唐波
- 作品数：12 被引量：29H指数：4
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- 抗重组猪三十九肽胆囊收缩素卵黄抗体的制备被引量：1
- 2007年
- 制备重组猪三十九肽胆囊收缩素(GST-CCK39),以其为抗原免疫28周龄的蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价卵黄抗体,并用免疫琼脂扩散试验、ELISA、Dot-ELISA检测其效价及特异性。结果表明,免疫琼脂扩散测得特异性抗体效价达1∶16以上,ELISA效价达1∶12 800以上;Dot-ELISA显示所获得卵黄抗体具有较强的特异性;高效价,特异性的卵黄抗体可维持50 d以上。表明用重组蛋白GST-CCK39免疫蛋鸡后能获得效价高、特异性强的卵黄抗体。
- 曹军徐建生成大荣孙怀昌唐波
- 关键词：融合蛋白卵黄抗体
- 大肠杆菌F18菌毛A亚单位基因的多样性分析被引量：5
- 2005年
- 根据已经发表的大肠杆菌F18ab菌毛A亚单位(FedA/ab)的基因序列(fedA/ab)设计1对引物,利用PCR技术从本实验室保存的10株大肠杆菌(F107/86、YCED1、YCED2、C、D、E、12F、2134P、8199、8813)中分别扩增到一段序列,并克隆至pGEM-T载体,获得重组质粒TF107A、TYCED1A、TYCED2A、TCA、TDA、TEA、T12FA、T8813A、T8199A、T2134PA。通过序列测定,并与已发表的fedA/ab进行比较、基因树分析,可将这10个菌株分为2个基因群,其中F107/86、YCED1、YCED2、C、D、12F与fedA/ab具有高度同源性,属于fedA/ab,大小为513bp;E、8813、8199、2134P构成另一单独的分支,属于fedA/ac,大小为516bp。
- 成大荣徐建生曹军唐波吕玲孙怀昌高崧
- 关键词：大肠杆菌F18菌毛基因多样性
- 大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位基因的克隆与鉴定被引量：7
- 2004年
- 根据已发表的大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位 (FedF/ab)的基因 (fedF/ab)序列 ,设计了 1对引物 ,利用PCR技术从大肠埃希氏菌F10 7/ 86、YCED1、YCED2、C、D和 12F株中分别扩增获得了一段序列 ,并克隆至 pGEM T载体 ,获得了重组质粒TF10 7F、TYCED1F、TYCED2F、TCF、TDF、T12FF。经琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析 ,6个重组质粒的大小均为 90 3bp ,与fedF/ab基因大小一致。其中大肠埃希氏菌F10 7/ 86、YCED1、C和 12F株的fedF基因序列完全相同 ;只有YCED2株在第 181位碱基处存在 1个C→T的无义变异差异 ,D株在第 6 5 5位碱基处存在 1个T→C变异差异并在氨基酸水平出现 1个S→P变异。结果表明 。
- 成大荣徐建生吕玲唐波曹军孙怀昌高崧
- 关键词：大肠埃希氏菌菌毛基因克隆仔猪水肿病
- 大肠杆菌F18ac菌毛F亚单位基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2004年
- 根据已经发表的 F1 8ab菌毛 F亚单位(Fed F/ ab)的基因 (fed F/ ab) ,设计一对引物 ,利用 PCR技术从表达 F1 8ac菌毛的大肠杆菌2 1 3 4P株、81 99株、881 3株中分别扩增到一段序列 ,并克隆至 p GEM-T载体 ,获得重组质粒T881 3 F、T81 99F、T2 1 3 4PF。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明 ,该 3个序列大小均为 90 3bp,与 fed F/ ab大小一致且具有较高的同源性(99.4% ) ,推导的 Fed F/ ac氨基酸序列与 Fed F/ab同源性为 98.3 %。数据表明该实验所克隆的序列均为 F1 8ac菌毛 F亚单位 (Fed F/ ac)的基因 (fed F/ ac)。
- 成大荣徐建生孙怀昌唐波吕玲曹军
- 关键词：大肠杆菌菌毛基因克隆
- 猪霉形体病的监控与预警预报
- 2004年
- 曹军唐波吕玲徐建生
- 关键词：霉形体病肺炎霉形体病原学分子生物学
- F18ac菌毛A亚单位基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2005年
- 根据已经发表的F18ab菌毛A亚单位 (FedA/ab)的基因 (fedA/ab) [1] ,设计一对引物 ,利用PCR技术从表达F18ac菌毛的大肠杆菌 2 134P株[2 ] 、8199株[3 ] 、8813株[3 ] 中分别扩增到一段序列 ,并克隆至 pGEM_T载体 ,获得重组质粒T2 134PA、T8199A、T8813A。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明 ,该 3个序列大小均为 5 16bp ,与fedA/ab(5 13bp)具有较高的同源性 ,分别为 96 3%、96 5 %、95 9% ,推导的Fed/ac氨基酸序列与FedA/ab同源性分别为 93 0 %、93 6 %、92 4 %。数据表明该实验所克隆的序列均为F18ac菌毛A亚单位 (FedA/ac)的基因 (fedA/ac)。
- 成大荣徐建生吕玲曹军唐波孙怀昌
- 关键词：大肠杆菌菌毛基因
- 禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备与初步应用被引量：3
- 2006年
- 利用提纯的禽脑脊髓炎病毒(AEV)Van Roekel株作为免疫原,免疫6周龄BALB/c小鼠,采取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选,间接免疫荧光法(IFA)和免疫组织化学法鉴定,经3次亚克隆得到了稳定分泌抗AEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株F11和G2,制备了腹水,并利用该单克隆抗体初步建立了Dot-ELISA、间接ELISA和IFA等特异性检测AEV抗原的方法。
- 徐建生唐波成大荣董国雄吕玲曹军
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体
- 肉鸡大肠杆菌性脑炎的诊治
- 2005年
- 汤立松唐波徐建生
- 关键词：发病情况临床症状病变机理
- 浅谈鸡球虫疫苗使用中的几个误区
- 2005年
- 刘新建唐波徐建生
- 关键词：球虫病疫苗垫料管理免疫程序
- 禽脑脊髓炎病毒结构蛋白VP3基因真核表达载体的构建及其免疫被引量：10
- 2006年
- 根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)1 143株结构蛋白VP 3基因的序列,设计1对特异性引物,经PCR从原核表达载体pET-VP 3中扩增出VP 3基因片段,克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段,定向克隆入pcDNA 3.1(+)载体,转化大肠杆菌DH 5α,鉴定后大量提取质粒,转染CO S-1细胞,用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB/c小鼠进行免疫,结果2次免疫后就检测到特异性抗体,表明该载体在动物体内有较高的表达水平,可用于动物体内免疫,为进一步研究AEV的核酸疫苗打下了基础。
- 徐建生唐波成大荣曹军吕玲周晓昕
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒VP3真核表达DNA疫苗
