张立英
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TNF-α基因siRNA真核表达载体的构建及其对A549细胞TNF-α和TGF-β1表达的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:构建靶向肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,观察其对人肺腺癌A549细胞中TNF-α和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:依据GenBank中人TNF-α(NM_000594)序列和siRNA靶序列设计原则,设计并合成一对针对TNF-α的特异性序列(siTNF-α)和一对无关序列(siCon)。退火合成DNA双链,再分别重组入pRNAT-U6.1载体,经过PCR和DNA测序鉴定。将构建好的重组载体pRNAT-U6.1-siTNF-α、pRNAT-U6.1-siCon及空载体pRNAT-U6.1用脂质体介导转染A549细胞株,分别采用RealtimePCR和Westernblot方法检测细胞中TNF-α和TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平。结果:PCR和DNA测序鉴定证实载体构建成功;转染pRNAT-U6.1-siTNF-α的A549细胞中TNF-α和TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均低于其他3组(FmRNA=478.663,4.081;F蛋白=123.420,6.312,P均<0.05)。结论:成功构建了靶向TNF-α基因的siRNA真核表达载体,该载体能够有效沉默A549细胞中TNF-α的表达,TGF-β1基因表达亦受到抑制。
- 张立英刘绍霞赵国强张国俊
- 关键词：肿瘤坏死因子Α转化生长因子-Β1A549细胞
- 腺病毒siRNA沉默TGF-β1对肺间质纤维化大鼠TGF-β1的表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:研究肺间质纤维化大鼠肺组织中TGF-β1基因表达沉默对疾病进展的影响。方法:构建TGF-β1腺病毒siRNA载体。75只大鼠随机分为空白对照组15只,模型对照组、无关siRNA组和siRNA干预组各20只,后3组大鼠气管内滴入博莱霉素建立肺间质纤维化模型,24h后,空白对照组、模型对照组分别经鼻滴入100μL的生理盐水,无关siRNA组、siRNA干预组分别滴入等体积的重组腺病毒pAdeno-X-siCon和pAdeno-X-siTGF。第7、14、28天,采用免疫组化法检测肺组织TGF-β1蛋白的表达;第14天,采用Real-timePCR和Westernblot分别检测肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1mRNA和蛋白的表达;第7、14、28天,采用ELISA法检测肺泡灌洗液和外周血中TGF-β1的表达水平。结果:第7、14、28天,4组大鼠肺组织中TGF-β1蛋白的表达和肺泡灌洗液中TGF-β1的水平差异均有统计学意义,第14天,4组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1mRNA的表达差异亦有统计学意义(P均<0.05),且模型对照组、无关siRNA组和siRNA干预组以上指标均高于正常对照组,siRNA干预组以上指标低于模型对照组、无关siRNA组(P<0.05)。结论:沉默TGF-β1对大鼠肺间质纤维化的形成和发展可能有抑制作用。
- 刘绍霞张立英赵国强张国俊
- 关键词：肺间质纤维化转化生长因子-Β1腺病毒
- 10例布氏杆菌病的诊治体会被引量：1
- 2011年
- 布氏杆菌病又称波浪热,是由布氏杆菌所引起的以长期发热、关节疼痛、肝、脾、淋巴结肿大和慢性化为特征的人畜共患的传染病。近年来,临床表现多不典型,同时,布氏杆菌病在我国主要流行于内蒙、吉林、黑龙江和新疆、西藏等牧区,其他地区多为散发,临床医师对该病的认识逐渐淡化,容易造成误诊。本文就郑州大学第一附属医院2007年3月—2009年3月收治的10例布氏杆菌病患者的诊治经过进行分析。
- 刘绍霞张立英周言陈闪闪张国俊
- 关键词：布氏杆菌病发热关节痛
- 还原型谷胱甘肽对慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者血气指标的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨还原型谷胱甘肽对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血气指标的影响。方法:将40例符合入选标准的COPD急性发作期患者,随机均分为治疗组和对照组,治疗组患者除给予常规治疗外,加用注射用还原型谷胱甘肽2.4g·d-1,加入到5%葡萄糖溶液250mL中静脉滴注,qd,连用10d;对照组仅给予常规治疗。观察治疗前后2组患者动脉血气指标、6min步行试验及主观感觉的变化。结果:治疗10d后,2组患者动脉血氧分压(PaO2)均较治疗前有显著提高,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)均较治疗前显著降低(P<0.05),且2组间PaO2、PaCO2改善情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组显著优于对照组。结论:COPD患者体内存在氧化-抗氧化失衡,治疗中加用还原型谷胱甘肽可对抗机体氧化损伤,改善患者缺氧状况。
- 刘绍霞张立英李金红张国俊
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病动脉血氧分压动脉血二氧化碳分压
