孟瑛
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理更多>>
- 企业社会责任与企业财务绩效：无形资源的中介效应研究——基于珠三角对外贸易企业数据的实证分析
- 近几年，随着国际化的加速，越来越多的跨国公司相继开始对其供应链上下游企业实施严格的企业社会责任检查与监督。沃尔玛、麦当劳、迪斯尼等企业都不同程度的对我国供应商和分销商实施劳工标准检查。2008年金融危机的爆发，以及一系列...
- 孟瑛
- 关键词：财务绩效无形资源中介效应
- 新的β_2m基因打靶载体构建方法的建立被引量：3
- 2003年
- 目的 :采用常规方法 (同源片段的插入方向与Neo基因相同 )构建载体的同时 ,将两条同源臂反向插入Neo基因的两侧 ,构建新型小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT ,即增加 3’同源臂的长度 ,探讨同源臂插入位置和长度变化对同源重组率的影响。方法 :设计和合成引物 ,经PCR从小鼠 β2 m -pSV2△HXgpt基因组克隆分别扩增出长度为 0 8kb和 4 2kb的 β2 m基因片段 ,作为 5’和 3’同源臂 ,分别反向插入载体pPNT的Neo基因上游和下游 ,构建小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT。结果 :经过PCR、限制性内切酶及DNA序列测定 ,证实此两条同源臂包含小鼠 β2 m的起始区和表达区 ,表明载体构建成功。结论 :PCR技术是构建基因打靶载体的简单而可靠方法。增加 3’同源臂的长度对研究提高胚胎干细胞基因敲除的同源重组率提供新的途径。
- 孟瑛李树浓黄绍良
- 关键词：小鼠主要组织相容性复合物基因打靶
- 降低干细胞MHCⅠ类抗原基因表达的研究-β2m基因打靶载体的构建与正、反义核酸表达载体的构建、鉴定及其表达
- 该研究旨在构建小鼠β2m基因打靶载体和正、反义核酸表达载体,转染胚胎干细胞或者间充质干细胞,以封闭或者降低β2M基因的表达,从而降低MHCⅠ类分子的表达.然后定向诱导细胞分化,建立MHCⅠ类分子低表达或者不表达的细胞、组...
- 孟瑛
- 关键词：胚胎干细胞基因打靶Β2微球蛋白
- 文献传递
- 体外诱导胚胎干细胞向甲状腺细胞的分化(英文)被引量：1
- 2008年
- 背景:胚胎干细胞来源于发育早期囊胚的内细胞团,适当条件下能在体外维持未分化状态、正常二倍体核型及无限增殖能力,且具有多向分化潜能,能够发育分化成机体3个胚层的所有类型细胞。目的:观察体外定向诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的可行性及相关分子表达检测。设计、时间及地点:以细胞为对象的观察实验,于2004-01/2006-12在中山大学附属第二医院脐血库完成。材料:孕12.5～14.5d的Balb/c孕鼠用于胚成纤维细胞饲养层的制备。E14小鼠胚胎干细胞细胞株由美国哈佛大学Dr.Xu教授惠赠。成年昆明种小鼠用于甲状腺细胞的提取。方法:将制备的鼠胚成纤维饲养层接种于E14小鼠胚胎干细胞进行扩增培养。将脱离饲养层细胞后呈稳定克隆生长的胚胎干细胞诱导发育为胚胎体,再逐步添加促甲状腺素、胰岛素、碘化钾等共培养。以培养的成年昆明种小鼠甲状腺细胞为阳性对照。主要观察指标:①观察分化过程中细胞形态的变化。②免疫荧光法检测分化细胞标记物TSHR,PAX8,TTF-2,TTF-1的表达。③RT-PCR法检测分化细胞相关基因TSHR、PAX8,NIS,TPO,Tg的表达。结果:分化细胞边界清晰,呈圆形、类圆形、梭形或多角形贴壁生长。诱导培养第6天分化细胞中有甲状腺细胞特有基因PAX8,NIS,TPO,Tg,TSHR的表达,第8天检测到分化细胞中甲状腺细胞标记物TSHR,TTF-1,PAX8,TTF-2的表达,阳性细胞形态类似对照甲状腺细胞。结论:胚胎干细胞经胚胎体发育阶段,在特定条件下可定向分化为甲状腺细胞。
