宋淑萍
- 作品数：11 被引量：83H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划黑龙江省自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 关于新型冠状病毒肺炎病员转运装备的现状与思考
- 2020年
- 目前新型冠状病毒来势汹汹,且这种病毒主要靠飞沫传播,部分省市采取对新冠肺炎患者集中收治。由于患者转运途中存在暴露与交叉感染的风险,因此对转运装备有一定要求,针对目前转运装备的现状进行分析并思考,促进我国转运装备技术的进步。
- 王栋宋淑萍陈爱宇卜云婷邢国华魏一史丽欣赵国辉张兆军
- 关键词：新型冠状病毒负压
- 中国东北地区3株日本脑炎病毒株的分离鉴定及基因分型被引量：10
- 2009年
- 从黑龙江省某3个猪场采集疑似为日本脑炎病毒感染的病、死猪的脏器以及全血，进行病毒的细胞培养，蚀斑纯化，间接免疫荧光试验，电镜下观察病毒粒子的形态，及RT—PCR检测。结果显示，盲传三代后，出现明显的细胞病变（CPE＋～CPE＋＋＋）；荧光显微镜下细胞胞质内呈现不同强度的绿色荧光信号；电镜下的病毒粒子为40-60nm的球型粒子；PCR检测为日本脑炎病毒阳性。通过对3株分离株腑扩增序列比较，此3株分离株为基因Ⅲ型。
- 张永欣符芳宋淑萍李曦吴东来
- 关键词：JEV间接免疫荧光电镜
- PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR GreenⅠ实时荧光PCR鉴别方法的建立被引量：11
- 2009年
- 根据猪生殖与呼吸综合征病毒高致病性毒株、经典毒株Nsp2基因序列的差异,应用Oligo软件设计了2对特异引物,建立了鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。用该方法检测JEV、CSFV、FMDV和PRCV均呈阴性,表明该方法特异性良好;敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1 TCID50/0.1 mL;批内、批间重复性试验显示,其变异系数均低于0.3%,具有良好的重复性。应用该方法对人工感染动物进行检测,自感染后第3、5、7、10、142、1 d分别采集全血,检测结果均为阳性。证实,本试验所建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可以快速、准确地鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株。
- 柴政李曦王小武符芳张永欣肖晶蔡雪辉周艳君宋淑萍
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒SYBR
- 五种重要猪病病毒基因芯片探针的建立及其应用被引量：19
- 2010年
- 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)的特异cDNA片段作为探针点制于氨基修饰的玻片上,以这5种细胞毒的核酸作为模板,进行不对称PCR扩增,制备靶物,经绿色荧光染料Cy3标记后,分别与cDNA微阵列的芯片探针进行杂交,杂交信号经Genepix 4000A扫描仪扫描。结果显示,该芯片探针可以特异地与Cy3标记的这5种靶物结合。用该基因芯片对100份现地采集的猪全血样品进行检测,检出PRRSV阳性样品26份,PCV-2阳性样品47份,PRRSV和PCV-2混合感染阳性样品17份,PPV阳性样品5份,PRV阳性样品2份,CSFV阳性样品20份。表明,本试验研制的cDNA芯片探针可以特异地检测这5种猪病病毒,具有良好的诊断应用前景。
- 符芳杨玉菊陈微晶张永欣蔡雪辉李曦宋淑萍
- 关键词：基因芯片猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪瘟病毒
- TTV1与TTV2 SYBR-Green I实时荧光PCR检测方法的建立和应用被引量：9
- 2010年
- 为建立输血性传播病毒(TTV)基因1型(TTV1)和TTV基因2型(TTV2)的检测方法,本研究根据TTV1与TTV2基因的非编码区域序列差异,设计了2对特异引物,建立了鉴别TTV1和TTV2的SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR方法。分别进行了特异性、敏感性及重复性检验,结果表明:重组质粒建立的标准曲线相关系数为99%;可以同时鉴别检测TTV1和TTV2,检测PCV2和PRRSV阳性样品均呈阴性,表明该方法具有良好的特异性;最低检出量为10 copies/μL;重复试验结果显示,TTV1组内和组间变异系数分别为0.14%和0.74%;TTV2组内和组间变异系数均为0.13%;检测现地采集的189份样品,TTV1阳性率32.3%,TTV2阳性率6.3%,TTV1和TTV2混合感染的阳性率28.6%。TTV检测方法的建立为猪群TTV病的流行病学调查提供了有效的手段。
