华坤
- 作品数：19 被引量：117H指数：7
- 供职机构：吉林大学药学院再生医学科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氟化物对培养的破骨细胞基质金属蛋白酶-9的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 观察氟对培养的大鼠破骨细胞基质金属蛋白酶 9(Matrixmetalloproteinase 9,MMP 9)的影响。方法 机械分离新生大鼠四肢长骨的破骨细胞 ,于分离后 2h加入不同浓度的氟化物 ,应用免疫组织化学技术和原位杂交技术检测氟化物干预下培养的破骨细胞MMP 9的蛋白质和mRNA的表达。结果 随着染氟剂量的增加 ,破骨细胞内MMP 9的蛋白质表达增高 ,以 2 0 ,4 0mg/LF 组最为显著 ,同时破骨细胞内MMP 9mRNA表达亦增加 ,1 0 ,2 0 ,4 0mg/LF 组与对照组比较差异有显著性。结论 氟通过提高MMP 9的蛋白质和mRNA表达 。
- 华坤张秀云李广生
- 关键词：氟化物金属蛋白酶-9原位杂交骨代谢OC
- 过量氟对大鼠破骨细胞活性的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨过量氟对大鼠破骨细胞 (osteoclasts,OCs)活性的影响。方法 :对经饮水投氟 2 0周的大鼠胫骨进行常规组织切片 ,并对其进行 HE及抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)染色 ,观察染氟大鼠胫骨 OCs的变化。同时提取股骨干骺端的总蛋白质 ,应用蛋白质印迹法 (Western blotting)观察长骨干骺端基质金属蛋白酶 9(MMP- 9) (又称明胶酶 B)的变化。结果 :染氟组大鼠胫骨各个包被及干骺端 OCs增多 ,骨皮质密质骨松质化。常食加氟组、偏食对照组 (低钙偏食饲料组 )、偏食加氟组 TRAP阳性细胞数较对照组均有增加 ,但差异无显著性 (P>0 .0 5 )。Western blotting结果显示 ,常食加氟组大鼠干骺端 MMP- 9蛋白表达增高 ,与常食对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )。偏食加氟组与偏食对照组比较差异也有显著性 (P<0 .0 5 )。且二者与常食对照组差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :过量氟造成骨转换增高 ,破骨性骨吸收增强 ,低钙偏食是氟骨症的促发因素。氟可通过增强 MMP- 9的蛋白质表达来加强
- 华坤杨少娟张文岚李广生
- 关键词：氟化物中毒破骨细胞酸性磷酸酶明胶酶BWISTAR
- 氟化物对体外培养的大鼠破骨细胞活性的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 探讨氟对体外培养的大鼠破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)活性的影响。方法 通过机械分离大鼠乳鼠四肢长骨的方法培养破骨细胞 ,应用组织化学方法观察氟对培养的破骨细胞TRAP活性的影响 ;应用原位杂交方法观察氟对培养的破骨细胞MMP 9mRNA表达的影响。结果 染氟组单位面积的TRAP阳性细胞表达增加 ,各剂量组TRAP阳性细胞数分别为 15 4 2、16 0 0、170 6、179 0和 180 0个 /cm2 ,但差异无显著性 ;随着染氟剂量的增加 ,MMP 9mRNA的表达增加 ,以 1 0 0、2 0 0和 4 0 0mg/L染氟组最为明显 ,依次为 94 5 0、94 6 4和10 4 97,与对照组比较差异有显著性。结论 氟对破骨细胞MMP 9mRNA的表达有增强作用。
- 华坤卜丽莎李广生
- 关键词：氟化物体外培养破骨细胞活性氟中毒抗酒石酸酸性磷酸酶基质金属蛋白酶-9
- 氟对成骨细胞样细胞胞内钙和钙通道电流的影响被引量：19
- 2003年
- 目的 :观察氟 (Fluoride,F-)对培养的成骨细胞样细胞胞内钙和钙通道电流的影响。方法 :应用Fura 2负载的成骨细胞样细胞 ,通过紫外荧光分光光度仪测定细胞内游离钙的浓度 ,同时应用全细胞膜片钳技术记录成骨细胞样细胞钙通道的变化。结果 :氟可引起成骨细胞样细胞胞内钙增高 ,尤以 10 0ng/mlF-最为明显 ,与对照组比较差异显著 (P <0 .0 5 )。应用全细胞膜片钳技术发现 2 5ng/mlF-即可引起成骨细胞样细胞钙通道开放 ,随着染F-剂量的增加 ,Ca2 +通道电流的幅值增大 (P <0 .0 1) ,且F-对Ca2 +通道电流的兴奋作用呈剂量依赖性 (r =0 .9914)。结论 :F-可引起成骨细胞样细胞钙通道开放 ,从而导致细胞胞内钙浓度的增加。