- 刘雄英蒋宁一张绪超周敦华陈贵兵胡莹莹刘幸光张弘刘生孟瑛黄绍良
- 关键词：胚胎干细胞分化甲状腺细胞促甲状腺素
- 体外定向诱导E14小鼠胚胎干细胞为肝细胞被引量：6
- 2004年
- 目的 探索体外定向诱导胚胎干细胞分化为肝细胞。 方法 常规方法培养E14小鼠胚胎干细胞(ESC)后,进行悬滴(?)悬浮培养,形成胚胎体,再进行分阶段定向诱导,在培养第9-12天、第12-18天以及第15-18天分别加入酸性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子和制瘤素M。利用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析特异性基因mRNA的表达,并用吲哚氰绿(ICG)摄取和过碘酸雪夫反应(PAS)分析细胞的分化及功能。 结果 在诱导培养的第13天,细胞出现肝细胞样改变。RT-PCR分析可见,在诱导的第6天和第12天分别可以检测到内胚层或卯黄囊分化标志基因--甲状腺素运载蛋白和α1抗胰蛋白酶的mRNA表达,第6天出现未成熟肝细胞标志基因--甲胎蛋白mRNA表达,第9天,第15天和第18天分别开始出现成熟肝细胞的特异性标志基因--白蛋白、葡萄糖6磷酸酶、酪氨酸氨基转移酶mRNA表达。同时,ESC源性肝细胞表现为ICG摄取和PAS反应阳性,经过诱导,ICG阳性细胞数约占85.1％。 结论 ESC源性肝细胞具备肝细胞特性,ESC有可能成为肝细胞治疗的替代供体细胞。
- 孟瑛黄绍良闵军郭中敏吴燕峰包蓉
- 关键词：成熟肝细胞MRNA表达干细胞ESC体外定向诱导小鼠胚胎
- 树突细胞融合瘤苗对脐血源性CIK/NK细胞杀伤作用的影响被引量：4
- 2005年
- 目的研究K562、Raji肿瘤细胞树突细胞(DC)融合瘤苗对脐血来源细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞/自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的影响。方法诱导脐血单个核细胞成为DC、CIK/NK细胞,通过聚乙二醇将灭活K562和Raji肿瘤细胞株与DC融合形成K562-DC和RajiDC融合瘤苗。实验分为3组:DC融合瘤苗组、灭活肿瘤细胞加DC组、单纯DC组。以MTT法评价各组不同共孵育刺激对CIK/NK细胞杀伤活性的影响。结果使用不同抗原刺激的各组脐血来源CIK/NK细胞对特定肿瘤的杀伤有促进作用,但不具有特异性。在20∶1效靶比时,K562-DC和RajiDC融合瘤苗组对Raji细胞的杀伤率分别为(75.44±4.19)%和(81.33±4.18)%,RajiDC融合瘤苗组对Raji细胞的杀伤率显著高于K562-DC融合瘤苗组(P<0.05);灭活K562+DC和灭活Raji+DC组对Raji细胞的杀伤率分别为(73.12±4.22)%和(80.49±4.27)%,灭活Raji+DC组对Raji细胞的杀伤率显著高于灭活K562+DC组(P<0.01),各组对K562细胞的杀伤率比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同效靶比CIK/NK细胞对不同种属的肿瘤细胞株的杀伤率比较,Raji细胞刺激的效果更强些。相同的肿瘤抗原刺激的或经灭活肿瘤细胞加DC刺激的CIK/NK细胞对不同种属的肿瘤细胞杀伤率差异无统计学意义。
