唐蕾
- 作品数：70 被引量：216H指数：9
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 脱镁叶绿酸结合蛋白的分离纯化与抑菌性研究
- 目的:研究在金黄色葡萄球菌中与脱镁叶绿酸结合的蛋白,为进一步探究脱镁叶绿酸的抑菌机制奠定基础。方法:1.采用化学及酶法制备脱镁叶绿酸,根据液质联用及可见一紫外吸收对产物进行鉴定。2.将金黄色葡萄球菌涂布于含不同脱镁叶绿酸...
- 唐蕾徐磊
- 文献传递
- 大肠杆菌中芥蓝抗坏血酸过氧化物酶基因的高效表达
- 2013年
- 将芥蓝抗坏血酸过氧化物酶(Apx)在大肠杆菌中高效表达。以芸薹属植物apx保守区基因序列为基础,利用PCR,RACE技术从芥蓝中扩增得到全长为753 bp的芥蓝apx编码基因,用DNAMAN V6软件分析该基因氨基酸组成,计算出蛋白分子质量约为27.6 kDa。通过构建重组质粒pET-28a-apx,转化大肠杆菌E.coli BL21,实现了芥蓝Apx的可溶性表达。通过单因素实验优化诱导表达条件,结果表明:0.2 mmol/L IPTG,23℃诱导培养10 h为最佳诱导条件。采用Ni2+亲和层析,纯化了重组蛋白,并得到重组酶最适反应条件为pH 6.5和40℃。为进一步研究Apx的生理特性和功能打下基础。
- 黄加保唐蕾华子安毛忠贵
- 关键词：芥蓝抗坏血酸过氧化物酶大肠杆菌
- Genome shuffling筛选ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响被引量：8
- 2016年
- 【目的】从代谢流量分配的角度,探讨Genome shuffling导致链霉菌ε-聚赖氨酸合成量提升的原因。【方法】从葡萄糖耐受型的亲本菌株Streptomyces sp.AS32和ε-聚赖氨酸耐受型的亲本菌株Streptomyces albulus F15出发,进行三轮Genome shuffling,筛选得到ε-聚赖氨酸产量提高的链霉菌株Streptomyces sp.AF3-44,采用通量分析方法构建链霉菌ε-聚赖氨酸合成代谢网络,并对上述3株菌的代谢通量进行比较。【结果】AF3-44的ε-聚赖氨酸摇瓶产量为3.1 g/L,较AS32和F15分别提高了34%和29%。3株菌株中AS32三羧酸循环(TCA)的代谢通量最高;F15磷酸戊糖途径(PPP)代谢通量最高;AF3-44流向赖氨酸合成前体天冬氨酸以及ε-聚赖氨酸的通量最高,TCA和PPP通量位于两亲本菌株的中间水平,其中TCA中流向异柠檬酸的通量分别为AS32和F15的77%和116%,PPP中流向5-磷酸核酮糖的通量分别为AS32和F15的149%和92%。【结论】Genome shuffling导致了代谢流的重新分布,流向前体赖氨酸和ε-聚赖氨酸通量的增加,以及PPP和TCA通量配比的改变是链霉菌ε-聚赖氨酸合成量增加的重要因素。
- 李双颜鹏曾晨张宏建毛忠贵唐蕾
- 关键词：GENOMESHUFFLING代谢通量代谢网络Ε-聚赖氨酸
- 外源添加维生素C对链霉菌ε-聚赖氨酸发酵的影响被引量：2
- 2018年
- 采用荧光染色分析ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)产生菌Streptomyces sp. AF3-44在摇瓶发酵过程中胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)水平与菌体活力,比较添加Vc对ε-PL产量、抗氧化酶类活性、总抗氧化能力、细胞膜脂成分及细胞氧化损伤的影响,并在5 L发酵罐上对比了添加Vc后分批发酵过程参数的变化。在摇瓶发酵过程中,随着p H值降低和ε-PL浓度的上升,Streptomyces sp. AF3-44胞内ROS累积,菌体活力下降;而Vc的添加提高了细胞的总抗氧化能力及膜脂中不饱和脂肪酸所占比例,减少了氧化损伤;在5 L发酵罐中添加Vc,分批发酵44 h,ε-PL产量为7. 73 g/L,为不添加Vc发酵的1. 5倍。通过外源添加抗氧化剂,增强菌体抗氧化能力,减少氧化损伤,为提升链霉菌ε-PL的发酵水平提供了一种新的策略。
- 孙浩本颜鹏陆鹏麒毛忠贵唐蕾
- 关键词：链霉菌Ε-聚赖氨酸
- 复合菌系RXS中木质纤维素降解酶类分析被引量：2
- 2016年
- 复合菌系RXS能分泌多种木质纤维素降解酶,为探究这些酶在木薯渣降解中的作用,对RXS的培养时间、酶作用的温度和pH值,以及添加金属离子对酶活性和降解效果的影响进行了研究。结果表明,在培养48 h后,木聚糖酶(Xylanase)、滤纸酶(FPAase)和内切葡聚糖酶(CMCase)酶活性均达到最大值(分别为56.02 U/m L、3.14U/m L和6.78 U/m L),pH=6.0(FPAase和Xylanase的最适pH值)、温度为55℃(FPAase和CMCase酶活性最高)条件下,RXS酶液处理可使木薯渣的失重率达到18.78%,纤维素和半纤维素质量分数分别由31.46%和20.19%下降到22.12%和12.23%。添加Cu^(2+)有效地抑制了酶液中FPAase和Xylanase的酶活性,木薯渣几乎不降解,纤维素和半纤维素组分质量分数基本不发生变化;分别添加Co^(2+)和Zn^(2+)时,对3种酶均有一定程度的抑制,木薯渣失重率仅为3.29%和4.70%;分别添加Fe^(2+)、Mg^(2+)时,FPAase酶活性被抑制,Xylanase与CMCase共同降解底物,木薯渣失重率分别达12.77%和15.81%,纤维素和半纤维素质量分数明显降低。研究表明,Xylanase与CMCase是复合菌系中降解木薯渣的关键酶,其协同作用可使木薯渣有效降解。
- 王荣胡方觊张庆华毛忠贵唐蕾
- 关键词：环境工程学复合菌系内切葡聚糖酶木聚糖酶木薯渣
- 一种新型木聚糖酶的基因克隆表达及酶学性质研究
- 木聚糖酶是一类可以将木聚糖降解成低聚木糖或木糖的酶的总称,广泛应用于食品、饲料、造纸、纺织等工业中。许多来源于木霉、曲霉以及芽孢杆菌等的木聚糖酶被商业化生产,但适用于不同需求,具有优良性质的木聚糖酶仍在不断开发之中。Cl...