- 华坤赵红黄民李广生
- 关键词：成骨细胞膜片钳氟骨症
- 中药脑血宝制剂对凝血和血小板聚集率的影响被引量：4
- 2001年
- 目的和方法 :本研究在体内、体外实验的基础上 ,通过测定血浆中活化的部分凝血活酶时间 (APTT)、凝血酶原时间 (PT)、抗凝血酶III(AT -Ⅲ )活性、凝血酶时间 (TT)、纤维蛋白原 (Fng)、纤溶酶原 (Plg)的变化以及血浆中血小板聚集率来观察脑血宝制剂对血液凝固过程不同阶段和血小板聚集率的影响 ,分析其抗血栓作用的机制。结果 :脑血宝预防组 ,血浆中APTT、PT均比血栓组延长 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,AT -Ⅲ的活性高于血栓组 (P <0 0 5 ,P<0 0 1) ,Fng含量低于血栓组 ,TT延长 ,Fng和TT呈负性相关关系 ,血小板聚集率明显低于血栓组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :脑血宝制剂对凝血的多个环节均有抑制作用 ,从而对抗血栓的形成。
- 华坤李天舒高玲祝世功
- 关键词：血栓形成血小板聚集率中草药凝血机制
- 氟化物对成骨细胞OPGL mRNA和M-CSF mRNA表达的影响被引量：17
- 2003年
- 目的 探讨氟对成骨细胞的骨保护蛋白配体 (OPGL)mRNA和巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)mR NA表达的影响。方法 应用酶消化法分离小鼠乳鼠成骨细胞 ,取第 3代成骨细胞 ,加入不同浓度的氟 6h ,提取细胞总RNA ,通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,观察成骨细胞分泌的OPGL和M CSF表达的变化。结果 在氟的作用下 ,成骨细胞的OPGLmRNA和M CSFmRNA的表达呈上升趋势 ,但未达到统计学差异水平。结论 氟有可能通过上调OPGL和M CSF的表达 。
- 华坤计国义李广生
- 关键词：MRNA表达成骨细胞OPGLM-CSF氟化物骨吸收活性
- 地氟病属于“钙矛盾疾病”被引量：35
- 2003年
- 膳食低钙是地氟病病区居民中的普遍现象 ,是地氟病 (氟骨症 )的主要促发和加重因素。低钙的作用不仅在于增加肠道氟的吸收 ,更在于它和过量氟同样都可引起甲状旁腺激素分泌增多 ,都可促进成骨、破骨功能活跃。过量氟可进一步加重机体缺钙。我们最近的研究证明 ,氟中毒大鼠肝、肾、脑组织 [Ca2 + ]i 升高 ,培养的成骨细胞样细胞染氟后细胞内钙亦增加 ;即氟中毒存在着全身缺钙继而细胞内钙增多的钙矛盾现象 ,属于钙矛盾疾病。为控制和消除地氟病危害 。
- 李广生张文岚华坤李洪岩徐辉
- 关键词：地氟病缺钙氟骨症钙营养
- 慢性氟中毒时成骨细胞激活的机制
- 本文从四个方面探讨了慢性氟中毒对成骨细胞激活的机制:1.过量氟对体外培养成骨系细胞的作用;2.钙矛盾在激活成骨细胞中的作用;3.氟对成骨细胞增生分化的调控网络的作用;4.过量氟激活成骨细胞的机制.
- 李广生张文岚华坤李洪岩
- 关键词：慢性氟中毒成骨细胞
- 文献传递
- 地氟病属于“钙矛盾疾病”
- ＜正＞ 通过对流行病学资料的分析和对我们近年来实验研究结果的总结,我们认为,膳食低钙是地氟病（氟骨症）的主要促发和加重因素;氟骨症从发病机制上属于“钙矛盾疾病”（calciumparadox disease）。“钙矛盾”...
- 李广生张文岚华坤李洪岩徐辉
- 文献传递
- 氟对大鼠破骨细胞基质金属蛋白酶-9的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 观察氟对大鼠破骨细胞分泌的基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的影响。方法 采用 westernblot技术观察染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的表达 ;应用免疫组织化学方法观察氟对体外培养的破骨细胞MMP- 9的表达的影响。结果 染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的蛋白表达增高 ;氟可使体外培养的破骨细胞MMP- 9的蛋白表达增高。结论 氟通过提高破骨细胞的 MMP- 9的表达而致破骨性骨吸收活性增强。
- 孙波华坤李彤李广生
- 关键词：破骨细胞基质金属蛋白酶9WESTERN骨吸收活性氟骨症
