张琛
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 供职机构：陕西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 华中五味子AFLP反应体系的建立被引量：6
- 2009年
- 目的:建立一个适于华中五味子研究用的AFLP反应体系。方法:以华中五味子硅胶干燥嫩叶为试材,采用改良CTAB法提取到高质量DNA。通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对MseⅠ/EcoRⅠ双酶切、连接、预扩增和选择性扩增过程中的关键因素进行分析。结果:双酶切6h,片段主要集中在250～2000bp;连接产物和预扩增产物最适稀释倍数均为10倍;预扩增产物经选择性引物E-ACT/M-CAT和E-ACA/M-CAG扩增,琼脂糖电泳检测其主带分别集中在250～375bp和500～750bp,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及银染,条带清晰可辨。结论:该体系具有稳定性高、重复性好等优点,可用于华中五味子AFLP分析。
- 罗成刘锦顾蔚张琛王喆之
- 关键词：华中五味子AFLP
- 携带不同数量增强子的嵌合型肝脏特异性启动子的构建及其体外实验研究
- 2012年
- 通过PCR手段成功获得肝细胞特异性启动子人α1-抗胰蛋白酶启动子hAATp(humanα1-antitrypsin promoter,hAATp)及具有增强子功能的肝脏特异的肝调控区HCR(hepatic controlregion,HCR)。在此基础上,通过分子克隆手段构建获得携带有不同数量的HCR增强子的嵌合型肝脏特异性hAAT启动子,并在下游连入报告基因Luciferase,然后将重组质粒转染人肝癌细胞系HepG2、小鼠肝癌细胞系Hepa1-6、人胚肾细胞系HEK293和人脑星形胶质母细胞瘤细胞系U87-MG,通过检测Luciferase表达活性分析携带不同数量增强子的肝脏特异性启动子的启动活性及其组织特异性。结果表明,携带有3个增强子的嵌合型肝脏特异性启动子活性及特异性最好,为肝脏类疾病的靶向性治疗研究奠定了基础。
- 李文博张伟峰陈胤伯王东阳张琛夏海滨
- 关键词：肝脏增强子特异性启动子靶向治疗
- 中介蝮Asn49-PLA2基因原核表达载体的构建及初步表达被引量：1
- 2008年
- 以来自中介蝮(G.intermedius)毒腺cDNA文库的3个新Asn49-PLA2基因(GI4-PLA2,GI5-PLA2及其突变体GI5′-PLA2)为模板,用PCR及DNA重组技术,将三个PLA2基因克隆到原核表达载体pQE-30,并在宿主菌E.coli Rosseta(DE3)中进行诱导表达.Bam HⅠ/HindⅢ双酶切及测序结果提示,成功构建了3个原核表达载体(pQE-30/GI4-PLA2,pQE-30/GI5-PLA2,pQE-30/GI5′-PLA2).SDS-PAGE结果表明,中介蝮的3个Asn49-PLA2基因在大肠杆菌中实现表达,而且在37℃、1mMIPTG的诱导条件下,GI4-PLA2和GI5-PLA2的最佳表达时间为25h,而GI5′-PLA2在15h有较高水平的表达.
- 侯彬张卫柱张侃张琛杨章民
- 关键词：中介蝮磷脂酶A2基因原核表达
- 血管内皮细胞生长因子及其表达调控研究进展被引量：10
- 2012年
- 现有研究表明血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在调节血管生成中发挥着重要作用。VEGF的表达调控受多种因素的影响,其异常表达与肿瘤及某些疾病的发生有着密切的关系。通过研究VEGF的表达调控及其参与的重要信号通路,寻找出调控VEGF表达及其生物学功能的药物作用靶点,对于肿瘤及某些疾病的治疗具有重要的理论意义和实际应用价值。本文将着重对VEGF家族及其受体、VEGF的表达调控等方面进行综述。
- 张琛夏海滨
- 关键词：VEGFVEGF受体
