尹铁勇
- 作品数：24 被引量：92H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪链球菌2型感染家兔模型的研究
- 研究建立猪链球菌2型感染的家兔模型,以评价猪链球菌2型的毒力,探索猪链球菌病的发病机制。利用猪链球菌2型四川分离强毒菌株458撑通过腹腔注射接种大耳自家兔,观察其临床症状和病理变化,对猪链球菌2型感染家兔的动物模型做了系...
- 尹铁勇冯书章刘军祝令伟夏志平高丰
- 关键词：猪链球菌2型动物模型
- 文献传递
- 大肠杆菌志贺毒素stxB融合基因的构建及其高效表达被引量：4
- 2005年
- 利用 PCR方法 ,从肠出血性大肠杆菌 O15 7∶ H7的基因组 DNA中 ,分别扩增出 Stx1B和 Stx2 B亚基的结构基因片段 ,然后再通过 PCR将这 2个片段连接起来 ,并定向克隆到表达质粒 p ET2 8a的 Nco 和 Eco R 位点之间 ,构建了重组表达质粒 p MB1。将重组质粒转化到宿主菌 BL2 1(DE3)中 ,对重组菌株 BL2 1(p MB1)用 IPTG进行诱导表达 ,并对最佳诱导时间进行了探索。 SDS- PAGE电泳检测结果表明 ,重组菌株表达出了 16 30 0的目的蛋白 Stx2 B- L-Stx1B;经薄层扫描分析表明 ,表达量约占菌体总蛋白的 6 8.4 % ,且目的蛋白为包涵体表达 ,表达量约占细菌沉淀的84 .6 %。研究还表明 ,未用 IPTG诱导的 BL2 1(p MB1)菌株也可有少量目的蛋白的基础表达。不同诱导时间的结果表明 ,在 3～ 7h的诱导时间内 。
- 刘军冯书章齐翀孙洋祝令伟郭学军尹铁勇庄永菊
- 关键词：MB蛋白S融合基因志贺毒素薄层扫描IPTG
- 四川资阳地区猪链球菌2型检测及其特性比较研究被引量：16
- 2006年
- 目的对从四川省资阳及附近猪链球菌2型感染疫区采集的病料进行病原菌分离和特性比较研究。方法首先利用病原菌分离技术、多重定性PCR检测和荧光定量PCR检测技术进行病原菌的分离和鉴定;然后选取5株主要疫点代表菌株与1株国外参考菌株进行细菌药敏试验和实验动物腹腔接种感染试验;此外还对猪链球菌2型分离株基因组中的溶原性噬菌体进行了初步研究。结果(1)从采集的病料中分离到11株猪链球菌2型菌,都具有胞外因子(EF)和溶菌酶释放蛋白(MRP)两个特征性毒力因子;(2)6株试验菌株对氨苄青霉素、先锋必素、头胞克肟、乙酰螺旋霉素、万古霉素、复方新诺明和利福平等7种抗生素高度敏感。与国外参考菌株相比,资阳分离株具有链霉素抗性;(3)试验菌株对BALB/c鼠均具有一定的毒力,但毒力程度上有差异。资阳分离株449-1和国外参考株6#对鼠具有相同的强致死性(3/3死亡),资阳458分离株致死性较弱(0/3死亡),其它菌株具有中等强度的致死性。利用449-1、458和6#分离株进行家兔感染实验,各菌株均可引起家兔感染发病,死亡率分别是1/2、2/2和2/2;(4)国内首次获得了猪链球菌2型流行菌株匿藏着溶原性噬菌体的证据,该噬菌体与细菌毒力和适应性的关系有待深入研究。结论通过对资阳及附近地区猪链球菌2型分离株与国外分离株特性的比较研究,明确了流行菌株间在毒力和药物敏感性上存在着差异,细菌毒力差异表现为对动物种属的嗜性,并筛选出了猪链球菌病防治的可选择性药物。为进一步研究猪链球菌2型菌株的致病机理以及猪链球菌病的防治奠定了基础。
- 刘军石谦孙洋张东尹铁勇郭学军高宏伟涂长春冯书章
- 关键词：猪链球菌2型PCR药物敏感性
- EHECO157∶H7stx基因缺失突变株的构建及其特性被引量：1
- 2005年
- 针对肠出血性大肠杆菌 (EHEC) O1 5 7∶H7的 stx基因 ,通过 PCR扩增出缺失了 1 83bp的 stx基因片段 ,将其克隆到自杀性载体 p CVD4 4 2中 ,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒 p CVD4 4 2∷Δstx从大肠杆菌 SM1 0转到 O1 5 7∶ H7中 ,利用抗性标记和 PCR方法筛选出 O1 5 7∶ H7stx基因缺失突变菌株。Vero细胞毒性试验证实 ,该突变株不能产生完整的 Stx。动物试验表明 ,与强毒株相比该突变株的致病性明显降低。该突变株的构建为研究志贺毒素在 EHEC O1 5 7感染中所起的作用和研制 O1 5
- 孙洋刘军郭学军常国权尹铁勇冯书章
- 关键词：肠出血性大肠杆菌表型
- 猪链球菌2型毒力相关基因的分析
- 本研究用抑制消减杂交方法寻找强毒菌株与无毒参考菌株基因组水平的差异,采用三种不同的内切酶酶切上述菌株基因组获得了三套酶切片段,分别进行消减杂交.结果获得了三套差异文库共计42个特异性差异片段,所有差异片段均与已发表的全基...
