张志杰 作品数:5 被引量:54 H指数:4 供职机构: 南京农业大学动物科技学院动物繁殖研究室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
抑制素与乙肝表面抗原融合基因免疫对大鼠生殖能力的影响 被引量:11 2006年 90只大鼠随机分为5组(n=18),分别肌肉注射10、50、100μg抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒(pCIS)、50μg空载体(pcDNA3.1)和100μL生理盐水。20 d后加强免疫1次,对每组中的12只大鼠进行2次加强免疫。结果发现抑制素抗体P/N值随着免疫次数的增加而提高。100μg剂量组2次和3次免疫的成熟卵泡发育数分别比对照组多6.9和7.5个(P<0.05)。3次免疫后大鼠成熟卵泡发育数比2次免疫后显著提高(35.2±2.73 vs 31.0±0.92,P<0.05)。抑制素基因免疫组的胎盘数和窝产仔数高于对照组(P>0.05),抗体阳性鼠高于阴性鼠(P<0.05)。pCIS 3次免疫后抗体阳性鼠的抗体水平与成熟卵泡发育数的相关系数为0.45(P>0.05),与胎盘数的相关系数为0.77(P<0.05)。pCIS免疫大鼠动情期和产后血浆FSH水平高于对照组,抗体阳性鼠的血浆FSH水平高于阴性鼠,其中2次免疫后阳性组动情期FSH浓度极显著高于阴性组(P<0.01)。这些结果表明,抑制素基因免疫大鼠可促进大鼠的卵泡发育,提高血浆FSH水平,为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据。 茆达干 杨利国 何晓红 张志杰 张红琳关键词:抑制素 基因 免疫 生殖 卵泡抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒的构建及表达 被引量:35 2003年 目的 :构建高免疫原性的抑制素真核表达载体。方法 :通过PCR扩增pCMV S基因中的S基因片段 ,然后将抑制素α(1 32 )片段与S的融合基因克隆到真核表达质粒pcDNA13.1( ) :酶切、测序鉴定后 ,采用脂质体包裹法将重组质粒转染Hela细胞 ,用SDS PAGE和ELISA对其表达产物进行检测。用抑制素融合表达质粒免疫大白鼠 ,ELISA检测血中抗抑制素抗体水平。结果 :酶切鉴定和序列分析表明 ,融合基因的表达质粒pClS构建成功。表达质粒在HeLa细胞中获得了表达 ,融合蛋白的分子量约为 2 9kD ,融合蛋白具有抑制素免疫原性。重组质粒免疫使大白鼠产生了抗抑制素抗体。结论 :高免疫原性的抑制素表达质粒的构建为利用抑制素基因免疫技术诱导单胎动物生多胎奠定了基础。 茆达干 杨利国 曹少先 张志杰 何晓红关键词:卵泡抑制素 乙肝表面抗原 基因克隆 基因表达 表达质粒 真核表达载体 抑制素基因免疫的免疫反应性 被引量:11 2006年 通过应用抑制素真核表达质粒pcINH和抑制素融合表达质粒pCIS分别经肌肉注射免疫大鼠的2个系列试验,检测了免疫鼠抑制素抗体水平及抗体阳性鼠的比例。结果,抑制素质粒pcINH经脂质体介导免疫大鼠,50%(13/26)的个体产生了抑制素阳性抗体,40μg组产生的抗体水平最高;抑制素融合表达质粒pCIS免疫经盐酸普鲁卡因处理的大鼠,2次免疫获得了38.9%(23/54)的抗体阳性率,3次免疫获得55.6%(20/36)的抗体阳性率,100μg组产生的抗体水平最高;加强免疫可提高抗体的水平,但免疫剂量的增加并不一定能增加抗体阳性鼠的比例。 茆达干 杨利国 张志杰 何晓红 曹少先关键词:抑制素 基因免疫 佐剂 加强免疫 抑制素基因免疫大鼠的免疫应答与基因表达 被引量:8 2007年 为了研究抑制素基因免疫对大鼠免疫应答和发情的影响及免疫后抑制素的组织分布,将60只大鼠分为5组,每只分别肌肉注射10(T1)、50(T2)、100μg pCIS(T3),50μg pcDNA3.1(V)和生理盐水(S)。ELISA检测抑制素抗体水平,阴道涂片法检测大鼠的发情状况,免疫组化分析抑制素的组织分布。结果显示,不同剂量抑制素基因2次免疫10 d后抗体P/N值均显著升高(P<0.05),3次免疫10 d后T2和T3组抗体P/N值进一步显著升高(P<0.05),T3组抗体水平有高于T1和T2组的趋势(P>0.05);抑制素基因免疫对大鼠的发情无显著影响;3次免疫2周后心脏、肝脏、接种肌肉部位均未检出抑制素;卵巢、肾脏和垂体部位均检出抑制素;而脾脏部位,抑制素质粒免疫组检出抑制素,对照组则未检出抑制素。这些结果表明,免疫剂量和次数的增加没有导致大鼠产生明显的抑制素免疫耐受,抑制素基因免疫大鼠是相对安全的,抑制素的组织分布结果亦为抑制素基因免疫的作用机理研究提供了理论依据。 茆达干 张志杰 杨利国 何晓红 张红琳关键词:抑制素 基因免疫 安全性 猪卵泡抑制素基因免疫安全性研究 本文采用阴道涂片观察、免疫组化和酶免疫测定方法等方法,从生殖毒性、DNA残留、致畸等方面探讨卵泡抑制素基因免疫SD大鼠的安全性,为推动抑制素基因疫苗的临床与中试推广实验奠定基础。
1.抑制素基因免疫对大鼠发情周期... 张志杰关键词:抑制素 基因免疫 免疫组化 基因整合 文献传递 网络资源链接