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文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生
  • 2篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇病毒
  • 2篇原核表达
  • 2篇冠状
  • 2篇冠状病毒
  • 2篇复制酶
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  • 1篇蛋白
  • 1篇血管
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  • 1篇血管紧张素
  • 1篇血管紧张素转...
  • 1篇抑制活性
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇禽流感
  • 1篇禽流感病
  • 1篇禽流感病毒
  • 1篇流感
  • 1篇酶蛋白
  • 1篇酶学性质
  • 1篇结构蛋白

机构

  • 4篇清华大学
  • 2篇福建农林大学
  • 2篇中国农业科学...
  • 1篇中国科学院

作者

  • 4篇庞海
  • 2篇刘怀然
  • 2篇孔宪刚
  • 2篇刘家森
  • 2篇吴德峰
  • 2篇孟庆文
  • 2篇陈淑红
  • 1篇陈吉龙
  • 1篇黄志勇
  • 1篇范克伟
  • 1篇姜宏德

传媒

  • 2篇家畜生态学报
  • 1篇中国病毒学
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2012
  • 2篇2005
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
SARS冠状病毒复制酶蛋白nsp8的原核表达被引量:2
2005年
以SARS冠状病毒(BJ01株)基因组RNA为模板,经RT-PCR扩增得到SARS-CoVnsp8基因,并克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pNSP8E。pNSP8E转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出可溶性的GST-nsp8融合蛋白,经亲和层析和自剪切获得了高纯度nsp8蛋白。以nsp8为抗原免疫家兔,制备了nsp8的多克隆抗体,为下一步研究其在病毒感染的细胞中的功能奠定了基础。
刘家森陈淑红刘怀然孟庆文庞海孔宪刚
关键词:复制酶SARS冠状病毒原核表达载体酶蛋白病毒复制PCR扩增
血管紧张素转化酶性质及胶原蛋白对其活性抑制效果的研究
2014年
血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)与人和动物血压调节密切相关,为高血压疾病的药物靶标,筛选ACE抑制剂可为研制新型高血压疾病预防药物提供可靠的先导化合物。试验从猪肺中提取ACE,首先对其酶学性质进行了试验分析,继而考察了三个不同商品化的胶原蛋白肽对ACE抑制活性的影响。采用分光光度法,以马尿酰-组氨酸-亮氨酸(Hip-His-Leu,HHL)为底物测定血管紧张素转化酶的活力。结果表明:血管紧张素转化酶的最适pH为8.0;最适温度为40℃;350mmol/L氯离子存在的情况下,能够明显提高ACE的活性;金属离子对酶活的影响表现出促进或抑制的作用。通过比较,在低温条件下提取的自制胶原蛋白肽的ACE抑制活性要高于另外两种商品化胶原蛋白肽产品。
李枭辰刘爽邓小霞王子华孙晓悦姜宏德吴德峰庞海
关键词:血管紧张素转化酶酶学性质胶原蛋白抑制活性
H5N1亚型禽流感病毒RNA聚合酶PB1_P亚基片段的表达、纯化和结晶被引量:1
2012年
根据GenBank中H5N1亚型禽流感病毒RNA聚合酶PB1基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒的PB1_P基因,克隆到原核表达载体pET-28a载体中,经PCR、酶切和测序分析后,鉴定出阳性重组子。将阳性质粒pET-28a/PB1_P转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.5mol/L IPTG,在37℃诱导表达4h,经SDS-PAGE和Western-blot检测,获得重组蛋白PB1_P表达。并经Ni-NTA柱亲和层析与柱层析纯化表达蛋白,采用悬滴气相扩散法对纯化蛋白进行结晶。结果成功构建pET-28a/PB1_P重组质粒,SDS-PAGE结果显示重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,Western-blot证明表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,经蛋白纯化、初筛结晶,得到PB1_P重组蛋白初筛晶体,为深入研究流感病毒聚合酶的生物学功能、开发新型H5N1亚型禽流感病毒检测试剂盒奠定了良好的基础。
范克伟庞海陈吉龙黄志勇吴德峰
关键词:克隆表达纯化
SARS冠状病毒非结构蛋白Nsp的原核表达
2005年
The gene of nonstructural protein 9 of SARS-coronavirus(SARS-CoV) was amplified using PCR from the product derivated from reverse transcription of SARS-CoV genome RNA,and was inserted into the multiple cloning sites of the expression vector pGEX-6p-1.Recombinant strain induced with IPTG expressed the specific soluble protein.The nsp9 protein was harvested and purified by affinity chromatography and processed by prescission protease.Polyclonal serum against the nsp9 protein was raised in rabbit.
刘家森陈淑红刘怀然孟庆文庞海孔宪刚
关键词:SARS冠状病毒复制酶
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