- 黎阳黄绍良吴燕峰魏菁孟瑛周敦华包蓉
- 关键词：树突细胞杀伤细胞胎血
- 小鼠β_2m基因打靶载体的构建及序列分析被引量：2
- 2002年
- 目的 采用分子生物学技术 ,构建小鼠 β2 m基因打靶载体 ,为下一步进行胚胎干细胞基因敲除、建立β2 m基因缺陷型干细胞奠定基础。方法 通过设计和合成引物 ,经PCR从小鼠 β2 m pSV2ΔHXgpt基因组克隆分别扩增小鼠 β2 m的 4 2kb和 0 8kb片段作为同源臂 ,将其分别插入载体pPNT的neo基因两侧 ,构建小鼠 β2 m基因替换型打靶载体pPNT β2 m。结果 经过PCR、限制性酶酶切鉴定 ,以及DNA序列分析 ,证实此两条同源臂为包含小鼠 β2 m前三个外显子在内的基因片段 ,证明载体构建成功。结论 PCR法构建基因打靶载体是新颖。
- 孟瑛黄绍良余新炳徐劲吴忠道李树浓
- 关键词：Β2微球蛋白基因打靶分子生物学胚胎干细胞主要组织相容性复合体聚合酶链反应
- 体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的实验研究被引量：8
- 2007年
- 目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为甲状腺细胞的可行性及相关分子表达检测。方法 E14小鼠 ESCs 诱导发育为胚胎体,再逐步添加 TSH、胰岛素、碘化钾(KI)等共同培养。以培养的小鼠甲状腺细胞为阳性对照,观察分化过程中细胞形态变化;用免疫荧光法检测分化标志物 TSH 受体(TSHR)、paired box gene 8(PAX8)、thyroid transcription factor-2(TW-2)、thyroidtranscription factor-1(TTF-1)的表达;RT-PCR 法检测分化相关基因 TSHR、PAX8、钠碘同向转运体(NIS)、过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(Tg)的表达。结果诱导培养第6天分化细胞中存在甲状腺细胞特有基因 PAX8、NIS、TPO、Tg、TSHR 的表达;第8天分化细胞中检测到甲状腺细胞标志物TSHR、TTF-1、PAX8、TTF-2的表达,阳性细胞形态类似对照组甲状腺细胞。结论 ESCs 经胚胎体发育阶段,在特定条件下可定向分化为甲状腺细胞。
- 刘雄英蒋宁一张绪超周敦华陈贵兵胡莹莹刘幸光张弘刘生孟瑛黄绍良
- 关键词：细胞分化细胞甲状腺
- 定向诱导小鼠ES细胞为肝脏细胞及其凝血因子Ⅷ,Ⅸ的表达被引量：1
- 2005年
- 凝血因子Ⅷ,Ⅸ缺陷导致血友病A和B的发生,肝细胞是产生凝血因子的器官,利用肝细胞进行替代治疗是纠正凝血因子缺陷的根本办法,但是其来源及利用存在难以克服的问题.ES细胞具有体外培养时保持未分化状态和无限的增殖能力,具有在一定条件下可以分化发育成各个胚层细胞的潜能,利用ES细胞源性肝细胞作为供体细胞,解决了肝细胞来源困难、增殖能力差的难题.体外分阶段定向诱导E14小鼠ES细胞分化为肝细胞,ICG摄取及PAS反应结果证实ES源性细胞具备肝细胞功能,在此基础上,利用RT-PCR法对诱导细胞初步进行了凝血因子Ⅷ,Ⅸ表达分析,为进一步开展利用ES细胞纠正凝血因子缺乏奠定了研究基础.
- 孟瑛黄绍良闵军郭中敏
- 关键词：ES细胞肝脏细胞RT-PCR法供体细胞胚层
- 降低干细胞MHCⅠ类抗原基因表达的研究
- 孟瑛
- 关键词：干细胞基因打靶反义核酸组织器官移植