- 刘雨露胡方觊王华广毛忠贵唐蕾
- 乙醇中十二碳二元酸重结晶时酯化程度的研究被引量：1
- 2014年
- 乙醇作为十二碳二元酸重结晶溶剂时,醇酸会发生酯化反应,从而影响重结晶产品纯度。影响酯化反应程度的因素主要有:十二碳二酸浓度、乙醇浓度、温度以及时间。该文研究了不同温度、不同乙醇浓度条件下酯生成量随时间的变化,确定了乙醇浓度、时间和温度3个因素对酯化程度影响的主次顺序,以及酯化程度最低和最高的因素组合。结果表明,影响酯化程度的因素主次顺序为:温度>时间>乙醇浓度,其中温度对酯化程度的影响非常显著。分别在酯化程度最低和最高的因素组合下对十二碳二酸进行重结晶,测得十二碳二酸纯度分别为97.26%和97.50%,酯化程度分别为0.06%和0.20%,晶习较重结晶前均得到一定程度的改善。
- 邵冲张建华唐蕾毛忠贵
- 关键词：十二碳二元酸乙醇酯化重结晶
- 木薯渣高效降解复合菌系RXS的氮源优化被引量：2
- 2015年
- 传统培养木薯渣降解复合菌系的蛋白胨纤维素(PCS)培养基成本较高,其主要成本来源于氮源——蛋白胨和酵母粉,限制了复合菌系的规模化应用。为解决此问题,从对木薯渣降解复合菌系RXS生长、产酶及底物降解的影响3个方面比较了胰蛋白胨/酵母粉及8种廉价氮源。结果表明,比较适宜的廉价氮源为鱼粉和玉米浆。接着探究了二者的复配比例对RXS的影响,并获得一种廉价培养基。考虑到为调节p H值和促进产酶添加的试剂对甲烷菌的毒害作用,以高温厌氧消化出水作为配料水以调节p H值,并比较了RXS在廉价培养基和PCS培养基上对木薯渣的降解效果。最终所得廉价培养基组成为木薯渣10 g/L、滤纸5 g/L、鱼粉4 g/L、玉米浆3.5 g/L,高温厌氧消化出水作为配料水。经成本核算,廉价培养基的成本仅为PCS培养基的1/6。并且复合菌系在廉价培养基上对木薯渣的降解率较PCS培养基提高了约37%。就工业化生产而言,该培养基不仅显示了对木质纤维素物质较好的降解效果,还节约了成本和减少了水的用量。
- 厉文成张庆华王柯毛忠贵唐蕾张建华张宏建
- 关键词：环境工程学复合菌系氮源木薯渣
- 培养条件对Trametes versicolor SYBC L3固态发酵产漆酶的影响被引量：5
- 2009年
- 对菌株Trametes versicolor SYBC L3产漆酶固态发酵培养基进行优化,确定该菌适宜的发酵条件为豆粕和木屑比例为1∶1,最适碳源是麦芽糖1.0%(w/w),最佳氮源是硝酸钠2.5%(w/w),硫酸铜浓度为0.02%(w/w)。在250 mL三角瓶中装样40 g,含水量为70%(w/w),提取最适pH为6.5,酶曲最适浸泡时间为4 h时,优化后菌株Trametes versicolor SYBC L3固态发酵所产漆酶酶活可达91.057U/g干曲。
- 王欣蔡宇杰廖祥儒唐蕾刘家扬张峰张大兵
- 关键词：白腐真菌漆酶固态发酵
- 红球菌染料脱色过氧化物酶的异源表达及活性分析
- 2021年
- 染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。由于能够降解蒽醌类染料,DyP成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活性的方法是DyP后续生产应用的关键所在。克隆来自红球菌(Rhodococcus jostii)的染料脱色过氧化物酶基因RhDypB,实现在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的高效表达,并对提高酶活性的方法进行了研究。利用一步克隆技术构建重组菌株pET24b-DypB/BL21,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导使蛋白表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,比较了外源添加血红素合成前体5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)和共表达大肠杆菌血红素合成途径中的谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA)对酶活性的影响。SDS-PAGE显示在40 kDa有明显的目的条带(纯度达到90%),蛋白质量浓度可达100 mg/L。添加5-ALA以及共表达hemA分别使血红素浓度增加至8.9和2.4μmol/L,相应的酶活性提高了102%和93%。RhDypB的可溶性表达与血红素含量的提升,为以血红素作为辅因子的过氧化物酶的相关研究提供依据。
- 皮倩夏荣唐蕾
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸红球菌