- 齐翀刘军祝今伟孙洋纪雪尹铁勇冯书章
- 关键词：猪链球菌2型抑制性消减杂交毒力相关基因
- 出血性大肠杆菌O157 Eae-Stx1/2B融合蛋白的免疫学特性被引量：1
- 2007年
- 为了研究重构融合蛋白Eae-Stx1/2B免疫特性及对出血性大肠杆菌感染的免疫保护作用,进行了细胞粘附抑制试验和免疫保护试验。结果证明Eae-Stx1/2B融合蛋白免疫血清在体外能降低出血性大肠杆菌对HEp-2细胞的粘附作用,这一特性在出血性大肠杆菌疫苗设计中具有重要价值。以纯化的融合蛋白Eae-Stx1/2B为抗原对小鼠进行腹腔注射免疫和滴鼻免疫,ELISA检测结果显示,2次免疫后7 d,免疫组抗Eae-Stx1/2B融合蛋白和抗出血性大肠杆菌O157血清IgG抗体显著高于未免疫组;用出血性大肠杆菌O157强毒株EDL933攻击免疫小鼠,免疫组小鼠排菌时间显著缩短,免疫组小鼠存活率均高于未免疫组,免疫组小鼠体质量恢复增长较快。上述试验结果表明,Eae-Stx1/2B融合蛋白对出血性大肠杆菌感染有保护作用。
- 陈萍冯书章孙洋郭学军周博尹铁勇
- 关键词：出血性大肠杆菌免疫学特性
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7 stx/ler基因缺失突变疫苗株对小鼠的免疫
- 本文用所构建的肠出血性大肠杆菌O157:H7stx/ler双基因缺失突变株对小鼠进行免疫,研究其作为疫苗候选株的可行性.
- 孙洋刘军郭学军常国权尹铁勇冯书章
- 关键词：肠出血性大肠杆菌疫苗免疫
- 文献传递
- O157∶H7原噬菌体消除菌株的鉴定与分析被引量：2
- 2005年
- 目的 O15 7∶H7是一种重要的新发传染病病原 ,它主要引起出血性或非出血性腹泻 ,出血性结肠炎 (HC)或溶血性尿路综合征 (HUS)等。研究表明引起HC和HUS的主要毒力因子是由整合到O15 7基因组中的原噬菌体编码的志贺毒素(Stx) ,包括Stx1和Stx2 ,它们分别由原噬菌体 933v和 933w所编码。由于原噬菌体本身具有潜在的不稳定性 ,本研究以O15 7∶H786 - 2 4为始发菌株 ,将其进行传代培养 ,筛选原噬菌体消除菌株 ,对原噬菌体在O15 7基因组中的整合位点进行分析 ,并用Vero细胞对原噬菌体消除菌株的细胞毒性进行鉴定。结果筛选到了原噬菌体消除后的O15 7菌株 ,该菌株丧失了对Vero细胞的毒性作用。序列比较分析表明原噬菌体 933v的整合位点位于O15 7∶H7EDL933基因组中第 2 96 6 137位的相对位置 ,在整合位点两侧有一个 2 0bp的直接重复序列 ,原噬菌体 933w的整合位点位于基因组中第 1330 82 6位的相对位置 ,在整合位点两侧有一个 7bp的直接重复序列。该研究证实了编码Stx的原噬菌体具有不稳定性 ,原噬菌体对O15 7的致病性具有重要作用 ,也提示原噬菌体在致病菌的进化过程中也具有重要作用。
- 刘军冯书章孙洋郭学军常国权尹铁勇
- 关键词：O157:H7原噬菌体志贺毒素
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7基因缺失弱毒疫苗株的研究
- EHEC O157:H7是重要的新发传染病病原,它的主要致病特征之一是能引起人肠上皮细胞特征性的粘附与脱落(attaching and effacing,A/E)损伤,A/E损伤主要是由LEE致病岛所编码的毒力因子所引起...
- 孙洋刘军郭学军祝令伟周博尹铁勇冯书章
- 关键词：肠出血性大肠杆菌疫苗
- 文献传递
- 猪水肿病大肠杆菌O138 stx2e基因的克隆与序列分析
- 本文对猪水肿病大肠杆菌O138 stx2e基因进行了克隆与序列分析,为研制预防猪水肿病的疫苗奠定了分子基础.
- 刘军孙洋郭学军常国权尹铁勇冯书章
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌基因克隆
- 文献传递