- 陈欣符芳王伟李雪松李海忠宋淑萍李曦
- 国产化生物安全四级模式实验室建设被引量：5
- 2020年
- 介绍了国产化生物安全四级模式实验室的平面布局、自控系统及气密性检测结果,详细介绍了袋进袋出高效空气过滤单元、活毒废水处理系统、生物安全型双扉高压灭菌器、充气式气密门、机械压紧式气密门、气密性传递窗、化学淋浴系统等关键防护设备的性能。该实验室满足国家相关标准对工况转换和气密性的要求,提高了我国生物安全实验室的自主保障能力。
- 王栋承何蕊田金强祁建城卜云婷宋淑萍张宗兴常宗湧吴东来王笑梅
- 关键词：国产化自控系统气密性
- Ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：1
- 2010年
- 为了研究PCV2 Cap蛋白的检测方法,试验应用哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室猪病分子诊断组已构建的基因工程重组菌NLS-Cap M15,经IPTG诱导表达获得原核表达Ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白,经亲和层析纯化后免疫6周龄Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选获得了3株分泌Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为2C3、2F3、1E10。结果表明:2C3、2F3均属于IgG1型,1E10属于IgG2a亚型,轻链都是κ链;经Western-blot检测,获得的3株单抗均可以特异性的识别Cap蛋白;ELISA检测其腹水效价均为1.0×105;间接免疫荧光检测单抗2C3、2F3、1E10反应均为阳性,表明这3株单抗能够识别PCV2病毒。
- 李海忠符芳张永欣李曦宋淑萍
- 关键词：CAP蛋白单克隆抗体
- PRRSV和PCV-2以及PRV多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立被引量：23
- 2008年
- 根据GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因、猪圆环病毒2型(PCV-2)rep蛋白基因和猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的核苷酸序列分别设计了3对特异性引物,成功建立了同时检测PRRSV、PCV-2、PRV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR方法。敏感性试验结果显示,PRRSV、PCV-2的敏感性可达250拷贝/μL,PRV的敏感性可达500拷贝/μL。表明,该方法具有较好的特异性、重复性和敏感性,可以用于PRRSV、PCV-2和PRV的快速检测。
- 王小武符芳柴政孔令达蔡雪辉宋淑萍许红喜李曦
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病病毒
- 猪断奶后多系统消瘦综合症被引量：4
- 2002年
- 猪断奶后多系统消瘦综合症 (post-weaningmultisystemicwastingsyndrome ,PMWS)是近年来危害养猪业比较严重的疾病之一 ,它广泛存在于欧洲、亚洲和美洲等许多国家和地区 ,现日益受到各国的重视。现就该病的特征、分布及流行情况。
- 金红李媛宋晓华于康震宋淑萍
- 关键词：断奶
- 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒感染猪外周血单核细胞cDNA文库的构建
- 2009年
- 为应用CloneminerTMcDNA Library Construction Kit构建高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪的外周血单核细胞cDNA文库,以1×105TCID50PRRSV肌肉接种健康猪,攻毒后第3、5、7、9、14、21及28 d分别采集感染猪外周血,分离单核细胞,提取总RNA、mRNA,以mRNA为模板,通过引物Biotin-attB2-Oligo(dT)、SuperScript.ⅡRT合成5′末端具有attB1接头的cDNA。用柱层析方法纯化cDNA,纯化后的cDNA与pDONRTM222载体进行BP重组,于大肠杆菌DH10B转化,进行文库容量测定。结果表明,构建的高致病性PRRSV感染猪外周血单核细胞cDNA文库的库容量为1.36×107CFU,平均插入片段长度大于1 200 bp,重组率为94.3%,为进一步从文库中筛选未知细胞因子及相关基因提供了有效的工具。
- 肖晶符芳李海忠张永欣柴政蔡雪辉宋淑萍李曦
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒外周血单核细胞CDNA文库
