应用Haploview软件构建单体型。结果15个SNP位点中，有8个表现为单态、5个呈多态性、2个未能检测出。对100例肝细胞癌的该5个多态位点进行单体型构建后发现11种单体型，其中3种单体型（C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G）最常见，占87％，另外8种单体型占13％。4个SNP（rs7007097、rs3830326、rs1149、rs3739252）表现为强连锁不平衡关系，尽管rs11539529出现重组现象，但从整体看还是属于同一个单体型块。结论肿瘤转移抑制基因HTPAP在肝癌中常见C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G三种单体型，针对不同单体型研究分析可能为肝癌转移复发、预后预测提供新的途径和指标。
- 武金才任宁李国才孙冰生刘道永史炯戴春董琼珠孙海晶叶青海钦伦秀
- 关键词：肝细胞单核苷酸多态性基因
- 骨髓间充质干细胞对人肝癌细胞系MHCC97-H增殖能力的影响被引量：6
- 2008年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（MSC）对肝癌细胞增殖能力的影响。方法人肝癌细胞系MHCC97-H培养液中分别加入0.25％和50％MSC的条件培养基（MSC-CM），采用CyQUANT细胞增殖实验检测吸光度A值变化。在MHCC97-H细胞培养液中添加50％MSC-CM，荧光实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测肿瘤增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67抗原的变化。16只裸鼠皮下接种MHCC97-H细胞后，实验组经静脉注射MSC，1×10。个／次，每周3次，对照组静脉注射PBS；比较肿瘤体积。结果培养液中加入MSC-CM后A值依次为211．65±54．72、236．24±57．15和283．59±62．16（P〈0．05）。PCNA和Ki-67的表达水平分别升高1．8和7．0倍。实验组肿瘤体积（1745±455）mm^3大于对照组（972±568）mm^3（P〈0．05），肿瘤体积平均增加速度（56．0±26．1）mm^3／d高于对照组（32．4±14．5）mm3／d（P〈0．05）。结论骨髓间充质干细胞可促进肝癌细胞系MHCC97-H的增殖。
- 李国才武金才孙冰生刘道永钦伦秀
- 关键词：肝细胞间充质干细胞增殖
- 应用滤过富集法检测肝癌患者外周血中肿瘤细胞被引量：6
- 2007年
- 目的建立一种循环肿瘤细胞的检测方法,探讨肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞在肿瘤进展中的意义。方法肝癌细胞株HCC97-L经滤过富集后测定肿瘤细胞的检出率以检测该方法的敏感性,采用该方法滤过富集32例肝细胞癌(HCC)患者、15例肝良性病变患者和10例正常健康对照的外周血中循环肿瘤细胞,用细胞角蛋白8/18(CK8/18)行免疫荧光检测结合显微镜下形态学观察,判断并计数肿瘤细胞。结果HCC97-L细胞检出率在40%～100%之间,平均为68%;Ⅰ～Ⅱ期患者,循环肿瘤细胞的阳性率为28.6%;Ⅲ～Ⅳ时,为88.9%。两组差异有统计学意义(P<0.01)。健康志愿者10例和肝良性病变患者15例外周血均未见CK8/18阳性肿瘤细胞。结论全血滤过富集法能简单、快速、有效的检出肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞,部分早期肿瘤已有肿瘤细胞的血源性播散;随着肿瘤进展血中肿瘤细胞也增加。
- 刘道永孙冰生武金才李国才任宁高冬梅钦伦秀
- 关键词：肿瘤细胞滤过
